| 摘要 | 第6-7页 |
| Abstract | 第7-8页 |
| 第1章 绪论 | 第12-40页 |
| 1.1 课题背景 | 第12-13页 |
| 1.2 微流控芯片操纵单元 | 第13-25页 |
| 1.2.1 单细胞捕获 | 第13-17页 |
| 1.2.1.1 重力离心 | 第13-15页 |
| 1.2.1.2 流体动力学 | 第15-16页 |
| 1.2.1.3 介电电泳 | 第16-17页 |
| 1.2.2 细胞分选 | 第17-21页 |
| 1.2.2.1 荧光激发分选 | 第18-19页 |
| 1.2.2.2 磁力分选 | 第19-20页 |
| 1.2.2.3 层流分选 | 第20-21页 |
| 1.2.3 细胞裂解 | 第21-25页 |
| 1.2.3.1 化学裂解 | 第21-22页 |
| 1.2.3.2 机械裂解 | 第22-23页 |
| 1.2.3.3 激光裂解 | 第23-24页 |
| 1.2.3.4 热裂解 | 第24页 |
| 1.2.3.5 电裂解 | 第24-25页 |
| 1.3 微流控技术在单细胞研究方面的应用 | 第25-33页 |
| 1.3.1 细胞培养 | 第25-26页 |
| 1.3.2 单细胞基因表达分析 | 第26-28页 |
| 1.3.2.1 RT-qPCR | 第26-27页 |
| 1.3.2.2 高通量微流控单细胞数字PCR | 第27-28页 |
| 1.3.3 单细胞基因组测序 | 第28-31页 |
| 1.3.4 单细胞蛋白质分析 | 第31-33页 |
| 1.4 单细胞微流控系统商品化现状 | 第33-34页 |
| 1.4.1 C1单细胞自动制备系统 | 第33页 |
| 1.4.2 DEPArray系统 | 第33-34页 |
| 1.5 本文研究内容 | 第34-36页 |
| 1.6 参考文献 | 第36-40页 |
| 第2章 单细胞微流控芯片的研制及其在单细胞数字PCR方面的应用 | 第40-64页 |
| 2.1 引言 | 第40-42页 |
| 2.2 实验部分 | 第42-52页 |
| 2.2.1 实验仪器与装置 | 第42页 |
| 2.2.2 实验材料与试剂 | 第42-43页 |
| 2.2.3 实验操作 | 第43-52页 |
| 2.2.3.1 单细胞微流控掩膜的设计 | 第43-45页 |
| 2.2.3.2 模具制作 | 第45-47页 |
| 2.2.3.3 芯片制作 | 第47页 |
| 2.2.3.4 细胞培养 | 第47-48页 |
| 2.2.3.5 肿瘤干细胞培养及单细胞悬液制备 | 第48-49页 |
| 2.2.3.6 细胞裂解 | 第49-50页 |
| 2.2.3.7 实时荧光定量PCR检测 | 第50页 |
| 2.2.3.8 单细胞数字PCR检测 | 第50-52页 |
| 2.2.3.9 检测与分析 | 第52页 |
| 2.3 结果与分析 | 第52-59页 |
| 2.3.1 单细胞微流控芯片的设计 | 第52-53页 |
| 2.3.2 单细胞微流控芯片的进样 | 第53-55页 |
| 2.3.3 单细胞数字PCR | 第55-59页 |
| 2.4 结论与展望 | 第59-61页 |
| 2.5 参考文献 | 第61-64页 |
| 第3章 单细胞微流控芯片通过一步法RT-PCR分选与鉴定A549肿瘤干细胞 | 第64-82页 |
| 3.1 引言 | 第64-65页 |
| 3.2 实验部分 | 第65-70页 |
| 3.2.1 仪器装置 | 第65-66页 |
| 3.2.2 试剂与仪器 | 第66-67页 |
| 3.2.3 实验操作 | 第67-70页 |
| 3.2.3.1 单细胞微流控芯片的设计与制作 | 第67页 |
| 3.2.3.2 单细胞悬液的制备 | 第67-69页 |
| 3.2.3.3 单细胞微流控芯片的进样与操作 | 第69-70页 |
| 3.2.3.4 检测与分析 | 第70页 |
| 3.3 结果与分析 | 第70-77页 |
| 3.3.1 单细胞微流控芯片的设计 | 第70-71页 |
| 3.3.2 肿瘤干细胞的培养及单细胞微流控芯片的进样 | 第71-75页 |
| 3.3.2.1 肿瘤干细胞培养 | 第71-72页 |
| 3.3.2.2 肿瘤干细胞染色 | 第72-74页 |
| 3.3.2.3 肿瘤干细胞大小及单细胞微流控芯片的进样 | 第74-75页 |
| 3.3.3 单细胞微流控芯片的单细胞捕获 | 第75页 |
| 3.3.4 单细胞RT-PCR反应结果 | 第75-77页 |
| 3.4 结论与展望 | 第77-79页 |
| 3.5 参考文献 | 第79-82页 |
| 攻读硕士学位期间主要的研究成果 | 第82-84页 |
| 致谢 | 第84页 |
