酯酶标记在杏鲍菇辅助育种中的研究探索
| 摘要 | 第1-8页 |
| Abstract | 第8-9页 |
| 第一章 文献综述 | 第9-18页 |
| ·杏鲍菇 | 第9页 |
| ·酯酶 | 第9-15页 |
| ·酯酶同工酶 | 第10-11页 |
| ·酯酶基因 | 第11-15页 |
| ·PCR 引物设计 | 第15-16页 |
| ·兼并引物的设计 | 第15-16页 |
| ·半定量 RT-PCR 技术 | 第16-17页 |
| ·研究目的和意义 | 第17-18页 |
| 第二章 出菇实验 | 第18-22页 |
| ·材料与培养基 | 第18-19页 |
| ·实验材料 | 第18页 |
| ·培养基 | 第18-19页 |
| ·实验方法 | 第19页 |
| ·实验结果与分析 | 第19-22页 |
| 第三章 酯酶同工酶分析 | 第22-31页 |
| ·材料与试剂 | 第22-23页 |
| ·实验材料 | 第22页 |
| ·试剂 | 第22页 |
| ·仪器 | 第22-23页 |
| ·实验方法 | 第23-25页 |
| ·试剂配制 | 第23-24页 |
| ·实验取材 | 第24页 |
| ·酶液制备 | 第24页 |
| ·电泳 | 第24页 |
| ·取胶染色 | 第24-25页 |
| ·实验结果的观察和统计分析 | 第25页 |
| ·实验结果 | 第25-28页 |
| ·电泳结果 | 第25-28页 |
| ·聚类分析 | 第28页 |
| ·结果与分析 | 第28-29页 |
| ·讨论 | 第29-31页 |
| 第四章 酯酶酶活 | 第31-37页 |
| ·实验材料 | 第31页 |
| ·酯酶酶活的测定 | 第31-33页 |
| ·试剂 | 第31页 |
| ·方法 | 第31-33页 |
| ·实验结果 | 第33-35页 |
| ·Α一萘酚标准曲线 | 第33-34页 |
| ·可溶蛋白标准曲线 | 第34页 |
| ·酯酶相对酶活 | 第34-35页 |
| ·不同发育阶段总酯酶相对酶活 | 第35页 |
| ·结果与分析 | 第35页 |
| ·讨论 | 第35-37页 |
| 第五章 酯酶基因片段克隆及半定量分析 | 第37-50页 |
| ·材料与方法 | 第37-41页 |
| ·实验材料 | 第37页 |
| ·总RNA 的提取 | 第37-38页 |
| ·RNA 的 DNASE 消解 | 第38页 |
| ·CDNA 第一链合成 | 第38-39页 |
| ·确定PCR 扩增循环次数 | 第39-40页 |
| ·确定模板比例 | 第40页 |
| ·UNIQ-10 柱式 DNA 胶回收 | 第40-41页 |
| ·TA 克隆 | 第41页 |
| ·测序及序列比对 | 第41页 |
| ·结果与分析 | 第41-46页 |
| ·RNA 提取结果 | 第41-42页 |
| ·RNA 的 DNASE 消解结果 | 第42页 |
| ·乙酰木聚糖酯酶 | 第42-44页 |
| ·类胡萝卜素酯酶基因 | 第44-46页 |
| ·酯酶基因表达水平分析 | 第46-48页 |
| ·酯酶基因在不同发育时期的表达分析 | 第46-48页 |
| ·同一菌株 5 个时期的表达分析 | 第48页 |
| ·结果分析 | 第48页 |
| ·讨论 | 第48-50页 |
| ·影响半定量表达分析的因素分析 | 第48-50页 |
| 结论 | 第50-51页 |
| 参考文献 | 第51-54页 |
| 致谢 | 第54页 |
