| 摘要 | 第6-8页 |
| Abstract | 第8-9页 |
| 第一章 前言 | 第12-18页 |
| 1.1 重金属污染现状 | 第12-13页 |
| 1.2 金属硫蛋白研究进展 | 第13-14页 |
| 1.3 重金属对植毒害机理 | 第14页 |
| 1.4 植物金属硫蛋白的分类 | 第14页 |
| 1.5 植物金属硫蛋白的功能 | 第14-16页 |
| 1.6 研究目的和意义 | 第16-18页 |
| 第二章 材料与方法 | 第18-31页 |
| 2.1 实验材料 | 第18-19页 |
| 2.1.1 生物材料 | 第18页 |
| 2.1.2 试剂和工具酶 | 第18-19页 |
| 2.1.3 常用溶液的配制 | 第19页 |
| 2.1.4 实验工具 | 第19页 |
| 2.2 实验方法 | 第19-31页 |
| 2.2.1 生物信息学分析 | 第19-20页 |
| 2.2.1.1 基因查找 | 第19页 |
| 2.2.1.2 OsMT基因启动子区顺式作用元件分析 | 第19-20页 |
| 2.2.2 OsMT在不同胁迫下的表达分析 | 第20-22页 |
| 2.2.2.1 水稻材料的获取及处理 | 第20页 |
| 2.2.2.2 总RNA的提取 | 第20-21页 |
| 2.2.2.3 cDNA链的获取 | 第21页 |
| 2.2.2.4 实时荧光定量PCR | 第21-22页 |
| 2.2.3 OsMT蛋白在酵母中的互补作用 | 第22-26页 |
| 2.2.3.1 目的基因的获得 | 第22-24页 |
| 2.2.3.2 载体的构建 | 第24页 |
| 2.2.3.3 重组载体的扩增 | 第24-25页 |
| 2.2.3.4 乙酸锂法转化酵母 | 第25-26页 |
| 2.2.3.5 酵母突变株互补实验 | 第26页 |
| 2.2.4 原子光谱法测定酵母细胞内重金属的累积 | 第26-27页 |
| 2.2.5 OsMT蛋白的诱导表达 | 第27-28页 |
| 2.2.5.1 表达载体的构建 | 第27-28页 |
| 2.2.5.2 目标蛋白的诱导及纯化 | 第28页 |
| 2.2.5.3 蛋白浓度的测定 | 第28页 |
| 2.2.6 表达GST-OsMT与GST的Rossetta菌对重金属的耐受性比较 | 第28-29页 |
| 2.2.7 GST-OsMT蛋白光谱及电泳迁移分析 | 第29-31页 |
| 第三章 结果与分析 | 第31-53页 |
| 3.1 生物信息学分析结果 | 第31-32页 |
| 3.1.1 水稻OsMT基因家族 | 第31页 |
| 3.1.2 OsMT基因启动子区顺式作用元件分析结果 | 第31-32页 |
| 3.2 OsMT在不同胁迫下的基因表达分析结果 | 第32-38页 |
| 3.3 OsMT蛋白在酵母中的互补作用结果 | 第38-40页 |
| 3.4 火焰原子光谱法分析酵母细胞内重金属的累积 | 第40-41页 |
| 3.5 OsMT蛋白的诱导表达结果 | 第41-42页 |
| 3.6 表达GST-OsMT与GST的Rossetta菌对重金属的抗性比较结果 | 第42-49页 |
| 3.7 GST-OsM14c蛋白光谱分析及电泳迁移分析结果 | 第49-53页 |
| 第四章 结论与讨论 | 第53-58页 |
| 参考文献 | 第58-66页 |
| 研究生期间发表的论文 | 第66-67页 |
| 致谢 | 第67页 |
