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中国美利奴细毛羊20号染色体MHC区段ClassⅡb延伸区域contig搭建

摘要第1-6页
Abstract第6-8页
目录第8-10页
主要英文缩略词表第10-12页
第一章 文献综述第12-27页
   ·绵羊(Ovis aries)简介及其基因组研究进展第12-15页
     ·绵羊简介第12页
     ·绵羊基因组研究进展第12-15页
     ·绵羊基因组研究的目的、意义及应用第15页
   ·主要组织相容性复合体(major histocompatibility complex,MHC)的概述第15-21页
     ·MHC分子结构及功能第16-18页
     ·人的MHC座位第18页
     ·几种家畜的MHC基因座的简介第18-19页
     ·MHC的遗传特征第19-20页
     ·MHC与疾病第20-21页
     ·MHC在分析物种进化历史中的作用第21页
     ·MHC的研究目的和意义第21页
   ·细菌人工染色体(Bacterial artificial chromosome,BAC)第21-22页
     ·BAC的发展第22页
     ·BAC的应用第22页
   ·重叠群物理图谱第22-24页
   ·绵羊20号染色体MHC区段研究近况第24-25页
   ·本研究的目的和意义第25-27页
第二章 材料与方法第27-32页
   ·材料第27页
     ·动物材料第27页
     ·中国美利奴细毛羊BAC文库第27页
   ·常用试剂和培养基第27-28页
   ·方法第28-32页
     ·绵羊基因组DNA的提取第28页
     ·中国美利奴细毛羊BAC文库一级混合库(384孔板混合池)的制备第28-29页
     ·用于倒位区域gap填补的PCR引物设计第29页
     ·PCR引物的有效性检测及条件优化第29页
     ·中国美利奴细毛羊BAC文库一级混合库的筛选第29-30页
     ·中国美利奴细毛羊BAC文库二级行混合库(Row mixture pool)的制备第30页
     ·二级行混合库的筛选第30页
     ·阳性单克隆的筛选第30-31页
     ·BAC阳性单克隆质粒DNA的小量提取第31页
     ·BAC阳性单克隆的酶切指纹图谱分析和Contig组装第31页
     ·BAC阳性单克隆质粒DNA的大量提取第31页
     ·BAC阳性单克隆的末端测序第31页
     ·克隆重叠群(Contig)的PCR确证第31-32页
第三章 结果与讨论第32-49页
   ·结果第32-46页
     ·绵羊BAC文库一级混合库制备(混库)及混合质粒浓度和质量检测第32页
     ·用于倒位区域gap填补的PCR引物设计第32-35页
     ·PCR引物有效性检测及条件优化第35-36页
     ·一级混合库的筛选第36-37页
     ·二级行混合库及阳性单克隆的筛选第37-39页
     ·阳性BAC克隆的指纹图谱分析第39-40页
     ·阳性BAC克隆的末端测序第40-41页
     ·BAC末端PCR引物设计及Contig的PCR确证及MTP的装配第41-44页
     ·MTP图谱的装配第44-46页
   ·讨论第46-49页
     ·绵羊基因组MHC Class Ⅱb延伸区域物理图谱绘制的意义第46页
     ·克隆重叠群物理图谱构建方法的选择第46-47页
     ·基因组文库克隆混合池的制备方法第47页
     ·PCR引物设计第47页
     ·阳性BAC克隆的限制性酶切指纹图谱分析第47-48页
     ·MTP图谱构建结果分析第48-49页
第四章 总结与展望第49-51页
   ·总结第49页
   ·展望第49-51页
参考文献第51-54页
致谢第54-55页
作者简历第55-56页
石河子大学硕士研究生学位论文导师评阅表第56页

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