摘要 | 第8-9页 |
前言 | 第9-10页 |
第一章 文献综述 | 第10-18页 |
1 硒与雄性动物生殖 | 第10-12页 |
1.1 硒与精子发生 | 第10-12页 |
1.2 硒与间质细胞 | 第12页 |
2 睾丸间质细胞与精子发生 | 第12-14页 |
2.1 睾酮与精子发生 | 第12-13页 |
2.2 睾酮的生物合成 | 第13-14页 |
3 睾酮分泌的调控 | 第14-17页 |
3.1 下丘脑、垂体分泌激素对睾丸间质细胞的调节作用 | 第14-15页 |
3.2 微量元素对睾丸间质细胞的影响 | 第15页 |
3.3 MAPK-ERK信号通路 | 第15-17页 |
4 小结 | 第17-18页 |
第二章 硒对绵羊睾丸间质细胞体外增殖及凋亡的影响 | 第18-39页 |
1 材料与方法 | 第18-27页 |
1.1 试验材料 | 第18-20页 |
1.1.1 试验动物与样品采集 | 第18页 |
1.1.2 主要仪器设备 | 第18-19页 |
1.1.3 主要试剂 | 第19页 |
1.1.4 试剂的配制 | 第19-20页 |
1.2 试验方法 | 第20-27页 |
1.2.1 绵羊睾丸间质细胞的收集 | 第20页 |
1.2.2 活细胞计数 | 第20-21页 |
1.2.3 差异贴壁法纯化 | 第21页 |
1.2.4 睾丸间质细胞接种 | 第21页 |
1.2.5 绵羊睾丸间质细胞的鉴定 | 第21页 |
1.2.6 细胞培养 | 第21页 |
1.2.7 绵羊睾丸间质细胞增殖测定 | 第21-22页 |
1.2.8 绵羊睾丸间质细胞凋亡检测 | 第22页 |
1.2.9 超氧化物歧化酶(SOD)测定 | 第22页 |
1.2.10 谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)测定 | 第22-23页 |
1.2.11 活性氧(ROS)测定 | 第23-24页 |
1.2.12 Real-time PCR | 第24-26页 |
1.2.13 Western blot | 第26-27页 |
1.2.14 数据分析 | 第27页 |
2 结果与分析 | 第27-36页 |
2.1 睾丸间质细胞形态观察 | 第27-28页 |
2.2 绵羊睾丸间质细胞3β-HSD染色鉴定 | 第28-29页 |
2.3 硒对绵羊睾丸间质细胞增殖的影响 | 第29页 |
2.4 硒对绵羊睾丸间质细胞凋亡的影响 | 第29-30页 |
2.5 硒对绵羊睾丸间质细胞总SOD活性的影响 | 第30-31页 |
2.6 硒对绵羊睾丸间质细胞GSH-Px活性的影响 | 第31-32页 |
2.7 硒对绵羊睾丸间质细胞ROS含量的影响 | 第32页 |
2.8 硒对细胞周期和凋亡相关基因表达的影响 | 第32-35页 |
2.9 硒对P21、P27、P53和CDK1蛋白表达的影响 | 第35-36页 |
3 讨论 | 第36-38页 |
4 结论 | 第38-39页 |
第三章 硒对绵羊睾丸间质细胞睾酮合成及相关信号通路的影响 | 第39-50页 |
1 材料与方法 | 第39-42页 |
1.1 试验材料 | 第39-40页 |
1.1.1 试验动物 | 第39页 |
1.1.2 主要试剂 | 第39-40页 |
1.1.3 主要仪器设备 | 第40页 |
1.2 试验方法 | 第40-42页 |
1.2.1 样品采集 | 第40页 |
1.2.2 睾丸间质细胞分离与纯化 | 第40页 |
1.2.3 细胞培养 | 第40-41页 |
1.2.4 睾酮测定 | 第41页 |
1.2.5 Real-time PCR | 第41-42页 |
1.2.6 Western blot | 第42页 |
1.2.7 数据分析 | 第42页 |
2 结果与分析 | 第42-48页 |
2.1 硒对绵羊睾丸间质细胞睾酮合成的影响 | 第42-43页 |
2.2 硒对3β-HSD和StAR表达的影响 | 第43-44页 |
2.3 硒对3β-HSD和StAR蛋白表达的影响 | 第44-45页 |
2.4 硒对绵羊睾丸间质细胞ERK1/2和p-ERK1/2蛋白表达的影响 | 第45页 |
2.5 ERK通路对绵羊睾丸间质细胞睾酮合成及相关蛋白表达的影响 | 第45-47页 |
2.6 ERK通路在硒调控睾酮合成及相关蛋白表达中的作用 | 第47-48页 |
3 讨论 | 第48-49页 |
4 结论 | 第49-50页 |
全文结论 | 第50-51页 |
参考文献 | 第51-58页 |
附录:硕士期间发表论文及获奖情况 | 第58-60页 |
Abstract | 第60-61页 |
致谢 | 第62页 |