致谢 | 第5-6页 |
中文摘要 | 第6-8页 |
ABSTRACT | 第8-9页 |
缩略语 | 第10-13页 |
1 引言 | 第13-17页 |
2 实验材料与方法 | 第17-36页 |
2.1 实验材料 | 第17-24页 |
2.1.1 细胞系 | 第17页 |
2.1.2 细胞培养试剂及溶液 | 第17页 |
2.1.3 细胞转染试剂 | 第17-18页 |
2.1.4 细胞处理物 | 第18页 |
2.1.5 细胞蛋白提取试剂 | 第18页 |
2.1.6 BSA蛋白定量法相关试剂 | 第18页 |
2.1.7 Western blot相关试剂和溶液 | 第18-20页 |
2.1.8 染色质免疫共沉淀实验相关试剂 | 第20-22页 |
2.1.9 PCR相关试剂 | 第22页 |
2.1.10 引物 | 第22-24页 |
2.1.11 SiRNA | 第24页 |
2.2 实验方法 | 第24-36页 |
2.2.1 细胞培养与处理 | 第24页 |
2.2.2 细胞转染 | 第24页 |
2.2.3 实时荧光定量PCR | 第24-26页 |
2.2.4 常规PCR | 第26-27页 |
2.2.5 免疫印迹实验(western blot) | 第27-28页 |
2.2.6 免疫荧光 | 第28-29页 |
2.2.7 流式细胞检测 | 第29页 |
2.2.8 亚硫酸氢盐测序(委托公司检测) | 第29-32页 |
2.2.9 染色质免疫共沉淀(ChIP) | 第32-34页 |
2.2.10 组蛋白去乙酰化酶HDACs酶活性的测定 | 第34页 |
2.2.11 软琼脂克隆形成实验(soft agar) | 第34-35页 |
2.2.12 统计学分析 | 第35-36页 |
3 结果 | 第36-52页 |
3.1 检测MNNG和MNU诱导人胃粘膜上皮细胞GES-1恶性转化模型 | 第36-37页 |
3.2 初步筛选恶性转化细胞中组蛋白修饰的差异改变 | 第37-39页 |
3.3 组蛋白H3S10磷酸化在细胞恶性转化中的上调机制及作用研究 | 第39-44页 |
3.3.1 进一步验证H3S10p在恶性转化细胞中的上调 | 第39-40页 |
3.3.2 明确引起H3S10磷酸化上调的上游激酶 | 第40-43页 |
3.3.3 初步筛选组蛋白H3S10磷酸化上调所调控的下游靶基因 | 第43页 |
3.3.4 抑制MSK1-H3S10p通路对细胞恶性表型的影响 | 第43-44页 |
3.4 组蛋白H4赖氨酸乙酰化在细胞恶性转化中的下调机制及作用研究 | 第44-50页 |
3.4.1 介导组蛋白H4赖氨酸乙酰化下调的主要去乙酰化酶 | 第44-47页 |
3.4.2 组蛋白H4赖氨酸乙酰化下调参与了抑癌基因FHIT的表观遗传沉默 | 第47-49页 |
3.4.3 抑制组蛋白去乙酰化和α-tubulin去乙酰化对细胞恶性表型的影响 | 第49-50页 |
3.5 多种抑制剂单独或联合作用对细胞恶性表型的影响 | 第50-52页 |
4 讨论 | 第52-58页 |
5 结论和展望 | 第58-60页 |
5.1 主要结论 | 第58页 |
5.2 展望 | 第58-60页 |
参考文献 | 第60-65页 |
综述 | 第65-74页 |
参考文献 | 第69-74页 |
作者简历及在学期间取得的科研成果 | 第74页 |
1、作者简历 | 第74页 |
2、参加课题 | 第74页 |
3、发表论文情况 | 第74页 |