| 摘要 | 第3-5页 |
| Abstract | 第5-6页 |
| 缩略语表 | 第12-13页 |
| 1 引言 | 第13-26页 |
| 1.1 向日葵黄萎病 | 第13页 |
| 1.1.1 向日葵种植情况 | 第13页 |
| 1.1.2 向日葵黄萎病及其危害 | 第13页 |
| 1.2 向日葵黄萎病病原菌 | 第13-18页 |
| 1.2.1 大丽轮枝菌生物学特性 | 第13-14页 |
| 1.2.2 大丽轮枝菌的侵染循环 | 第14-15页 |
| 1.2.3 大丽轮枝菌的侵染过程 | 第15页 |
| 1.2.4 大丽轮枝菌的致萎毒素和激发子 | 第15-16页 |
| 1.2.5 大丽轮枝菌的致病相关基因 | 第16-17页 |
| 1.2.6 大丽轮枝菌致病相关基因的克隆—R-PCR技术 | 第17-18页 |
| 1.3 大丽轮枝菌的遗传多样性 | 第18-23页 |
| 1.3.1 大丽轮枝菌的营养亲和性 | 第18-20页 |
| 1.3.2 大丽轮枝菌交配型 | 第20-21页 |
| 1.3.3 大丽轮枝菌的系统发育 | 第21-22页 |
| 1.3.4 大丽轮枝菌的生理小种 | 第22-23页 |
| 1.4 大丽轮枝菌的快速检测 | 第23页 |
| 1.5 向日葵黄萎病的防治措施 | 第23-24页 |
| 1.6 研究目的和意义 | 第24-26页 |
| 2 推迟播期对向日葵黄萎病发病程度及产量影响 | 第26-34页 |
| 2.1 供试品种和地点 | 第26页 |
| 2.2 方法 | 第26-28页 |
| 2.2.1 试验小区设计 | 第26-27页 |
| 2.2.2 向日葵黄萎病发病情况的调查 | 第27-28页 |
| 2.2.3 产量的测定 | 第28页 |
| 2.2.4 数据统计和分析 | 第28页 |
| 2.3 结果与分析 | 第28-32页 |
| 2.3.1 推迟播期能够降低向日葵黄萎病的发病率 | 第28-30页 |
| 2.3.2 推迟播期对向日葵黄萎病病情指数的影响 | 第30-32页 |
| 2.4 讨论 | 第32-34页 |
| 3 向日葵种子携带大丽轮枝菌的检测 | 第34-44页 |
| 3.1 材料 | 第34-35页 |
| 3.1.1 供试向日葵种子和菌株 | 第34页 |
| 3.1.2 试剂、载体和培养基 | 第34-35页 |
| 3.1.3 仪器设备 | 第35页 |
| 3.2 方法 | 第35-37页 |
| 3.2.1 向日葵种子种皮的获得和DNA提取 | 第35页 |
| 3.2.2 向日葵种子种皮DNA双重PCR扩增 | 第35-36页 |
| 3.2.3 巢式PCR产物TA连接 | 第36页 |
| 3.2.4 大肠杆菌转化及蓝白斑筛选 | 第36页 |
| 3.2.5 阳性克隆菌液PCR鉴定 | 第36-37页 |
| 3.2.6 阳性克隆测序 | 第37页 |
| 3.2.7 序列分析 | 第37页 |
| 3.2.8 利用GFP标记大丽轮枝孢菌接种向日葵 | 第37页 |
| 3.3 结果与分析 | 第37-42页 |
| 3.3.1 向日葵种子种皮上携带V. dahliae的检测 | 第37-40页 |
| 3.3.2 不同向日葵品种携带黄萎病菌频率的检测 | 第40-41页 |
| 3.3.3 利用GFP荧光标记确定向日葵种子种皮带菌 | 第41-42页 |
| 3.4 讨论 | 第42-44页 |
| 4 向日葵大丽轮枝菌遗传多样性研究 | 第44-63页 |
| 4.1 供试菌株 | 第44-45页 |
| 4.2 化学试剂 | 第45页 |
| 4.3 仪器设备 | 第45页 |
| 4.4 培养基成分 | 第45页 |
| 4.5 实验方法 | 第45-51页 |
| 4.5.1 黄萎病菌的分离 | 第45-46页 |
| 4.5.2 黄萎病菌的分子鉴定 | 第46-47页 |
| 4.5.3 大丽轮枝菌营养亲和群的划分 | 第47-48页 |
| 4.5.4 大丽轮枝菌生理小种鉴定 | 第48-49页 |
| 4.5.5 大丽轮枝菌交配型鉴定 | 第49-50页 |
| 4.5.6 大丽轮枝菌遗传多样性分析 | 第50-51页 |
| 4.6 结果与分析 | 第51-60页 |
| 4.6.1 向日葵黄萎病菌的分离与鉴定 | 第51-52页 |
| 4.6.2 向日葵大丽轮枝菌nit突变体筛选 | 第52-53页 |
| 4.6.3 向日葵大丽轮枝菌亲和群的划分 | 第53-55页 |
| 4.6.4 向日葵大丽轮枝菌生理小种的鉴定 | 第55-56页 |
| 4.6.5 向日葵大丽轮枝菌交配型的鉴定 | 第56-57页 |
| 4.6.6 大丽轮枝菌系统树构建 | 第57-60页 |
| 4.7 讨论 | 第60-63页 |
| 5 利用R-PCR方法构建向日葵大丽轮枝菌致病相关基因文库 | 第63-82页 |
| 5.1 R-PCR具体流程 | 第63页 |
| 5.2 供试菌株 | 第63页 |
| 5.3 试剂 | 第63页 |
| 5.4 总RNA提取 | 第63-64页 |
| 5.5 cDNA合成 | 第64-73页 |
| 5.5.1 cDNA第一链合成 | 第64-65页 |
| 5.5.2 cDNA第二链合成 | 第65页 |
| 5.5.3 Tester和Driver制备 | 第65-70页 |
| 5.5.4 Removing PCR | 第70-71页 |
| 5.5.5 Recovery PCR及产物纯化 | 第71页 |
| 5.5.6 Recovery PCR产物克隆及阳性克隆筛选 | 第71-73页 |
| 5.5.7 阳性克隆测序 | 第73页 |
| 5.5.8 序列比对分析 | 第73页 |
| 5.6 结果与分析 | 第73-80页 |
| 5.6.1 供试菌株形态及致病力测定 | 第73-74页 |
| 5.6.2 向日葵黄萎病菌总RNA的提取 | 第74-75页 |
| 5.6.3 cDNA接头连接产物检测 | 第75-76页 |
| 5.6.4 阳性克隆的筛选及序列比对分析 | 第76-80页 |
| 5.7 讨论 | 第80-82页 |
| 6 全文结论 | 第82-83页 |
| 致谢 | 第83-84页 |
| 参考文献 | 第84-97页 |
| 附录 | 第97-104页 |
| 作者简介 | 第104页 |
