摘要 | 第1-6页 |
Abstract | 第6-11页 |
第一章 前言 | 第11-18页 |
·ELF1 的发现 | 第11页 |
·ELF1 蛋白的结构特征 | 第11页 |
·ELF1 的细胞定位 | 第11-12页 |
·yELF1 与基因转录延伸有关 | 第12-13页 |
·yELF1 的功能可能受磷酸化调节 | 第13页 |
·多头绒泡菌yELF1 类似蛋白PELF1 | 第13-16页 |
·研究目的和意义 | 第16-18页 |
第二章 材料与方法 | 第18-31页 |
·材料 | 第18-19页 |
·菌株 | 第18页 |
·载体 | 第18-19页 |
·数据库和生物软件 | 第19页 |
·方法 | 第19-31页 |
·GST-yELF1、GST-PELF1 表达酵母yelf1(+)、pelf1(+)的制备 | 第19-21页 |
·GST-yELF1、GST-PELF1 重组蛋白的纯化 | 第21-22页 |
·GST Pull down | 第22页 |
·LC-MS | 第22-24页 |
·yELF1 基因缺失酵母yelf1(-)的制备 | 第24页 |
·PELF1 单克隆抗体的制备 | 第24-27页 |
·多头绒泡菌的培养 | 第27页 |
·细胞核的提取 | 第27-28页 |
·染色质的提取 | 第28-29页 |
·抗体包被胶体金 | 第29页 |
·原子力显微镜样品制备及观察 | 第29-31页 |
第三章 结果 | 第31-62页 |
·yEFL1 和PELF1 基因片段 | 第31页 |
·酵母表达的GST融合蛋白GST-yELF1 和GST-PELF1 | 第31-32页 |
·yELF1、PELF1 结合蛋白 | 第32-40页 |
·PELF1 在细胞周期不同时相的结合蛋白 | 第40-47页 |
·PELF1 单克隆抗体的特异性 | 第47-48页 |
·多头绒泡菌细胞周期中PELF1 的变化 | 第48页 |
·缺失基因yelf1 的酵母株yelf1(-) | 第48-49页 |
·yELF1、PELF1 对酿酒酵母细胞周期的影响 | 第49-50页 |
·yELF1、PELF1 对染色质结构的影响 | 第50-62页 |
·胶体金颗粒的制备 | 第50-52页 |
·胶体金标记抗体的制备 | 第52-54页 |
·胶体金标记抗体Au-GST标记酵母染色质AFM成像 | 第54-56页 |
·多头绒泡菌不同细胞周期的染色质AFM成像 | 第56-59页 |
·胶体金标记抗体Au-m AbP35 标记多头绒泡菌不同细胞周期染色质AFM成像 | 第59-62页 |
第四章讨论 | 第62-69页 |
·PELF1 与yELF1 功能类似,都参与基因转录、蛋白翻译、糖代谢以及胁迫应答 | 第62页 |
·PELF1 在不同细胞周期中相互作用蛋白有差异 | 第62-65页 |
·PELF1 单克隆抗体可以用于PELF1 检测 | 第65页 |
·多头绒泡菌不同细胞周期中染色质形态不同 | 第65-67页 |
·PELF1 与染色质维持解折叠有关 | 第67-69页 |
第五章 结论 | 第69-71页 |
参考文献 | 第71-79页 |
附录 | 第79-84页 |
致谢 | 第84-85页 |