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yELF1和PELF1与染色质结构关系的研究

摘要第1-6页
Abstract第6-11页
第一章 前言第11-18页
   ·ELF1 的发现第11页
   ·ELF1 蛋白的结构特征第11页
   ·ELF1 的细胞定位第11-12页
   ·yELF1 与基因转录延伸有关第12-13页
   ·yELF1 的功能可能受磷酸化调节第13页
   ·多头绒泡菌yELF1 类似蛋白PELF1第13-16页
   ·研究目的和意义第16-18页
第二章 材料与方法第18-31页
   ·材料第18-19页
     ·菌株第18页
     ·载体第18-19页
     ·数据库和生物软件第19页
   ·方法第19-31页
     ·GST-yELF1、GST-PELF1 表达酵母yelf1(+)、pelf1(+)的制备第19-21页
     ·GST-yELF1、GST-PELF1 重组蛋白的纯化第21-22页
     ·GST Pull down第22页
     ·LC-MS第22-24页
     ·yELF1 基因缺失酵母yelf1(-)的制备第24页
     ·PELF1 单克隆抗体的制备第24-27页
     ·多头绒泡菌的培养第27页
     ·细胞核的提取第27-28页
     ·染色质的提取第28-29页
     ·抗体包被胶体金第29页
     ·原子力显微镜样品制备及观察第29-31页
第三章 结果第31-62页
   ·yEFL1 和PELF1 基因片段第31页
   ·酵母表达的GST融合蛋白GST-yELF1 和GST-PELF1第31-32页
   ·yELF1、PELF1 结合蛋白第32-40页
   ·PELF1 在细胞周期不同时相的结合蛋白第40-47页
   ·PELF1 单克隆抗体的特异性第47-48页
   ·多头绒泡菌细胞周期中PELF1 的变化第48页
   ·缺失基因yelf1 的酵母株yelf1(-)第48-49页
   ·yELF1、PELF1 对酿酒酵母细胞周期的影响第49-50页
   ·yELF1、PELF1 对染色质结构的影响第50-62页
     ·胶体金颗粒的制备第50-52页
     ·胶体金标记抗体的制备第52-54页
     ·胶体金标记抗体Au-GST标记酵母染色质AFM成像第54-56页
     ·多头绒泡菌不同细胞周期的染色质AFM成像第56-59页
     ·胶体金标记抗体Au-m AbP35 标记多头绒泡菌不同细胞周期染色质AFM成像第59-62页
第四章讨论第62-69页
   ·PELF1 与yELF1 功能类似,都参与基因转录、蛋白翻译、糖代谢以及胁迫应答第62页
   ·PELF1 在不同细胞周期中相互作用蛋白有差异第62-65页
   ·PELF1 单克隆抗体可以用于PELF1 检测第65页
   ·多头绒泡菌不同细胞周期中染色质形态不同第65-67页
   ·PELF1 与染色质维持解折叠有关第67-69页
第五章 结论第69-71页
参考文献第71-79页
附录第79-84页
致谢第84-85页

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