| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-9页 |
| 文献综述 | 第9-18页 |
| 1. 脱氧胞苷激酶概述 | 第9-13页 |
| ·脱氧胞苷激酶DCK缺失引起的抗肿瘤核苷类药物及细胞毒性机制 | 第9-12页 |
| ·脱氧胞苷激酶DCK的作用及其分离纯化 | 第12-13页 |
| 2. 家蚕杆状病毒表达系统的研究和应用 | 第13-18页 |
| ·杆状病毒的生物学特征 | 第13-14页 |
| ·杆状病毒表达系统的应用 | 第14页 |
| ·杆状病毒表达系统的发展历史 | 第14页 |
| ·Bac-to-Bac杆状病毒表达系统 | 第14-16页 |
| ·Bac-to-Bac系统的基本原理 | 第15-16页 |
| ·家蚕杆状病毒表达系统 | 第16-17页 |
| ·家蚕杆状病毒表达系统表达产物的纯化 | 第17-18页 |
| 1 引言 | 第18-20页 |
| ·研究目的和意义 | 第18页 |
| ·研究内容 | 第18-19页 |
| ·研究技术路线 | 第19-20页 |
| 2 材料与方法 | 第20-37页 |
| ·实验材料 | 第20-24页 |
| ·家蚕品系 | 第20页 |
| ·质粒、菌株和试剂 | 第20页 |
| ·主要试剂的配制 | 第20-24页 |
| ·主要实验仪器 | 第24页 |
| ·实验方法 | 第24-37页 |
| ·目的基因的克隆 | 第24-26页 |
| ·目的基因在Bac-to-Bac杆状病毒表达系统中表达 | 第26-34页 |
| ·SDS-PAGE电泳检测 | 第34-35页 |
| ·Western-blot鉴定 | 第35页 |
| ·表达产物脱氧胞苷激酶的酶活分析 | 第35-36页 |
| ·表达产物脱氧胞苷激酶的NI-NTA纯化 | 第36-37页 |
| 3 结果与分析 | 第37-44页 |
| ·polh基因和dck基因克隆 | 第37页 |
| ·重组质粒pFastBacDual-dck/polh的构建和鉴定 | 第37-38页 |
| ·重组Bacmid-dck/polh鉴定 | 第38页 |
| ·重组杆状病毒BmNPV-dck/polh的获得 | 第38-39页 |
| ·DCK蛋白的表达、鉴定 | 第39-42页 |
| ·DCK的表达 | 第39-40页 |
| ·重组病毒DNA鉴定 | 第40页 |
| ·目的蛋白SDS-PAGE鉴定 | 第40-41页 |
| ·Western blot检测 | 第41-42页 |
| ·DCK蛋白的纯化及酶活检测 | 第42-44页 |
| ·DCK蛋白的纯化 | 第42页 |
| ·脱氧胞苷激酶活性检测 | 第42-44页 |
| 4 讨论 | 第44-46页 |
| 5 结论 | 第46-47页 |
| 参考文献 | 第47-52页 |
| 致谢 | 第52-53页 |
| 个人简介 | 第53页 |
| 在校期间发表论文及专利 | 第53页 |
