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组蛋白修饰参与化学致癌剂MNNG和MNU诱发人胃粘膜上皮细胞恶性转化的机制研究

致谢第5-6页
中文摘要第6-8页
ABSTRACT第8-9页
缩略语第10-13页
1 引言第13-17页
2 实验材料与方法第17-36页
    2.1 实验材料第17-24页
        2.1.1 细胞系第17页
        2.1.2 细胞培养试剂及溶液第17页
        2.1.3 细胞转染试剂第17-18页
        2.1.4 细胞处理物第18页
        2.1.5 细胞蛋白提取试剂第18页
        2.1.6 BSA蛋白定量法相关试剂第18页
        2.1.7 Western blot相关试剂和溶液第18-20页
        2.1.8 染色质免疫共沉淀实验相关试剂第20-22页
        2.1.9 PCR相关试剂第22页
        2.1.10 引物第22-24页
        2.1.11 SiRNA第24页
    2.2 实验方法第24-36页
        2.2.1 细胞培养与处理第24页
        2.2.2 细胞转染第24页
        2.2.3 实时荧光定量PCR第24-26页
        2.2.4 常规PCR第26-27页
        2.2.5 免疫印迹实验(western blot)第27-28页
        2.2.6 免疫荧光第28-29页
        2.2.7 流式细胞检测第29页
        2.2.8 亚硫酸氢盐测序(委托公司检测)第29-32页
        2.2.9 染色质免疫共沉淀(ChIP)第32-34页
        2.2.10 组蛋白去乙酰化酶HDACs酶活性的测定第34页
        2.2.11 软琼脂克隆形成实验(soft agar)第34-35页
        2.2.12 统计学分析第35-36页
3 结果第36-52页
    3.1 检测MNNG和MNU诱导人胃粘膜上皮细胞GES-1恶性转化模型第36-37页
    3.2 初步筛选恶性转化细胞中组蛋白修饰的差异改变第37-39页
    3.3 组蛋白H3S10磷酸化在细胞恶性转化中的上调机制及作用研究第39-44页
        3.3.1 进一步验证H3S10p在恶性转化细胞中的上调第39-40页
        3.3.2 明确引起H3S10磷酸化上调的上游激酶第40-43页
        3.3.3 初步筛选组蛋白H3S10磷酸化上调所调控的下游靶基因第43页
        3.3.4 抑制MSK1-H3S10p通路对细胞恶性表型的影响第43-44页
    3.4 组蛋白H4赖氨酸乙酰化在细胞恶性转化中的下调机制及作用研究第44-50页
        3.4.1 介导组蛋白H4赖氨酸乙酰化下调的主要去乙酰化酶第44-47页
        3.4.2 组蛋白H4赖氨酸乙酰化下调参与了抑癌基因FHIT的表观遗传沉默第47-49页
        3.4.3 抑制组蛋白去乙酰化和α-tubulin去乙酰化对细胞恶性表型的影响第49-50页
    3.5 多种抑制剂单独或联合作用对细胞恶性表型的影响第50-52页
4 讨论第52-58页
5 结论和展望第58-60页
    5.1 主要结论第58页
    5.2 展望第58-60页
参考文献第60-65页
综述第65-74页
    参考文献第69-74页
作者简历及在学期间取得的科研成果第74页
    1、作者简历第74页
    2、参加课题第74页
    3、发表论文情况第74页

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