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获得性耐药乳腺癌细胞系中甲基化的改变及其耐药机制研究

摘要第1-6页
Abstract第6-11页
第1章 前言第11-18页
   ·乳腺癌耐药蛋白第11-16页
     ·多药耐药的简介第11页
     ·乳腺癌耐药蛋白的简介第11-12页
     ·ABCG2的物理性质第12-13页
     ·ABCG2表达和功能的调节第13-15页
     ·ABCG2在肿瘤中的表达第15-16页
   ·DNA甲基化第16页
   ·DNA甲基化与ABCG2介导耐药的关系第16-17页
   ·多聚(ADP-核糖)聚合酶简介第17页
   ·PARP-1 与肿瘤耐药的关系第17-18页
第2章 材料与方法第18-36页
   ·实验材料第18-20页
     ·实验细胞株第18页
     ·主要试剂及试剂盒第18-19页
     ·主要仪器第19-20页
   ·主要溶液配制第20-22页
     ·培养基及试剂配制第20页
     ·WESTERN BLOT相关试剂配制第20-21页
     ·毛细管电泳相关试剂配制第21页
     ·慢病毒载体构建及病毒包装所用主要试剂第21-22页
   ·实验方法第22-36页
     ·MCF-7 细胞的培养及耐药诱导第22-23页
     ·CCK-8 法测算耐药指数第23页
     ·流式细胞术检测耐药性第23-24页
     ·WESTERN BLOT第24-25页
     ·毛细管电泳法检测全基因组甲基化水平第25-26页
     ·构建PARP-1 缺陷细胞株第26-31页
     ·BSP法检测基因启动子区甲基化状况第31-36页
第3章 实验结果第36-52页
   ·MCF-7 细胞培养及耐药诱导第36页
     ·细胞生长状况第36页
   ·CCK-8 法检测不同诱导阶段MCF-7 对米托蒽醌的IC50及耐药指数第36-38页
   ·流式细胞仪检测耐药性第38-39页
   ·MBDs在MCF-7/mit耐药株中的表达第39-40页
   ·DNA提取结果第40页
   ·毛细管电泳检测全基因组甲基化情况第40-43页
   ·荧光定量检测干扰效率第43页
   ·Western blot检测PARP-1 表达量第43-44页
   ·基因启动子区甲基化状况第44-52页
     ·ABCG2基因启动子区第一段甲基化情况第44-47页
     ·MBD4基因启动子区甲基化情况第47-49页
     ·DNMT3B基因启动子区甲基化情况第49-52页
第4章 讨论第52-56页
第5章 实验结论第56-57页
参考文献第57-65页
附录第65-66页
致谢第66-67页
攻读硕士学位期间的研究成果第67-68页

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