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双酚A及其替代物双酚S对鱼类免疫和神经内分泌系统的毒性效应与作用机理

摘要第6-9页
ABSTRACT第9-12页
缩略词中英文对照表第13-20页
第一章 绪论第20-37页
    1.1 环境雌激素第20-21页
    1.2 双酚A概述及污染现状第21-23页
    1.3 双酚A对鱼类的毒性作用第23-28页
        1.3.1 双酚A对生长发育的影响第23-24页
        1.3.2 双酚A对鱼类的内分泌干扰作用第24-25页
        1.3.3 双酚A对鱼类的免疫毒性作用第25-27页
        1.3.4 双酚A对鱼类的神经内分泌系统的毒性作用第27-28页
    1.4 双酚S概述及研究现状第28-30页
    1.5 研究目的与意义第30-32页
        1.5.1 实验材料的选取第30-31页
        1.5.2 目的与意义第31-32页
    1.6 研究内容和技术路线第32-36页
    1.7 课题来源第36-37页
第二章 双酚A对鱼类的免疫毒性及致毒机理研究第37-74页
    2.1 实验材料第38-41页
        2.1.1 实验动物及饲养条件第38页
        2.1.2 主要试剂第38页
        2.1.3 主要实验试剂盒第38页
        2.1.4 其他试剂和耗材第38-39页
        2.1.5 主要溶液和配制第39-40页
        2.1.6 主要仪器与设备第40-41页
    2.2 实验设计第41-42页
    2.3 实验方法第42-52页
        2.3.1 原代巨噬细胞的提取第42页
        2.3.2 红鲤鱼头肾巨噬细胞增殖实验第42-43页
        2.3.3 原代巨噬细胞吞菌实验第43-44页
        2.3.4 氧化还原参数测定第44-46页
        2.3.5 一氧化氮和一氧化氮合酶的测定第46-47页
        2.3.6 免疫基因水平的变化第47-49页
        2.3.7 细胞凋亡(TUNEL检测)第49-50页
        2.3.8 双酚A对鱼类免疫系统的干扰与雌激素受体(ER)通路的关系第50-51页
        2.3.9 双酚A对鱼类免疫系统的干扰与转录因子Nuclear factor-κB(NFκB)的关系第51-52页
        2.3.10 数据处理第52页
    2.4 实验结果第52-65页
        2.4.1 巨噬细胞的鉴定第52-53页
        2.4.2 BPA对巨噬细胞活性的影响第53-54页
        2.4.3 BPA对巨噬细胞抗菌的影响第54-56页
        2.4.4 BPA对巨噬细胞抗氧化系统的影响第56-58页
        2.4.5 BPA对一氧化氮和一氧化氮合酶的影响第58-59页
        2.4.6 BPA对免疫相关基因的影响第59-60页
        2.4.7 BPA对细胞凋亡的影响第60-61页
        2.4.8 双酚A对鱼类免疫系统的机制研究第61-65页
    2.5 讨论第65-72页
        2.5.1 巨噬细胞是典型的非特异性免疫细胞第65-66页
        2.5.2 氧化压迫和氧化防御第66-68页
        2.5.3 免疫调控第68页
        2.5.4 细胞凋亡第68-69页
        2.5.5 雌激素受体和NFκB通路第69-72页
    2.6 小结第72-74页
第三章 双酚S对鱼类的免疫毒性及制毒机理研究第74-111页
    3.1 实验材料第74-75页
        3.1.1 实验动物及饲养条件第74页
        3.1.2 主要试剂第74-75页
        3.1.3 主要实验试剂盒第75页
        3.1.4 其他试剂和耗材第75页
        3.1.5 主要溶液和配制第75页
        3.1.6 主要仪器与设备第75页
    3.2 实验设计第75-76页
    3.3 实验方法第76-83页
        3.3.1 BPS的致死浓度和半致死浓度测定第76页
        3.3.2 BPS的对原代巨噬细胞吞菌能力的影响第76-77页
        3.3.3 氧化还原参数测定第77-79页
        3.3.4 一氧化氮(NO)和一氧化氮合酶(NOS)的测定第79页
        3.3.5 免疫基因水平的变化第79-80页
        3.3.6 细胞凋亡第80-82页
        3.3.7 双酚S对鱼类免疫系统的干扰与雌激素受体(ER)通路的关系第82页
        3.3.8 数据处理第82-83页
    3.4 结果第83-102页
        3.4.1 双酚S的致死浓度和半致死浓度第83-84页
        3.4.2 双酚S的对原代巨噬细胞吞菌能力的影响第84-86页
        3.4.3 双酚S对巨噬细胞抗氧化系统的影响第86-89页
        3.4.4 双酚S对一氧化氮和一氧化氮合酶的影响第89-90页
        3.4.5 BPS对免疫相关基因的影响第90-93页
        3.4.6 BPS对细胞凋亡的影响第93-95页
        3.4.7 相同浓度BPS和BPA对细胞免疫系统的影响第95-99页
        3.4.8 双酚S对鱼类免疫系统的干扰与雌激素受体(ER)通路的关系第99-102页
    3.5 讨论第102-109页
        3.5.1 双酚S对巨噬细胞的急性毒性第102页
        3.5.2 双酚S对巨噬细胞的氧化压迫第102-104页
        3.5.3 双酚S对巨噬细胞的免疫干扰作用第104-107页
        3.5.4 双酚S对有类似于BPA的免疫干扰作用第107-108页
        3.5.5 双酚S对鱼类免疫系统的干扰与雌激素受体(ER)通路的关系第108-109页
    3.6 小结第109-111页
第四章 双酚A和双酚S对鱼类神经内分泌系统的影响及其机理研究第111-139页
    4.1 实验材料第113-114页
        4.1.1 实验动物及饲养条件第113页
        4.1.2 主要试剂第113页
        4.1.3 主要实验试剂盒第113页
        4.1.4 其他试剂和耗材第113-114页
        4.1.5 主要溶液和配制第114页
        4.1.6 主要仪器与设备第114页
    4.2 实验设计第114-115页
    4.3 实验方法第115-119页
        4.3.1 斑马鱼胚胎染毒与样品采集第115页
        4.3.2 双酚A暴露浓度的检测第115-116页
        4.3.3 GnRH3神经元发育状况第116页
        4.3.4 总RNA提取第116-117页
        4.3.5 cDNA合成第117页
        4.3.6 qRT-PCR分析第117-119页
        4.3.7 双酚A和双酚S对鱼类神经内分泌系统的干扰与雌激素受体(ER)的关系第119页
        4.3.8 双酚A和双酚S对鱼类神经内分泌系统的干扰与甲状腺受体(THRs)和芳香化酶(AroB)的关系第119页
        4.3.9 数据处理第119页
    4.4 实验结果第119-130页
        4.4.1 双酚A暴露浓度的检测第119-120页
        4.4.2 环境浓度BPA暴露对斑马鱼胚胎孵化率和存活率的影响第120-121页
        4.4.3 环境浓度BPA暴露对斑马鱼胚胎GnRH3神经元发育的影响第121-122页
        4.4.4 双酚A暴露对斑马鱼胚胎神经内分泌系统相关基因表达水平的影响第122-125页
        4.4.5 双酚S对斑马鱼胚胎GnRH3神经元发育的影响第125页
        4.4.6 双酚S对斑马鱼胚胎神经内分泌系统相关基因表达水平的影响第125-127页
        4.4.7 双酚A和双酚S对鱼类神经内分泌系统的干扰与雌激素受体(ER)的关系第127-129页
        4.4.8 双酚A和双酚S对鱼类神经内分泌系统的干扰与甲状腺受体(THRs) 和芳香化酶 (AroB)通路的关系第129-130页
    4.5 讨论第130-137页
        4.5.1 BPA对斑马鱼胚胎生长的影响第131页
        4.5.2 BPA和BPS对斑马鱼胚胎神经内分泌系统的影响第131-135页
        4.5.3 雌激素受体作用第135-136页
        4.5.4 甲状腺受体和芳香化酶通路第136-137页
    4.6 小结第137-139页
第五章 结论与展望第139-143页
    5.1 结论第139-141页
    5.2 主要创新点第141-142页
    5.3 展望第142-143页
参考文献第143-174页
参加课题与科研成果第174-177页
致谢第177-179页

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