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草菇不同发育时期菌柄基因表达谱差异初步分析

摘要第1-11页
Abstract第11-13页
第一章 综述第13-24页
 引言第13-14页
 1. 草菇概述第14-16页
   ·草菇的形态特征第14页
   ·草菇的发育过程第14页
   ·草菇的生活条件第14-15页
   ·草菇生产中存在的问题第15-16页
 2. 表达谱研究第16-19页
   ·基因差异表达技术概述第16-19页
     ·m RNA 差异现示技术第16-17页
     ·代表性差异分析(representational difference analysis, RDA)第17页
     ·抑制性消减杂交(suppression subtractive hybridization, SSH)第17页
     ·基因表达连续性分析(serial analysis of gene expression, SAGE)第17-18页
     ·DNA 微阵列技术(DNA Microarray)第18页
     ·数字化全基因组表达谱测序(DGE)第18-19页
 3. 测序技术研究进展第19-20页
   ·第一代测序技术第19页
   ·第二代测序技术第19-20页
   ·第三代测序技术第20页
 4. 表达谱数据分析方法第20-23页
   ·聚类分析方法第21-22页
     ·简单聚类第21页
     ·层次聚类法第21-22页
     ·K 平均聚类第22页
   ·GO 功能分类方法第22-23页
   ·pathway 显著性富集分析第23页
 5. 本研究的目的和意义第23-24页
第二章 草菇试验菌株的构建及鉴定第24-35页
 1. 草菇试验菌株的构建第24-25页
   ·实验材料第24页
     ·供试菌株第24页
     ·培养基第24页
     ·实验仪器设备第24页
   ·实验方法第24-25页
     ·草菇单孢菌株PYd15,PYd21 配对第24页
     ·草菇杂交菌株PYd15×PYd21 的纯化第24-25页
   ·结果与分析第25页
     ·单孢菌株配对结果第25页
     ·杂交菌株的纯化第25页
 2. 草菇菌株DNA 提取第25-28页
   ·实验材料第25页
     ·供试菌株第25页
     ·实验设备第25页
     ·培养基第25页
     ·实验药品第25页
   ·实验方法第25-27页
     ·草菇杂交菌株PYd15×PYd21 活化第25页
     ·菌丝的收集第25-26页
     ·草菇菌丝DNA 的提取第26-27页
   ·结果与分析第27-28页
     ·草菇菌丝的收集分析第27页
     ·草菇菌丝DNA 的提取结果第27-28页
 3. RAPD 分子标记验证实验第28-31页
   ·实验材料第28页
     ·供试材料第28页
     ·实验设备第28页
     ·实验药品第28页
   ·实验方法第28-29页
     ·RAPD 引物的选择第28页
     ·PCR 扩增反应的体系和程序第28-29页
     ·电泳检测第29页
   ·结果与分析第29-31页
 4. 出菇验证实验第31-34页
   ·实验材料第31-32页
     ·供试菌株第31页
     ·培养基第31-32页
     ·栽培地点及工艺第32页
   ·废棉发酵料栽培草菇第32-33页
     ·建堆发酵第32页
     ·上架消毒灭菌第32页
     ·播种第32页
     ·发菌管理第32页
     ·出菇管理第32-33页
   ·出菇结果与分析第33-34页
     ·草菇单孢菌株PYd21 出菇结果第33页
     ·草菇单孢菌株Pyd15 出菇结果第33页
     ·草菇杂交菌株PYd15×PYd21 出菇结果第33-34页
 5. 小结第34-35页
第三章 草菇总RNA 提取第35-49页
 1. 草菇总RNA 提取技术优化第35-45页
   ·实验材料第35页
   ·实验前准备工作第35-36页
   ·实验设备第36页
   ·提取方法第36-43页
     ·TaKaRa(大连宝生物公司)RNAisoTM Plus 提取实验第36-38页
       ·实验试剂及耗材第36页
       ·操作步骤第36-37页
       ·RNA 质量检测实验第37-38页
       ·结果分析第38页
     ·TRIZOL Reagent (invitrogen 公司) 提取实验第38-40页
       ·实验试剂与耗材第38页
       ·操作步骤第38-40页
       ·RNA 质量检测实验第40页
       ·结果与分析第40页
     ·CTAB 法草菇总RNA 提取实验第40-43页
       ·实验试剂与耗材第40-41页
       ·操作步骤第41-42页
       ·RNA 质量检测实验第42页
       ·结果与分析第42-43页
   ·分析与讨论第43页
   ·pBIOZOL 公司植物总RNA 与CTAB 法对比实验第43-45页
     ·主要试剂和材料第43页
     ·提取方法第43页
     ·总RNA 质量检测第43页
     ·结果分析第43-44页
     ·小结第44-45页
 2. 草菇不同发育时期子实体菌柄总RNA 提取第45-49页
   ·实验材料第45页
   ·出菇实验第45页
   ·采样方法及样品第45页
   ·提取方法第45页
   ·总RNA 质量检测第45-46页
   ·结果与分析第46-49页
第四章 数字化全基因组表达谱测序第49-59页
   ·实验材料第49页
   ·实验流程第49-52页
   ·信息分析流程第52-53页
   ·测序质量评估第53-54页
   ·测序饱和度分析第54-55页
   ·Clean tag 拷贝数分布统计第55-56页
   ·测序数据生物信息学分析第56-59页
     ·基因表达注释第56页
     ·差异表达基因的筛选第56-57页
     ·差异基因表达模式聚类分析第57-58页
     ·Gene Ontology 功能显著性富集分析第58-59页
     ·Pathway 显著性富集分析第59页
第五章 测序数据的后续分析第59-95页
   ·草菇不同发育时期转录本分析第59-62页
   ·差异基因的表达分析第62-64页
   ·生长发育相关蛋白在不同时期的表达情况分析第64-66页
   ·差异基因显著富集的GO 功能分类分析第66-71页
     ·纽扣期和蛋形期(NbvsDb)显著差异的GO 条目分析第66-69页
     ·蛋形期和伸长期(DbvsSb)显著差异的GO 条目分析第69-70页
     ·伸长期与成熟期(SbvsCb)显著差异的GO 条目分析第70-71页
   ·差异基因显著富集的Pathway 分析第71-92页
     ·DNA 复制第71-76页
       ·纽扣期和蛋形期比较(NbvsDb)第71-73页
       ·蛋形期和伸长期比较(DbvsSb)第73-75页
       ·伸长期和成熟期比较(SbvsCb)第75页
       ·分析第75-76页
     ·Ribosome第76-87页
       ·蛋形期和伸长期比较(DbvsSb)第76-79页
       ·纽扣期和伸长期比较(NbvsSb)第79-82页
       ·纽扣期与成熟期比较(NbvsCb)第82-84页
       ·蛋形期与成熟期比较(DbvsCb)第84-86页
       ·分析第86-87页
     ·Cell Cycle第87-91页
       ·蛋形期和伸长期比较(DbvsSb)第87-89页
       ·分析第89-91页
     ·不同发育时期特有转录本分析第91-92页
   ·讨论第92-95页
参考文献第95-99页
致谢第99页

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