摘要 | 第1-6页 |
ABSTRACT | 第6-8页 |
缩略语表 | 第8-9页 |
目录 | 第9-12页 |
1 前言 | 第12-26页 |
·植物性别分化研究概况 | 第12-17页 |
·性别决定基因的相关研究 | 第12-13页 |
·性染色体演化研究进展 | 第13-15页 |
·环境因素对性别分化的调控 | 第15-16页 |
·菠菜性别分化研究概况 | 第16-17页 |
·杂交特异性扩增技术研究概况 | 第17-23页 |
·染色体显微分离、微切割与微克隆 | 第18-20页 |
·SSH 技术研究概况 | 第20-21页 |
·HSA 体系建立及应用 | 第21-23页 |
·ESTs 的研究概况 | 第23-24页 |
·本研究的目的及意义 | 第24-26页 |
2 实验方法 | 第26-40页 |
·实验材料、试剂及仪器设备 | 第26-27页 |
·实验材料 | 第26页 |
·主要试剂 | 第26-27页 |
·合成引物和接头 | 第27-28页 |
·菠菜 Y 染色体的显微分离、DOP-PCR 扩增和检测 | 第28-31页 |
·染色体标本制备 | 第28-29页 |
·菠菜 Y 染色体的显微分离 | 第29页 |
·微分离染色体的体外扩增 | 第29页 |
·微分离染色体 DOP-PCR 产物来源鉴定 | 第29-31页 |
·开花期雌雄菠菜基因组 DNA、RNA 的提取及 cDNA 的合成 | 第31-34页 |
·菠菜开花期雄性及雌性基因组 DNA 的获得 | 第31页 |
·菠菜雄花 RNA 的提取及检测 | 第31-32页 |
·菠菜雄花双链 cDNA 的合成 | 第32-34页 |
·利用杂交特异性扩增法获得菠菜性染色体上的 cDNA 片段 | 第34-40页 |
·杂交样品制备 | 第34-36页 |
·杂交 | 第36页 |
·绿豆核酸酶处理杂交产物 | 第36页 |
·杂交样品的 PCR 扩增 | 第36-37页 |
·杂交样品 PCR 产物的克隆 | 第37-38页 |
·斑点杂交鉴定扩增产物来源并筛选菠菜 Y 染色体上特异表达 cDNA 序列 ... | 第38页 |
·雄性菠菜性染色体特异 cDNA 序列的生物信息学分析 | 第38-40页 |
3 实验结果 | 第40-56页 |
·染色体显微分离 | 第40页 |
·微分离染色体 DOP-PCR 扩增产物 | 第40-41页 |
·微分离染色体来源鉴定 | 第41-43页 |
·利用斑点杂交鉴定菠菜单染色体 DOP-PCR 产物来源 | 第41-42页 |
·用菠菜雄性特异 DNA 序列 T11A 鉴定微分离染色体来源 | 第42-43页 |
·RNA 提取、纯化及检测 | 第43页 |
·HSA 杂交特异性扩增 | 第43-48页 |
·酶切效率检测 | 第43-44页 |
·接头连接效率检测 | 第44-45页 |
·杂交特异性扩增的效率分析 | 第45-46页 |
·菠菜 Y 染色体上特异表达 EST 序列的克隆及筛选 | 第46-47页 |
·斑点杂交鉴定扩增产物来源并筛选菠菜 Y 染色体上特异表达 EST 序列 | 第47-48页 |
·菠菜 Y 染色体特异表达序列的生物信息学分析 | 第48-56页 |
·EST 序列长度分布 | 第48-49页 |
·菠菜 Y 染色体上 EST 序列的同源比对 | 第49-51页 |
·GO 注释分析 | 第51-55页 |
·KEGG 代谢途径分析 | 第55-56页 |
4 讨论 | 第56-62页 |
·菠菜 Y 染色体特异 EST 序列快速克隆技术体系的建立 | 第56-58页 |
·菠菜 EST 序列的分析 | 第58-60页 |
·后续研究工作 | 第60-62页 |
参考文献 | 第62-72页 |
附录 | 第72-82页 |
致谢 | 第82-83页 |
攻读学位期间发表的学术论文目录 | 第83-84页 |