摘要 | 第6-8页 |
Abstract | 第8-9页 |
第一章 文献综述 | 第12-22页 |
1.1 奶牛乳腺炎研究进展 | 第12-13页 |
1.1.1 奶牛乳腺炎概况 | 第12-13页 |
1.1.2 奶牛乳腺炎的细胞免疫机制 | 第13页 |
1.2 组织和器官纤维化 | 第13-19页 |
1.2.1 纤维化概述 | 第14-15页 |
1.2.2 慢性炎症与纤维化 | 第15页 |
1.2.3 EMT与纤维化 | 第15-18页 |
1.2.3.1 EMT概述 | 第15-16页 |
1.2.3.2 EMT发生过程 | 第16-17页 |
1.2.3.3 EMT参与纤维化的研究进展 | 第17-18页 |
1.2.4 ECM与纤维化 | 第18-19页 |
1.2.4.1 ECM概述 | 第18页 |
1.2.4.2 ECM与纤维化的研究进展 | 第18-19页 |
1.3 TGF-β1 及TGF/Smad信号通路 | 第19-22页 |
1.3.1 TGF-β 概述 | 第19-20页 |
1.3.2 TGF/Smad信号通路概述 | 第20-21页 |
1.3.3 TGF-β1 与纤维化 | 第21-22页 |
第二章 实验研究 | 第22-42页 |
2.1 材料 | 第22页 |
2.1.1 乳腺组织 | 第22页 |
2.1.2 小鼠 | 第22页 |
2.2 仪器设备 | 第22页 |
2.3 实验试剂 | 第22-23页 |
2.4 方法 | 第23-29页 |
2.4.1 主要溶液的配制 | 第23页 |
2.4.2 原代BMECs的分离 | 第23页 |
2.4.3 BMECs的纯化 | 第23-24页 |
2.4.4 乳腺上皮细胞的传代培养 | 第24页 |
2.4.5 乳腺上皮细胞的冻存与复苏 | 第24页 |
2.4.6 脂多糖和脂磷壁酸诱导炎性细胞模型 | 第24页 |
2.4.7 BMECs的TGF-β1 刺激与抑制 | 第24页 |
2.4.8 酶联免疫吸附试验 | 第24-25页 |
2.4.9 总RNA的提取及第一链cDNA合成 | 第25页 |
2.4.10 实时荧光定量PCR | 第25-26页 |
2.4.11 蛋白印迹实验 | 第26-27页 |
2.4.12 细胞免疫荧光染色 | 第27-28页 |
2.4.13 小鼠乳腺TGF-β1 注射 | 第28页 |
2.4.14 统计分析 | 第28-29页 |
2.5 结果 | 第29-38页 |
2.5.1 奶牛乳腺组织外观及病理分析 | 第29-30页 |
2.5.2 BMECs分离,纯化及培养 | 第30页 |
2.5.3 TGF-β1 在炎性奶牛乳腺组织及BMECs中的表达 | 第30-31页 |
2.5.4 TGF-β1 诱导的BMECs形态学变化 | 第31-32页 |
2.5.5 TGF-β1 促进BMECs中 α-SMA的表达 | 第32-33页 |
2.5.6 TGF-β1 诱导BMECs发生EMT | 第33-34页 |
2.5.7 TGF-β1 促进Smad2和Smad3的表达 | 第34-35页 |
2.5.8 TGF-β1 诱导Smad4发生入核转移 | 第35-36页 |
2.5.9 LY2109761抑制Smad2磷酸化及 α-SMA的表达 | 第36页 |
2.5.10 LY2109761抑制TGF-β1 的诱导作用 | 第36-37页 |
2.5.11 TGF-β1 造成小鼠乳腺发生炎症及纤维化 | 第37-38页 |
2.6 讨论 | 第38-42页 |
结论 | 第42-43页 |
参考文献 | 第43-53页 |
附录 | 第53-54页 |
致谢 | 第54-55页 |
作者简介 | 第55页 |