β-脱卤酶的克隆表达及应用
| 致谢 | 第1-6页 |
| 摘要 | 第6-7页 |
| ABSTRACT | 第7-12页 |
| 第一章 文献综述 | 第12-24页 |
| ·脱卤酶 | 第12-14页 |
| ·脱卤酶的分类 | 第12-13页 |
| ·水解脱卤酶的反应机理 | 第13-14页 |
| ·β-脱卤酶 | 第14页 |
| ·3-羟基丙酸 | 第14-19页 |
| ·3-羟基丙酸的理化性质 | 第14页 |
| ·3-羟基丙酸的用途 | 第14-15页 |
| ·3-羟基丙酸的制备 | 第15-19页 |
| ·基因文库 | 第19-22页 |
| ·基因文库的类型 | 第19-20页 |
| ·载体的种类 | 第20-21页 |
| ·基因文库的筛选 | 第21-22页 |
| ·本文研究思路 | 第22-24页 |
| 第二章 β-脱卤酶基因的克隆与表达 | 第24-50页 |
| ·引言 | 第24页 |
| ·实验材料和方法 | 第24-42页 |
| ·质粒和菌种 | 第24-26页 |
| ·主要实验仪器 | 第26-27页 |
| ·药品与试剂 | 第27-29页 |
| ·培养基 | 第29-30页 |
| ·实验方法 | 第30-42页 |
| ·结果与讨论 | 第42-48页 |
| ·目的基因的分子克隆 | 第42-46页 |
| ·脱卤酶基因的表达 | 第46-48页 |
| ·重组酶活性的验证 | 第48页 |
| ·本章小结 | 第48-50页 |
| 第三章 重组β-脱卤酶的纯化和酶学性质研究 | 第50-66页 |
| ·引言 | 第50页 |
| ·实验材料与方法 | 第50-53页 |
| ·菌种 | 第50页 |
| ·主要实验仪器 | 第50页 |
| ·试剂 | 第50-51页 |
| ·培养基 | 第51页 |
| ·实验方法 | 第51-53页 |
| ·结果和讨论 | 第53-64页 |
| ·表达条件的优化 | 第53-59页 |
| ·rBhd的纯化 | 第59-60页 |
| ·rBhd酶学性质的研究 | 第60-62页 |
| ·rBhd的动力学研究 | 第62-64页 |
| ·本章小结 | 第64-66页 |
| 第四章 酶法制备3-羟基丙酸 | 第66-74页 |
| ·引言 | 第66页 |
| ·实验材料和方法 | 第66-67页 |
| ·菌种 | 第66页 |
| ·试剂 | 第66页 |
| ·实验方法 | 第66-67页 |
| ·结果与讨论 | 第67-72页 |
| ·粗酶制备3-HP | 第67-68页 |
| ·纯化rBhd制备3-HP | 第68-69页 |
| ·反应缓冲液的选择 | 第69页 |
| ·纯化rBhd制备3-HP反应条件的优化 | 第69-71页 |
| ·底物浓度的选择 | 第71-72页 |
| ·本章小结 | 第72-74页 |
| 第五章 结论与展望 | 第74-76页 |
| ·结论 | 第74页 |
| ·展望 | 第74-76页 |
| 参考文献 | 第76-82页 |
| 附图 | 第82-83页 |
| 作者简历 | 第83页 |
