| 摘要 | 第3-4页 |
| Abstract | 第4页 |
| 缩略词表 | 第8-9页 |
| 1 引言 | 第9-15页 |
| 1.1 木质素研究进展 | 第9-11页 |
| 1.1.1 木质素简述 | 第9页 |
| 1.1.2 木质素种类 | 第9-10页 |
| 1.1.3 木质素的生物合成 | 第10-11页 |
| 1.2 肉桂酰辅酶A还原酶 | 第11-13页 |
| 1.2.1 肉桂酰辅酶A还原酶基因结构 | 第12页 |
| 1.2.2 肉桂酰辅酶A还原酶基因分类 | 第12页 |
| 1.2.3 肉桂酰辅酶A还原酶基因的表达调控 | 第12-13页 |
| 1.2.4 肉桂酰辅酶A还原酶基因功能 | 第13页 |
| 1.3 中间锦鸡儿 | 第13页 |
| 1.4 研究目的和意义 | 第13-14页 |
| 1.5 技术路线 | 第14-15页 |
| 2 材料和方法 | 第15-23页 |
| 2.1 实验材料 | 第15-17页 |
| 2.1.1 植物材料及菌种 | 第15页 |
| 2.1.2 实验试剂 | 第15页 |
| 2.1.3 实验仪器设备 | 第15-16页 |
| 2.1.4 引物设计 | 第16-17页 |
| 2.2 实验方法 | 第17-23页 |
| 2.2.1 培养基的配置 | 第17-18页 |
| 2.2.1.1 LB培养基 | 第17页 |
| 2.2.1.2 1/2 MS培养基 | 第17-18页 |
| 2.2.2 植物的培养及处理 | 第18页 |
| 2.2.2.1 中间锦鸡儿在营养土中的培养 | 第18页 |
| 2.2.2.2 拟南芥在营养土中的培养 | 第18页 |
| 2.2.2.3 拟南芥在培养基中的培养 | 第18页 |
| 2.2.3 DNA提取 | 第18页 |
| 2.2.4 RNA提取与反转录 | 第18-19页 |
| 2.2.5 基因扩增 | 第19-20页 |
| 2.2.5.1 CiCCR2和CiCCR3基因的全长克隆 | 第19-20页 |
| 2.2.5.2 荧光定量PCR | 第20页 |
| 2.2.6 PCR产物胶回收与质粒提取 | 第20页 |
| 2.2.7 目的片段与载体的连接 | 第20-21页 |
| 2.2.8 大肠杆菌感受态制备与转化 | 第21页 |
| 2.2.9 表达载体构建 | 第21-22页 |
| 2.2.10 农杆菌感受态制备与转化 | 第22页 |
| 2.2.11 拟南芥浸花法转化与纯合体筛选 | 第22页 |
| 2.2.12 木质素含量检测 | 第22页 |
| 2.2.13 木质素染色 | 第22页 |
| 2.2.14 干重、鲜重的测定 | 第22-23页 |
| 3 实验结果 | 第23-36页 |
| 3.1 CiCCR2和CiCCR3基因全长的克隆 | 第23-27页 |
| 3.2 CiCCR2和CiCCR3基因序列分析 | 第27-29页 |
| 3.2.1 CiCCR2和CiCCR3蛋白结构 | 第27-28页 |
| 3.2.2 CiCCR2和CiCCR3蛋白性质分析 | 第28-29页 |
| 3.2.3 CiCCR2和CiCCR3系统进化分析 | 第29页 |
| 3.3 过表达CiCCR2和CiCCR3转基因拟南芥株系获得 | 第29-31页 |
| 3.3.1 过表达CiCCR2和CiCCR3表达载体构建与鉴定 | 第29-30页 |
| 3.3.2 过表达CiCCR2和CiCCR3转基因株系获得与鉴定 | 第30-31页 |
| 3.4 中间锦鸡儿中不同组织部位表达量检测 | 第31-32页 |
| 3.5 转基因纯合体木质素含量的检测 | 第32-33页 |
| 3.6 转基因纯合体木质素的染色 | 第33-34页 |
| 3.7 转基因纯合体的鲜重、干重 | 第34-36页 |
| 4 讨论与结论 | 第36-38页 |
| 4.1 讨论 | 第36-37页 |
| 4.1.1 基因序列分析 | 第36页 |
| 4.1.2 组织表达模式 | 第36-37页 |
| 4.1.3 木质素含量提高 | 第37页 |
| 4.2 结论 | 第37-38页 |
| 致谢 | 第38-39页 |
| 参考文献 | 第39-47页 |
| 作者简介 | 第47页 |
