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半滑舌鳎神经坏死病毒病的研究

摘要第1-6页
Abstract第6-11页
引言第11-13页
第一章 文献综述第13-21页
   ·半滑舌鳎病毒性疾病研究进展第13-16页
     ·淋巴囊肿病毒第13-14页
     ·细胞肿大虹彩病毒第14页
     ·传染性胰脏坏死病毒第14-15页
     ·鱼类神经坏死病毒第15页
     ·病毒性出血性败血症病毒第15-16页
   ·鱼类神经坏死病毒分子生物学检测方法第16-18页
     ·PCR 及 RT-PCR第16页
     ·荧光定量 PCR第16-17页
     ·多重 PCR第17页
     ·环介导核酸等温扩增第17-18页
     ·基因芯片第18页
   ·小结第18-21页
第二章 半滑舌鳎神经坏死病毒病的发现与疾病调查第21-29页
   ·材料与方法第21-24页
     ·患病半滑舌鳎鱼苗养殖情况调查第21页
     ·RT-PCR方法筛查病毒性神经坏死病病原第21-23页
     ·现场快速高灵敏检测试剂盒筛查病原第23-24页
     ·育苗场鱼类神经坏死病毒感染的调查第24页
   ·结果第24-27页
     ·半滑舌鳎鱼苗养殖情况的调查第24-25页
     ·半滑舌鳎体内鱼类神经坏死病毒的 RT-PCR 检测结果第25-26页
     ·NNV 现场快速高灵敏检测试剂盒检测结果第26页
     ·育苗场感染鱼类神经坏死病毒鱼苗统计第26-27页
   ·小结第27-29页
第三章 疾病的人工感染实验及组织病理观察第29-37页
   ·材料与方法第29-31页
     ·病料准备第29页
     ·病料匀浆液的准备第29页
     ·半滑舌鳎人工感染实验第29-30页
     ·人工感染实验 RT-PCR 检测第30页
     ·石蜡切片制备与观察第30-31页
   ·结果第31-35页
     ·累积死亡率统计第31-32页
     ·人工感染样品的 RT-PCR 检测第32页
     ·病鱼的组织病理变化第32-35页
   ·小结第35-37页
第四章 感染半滑舌鳎的神经坏死病毒基因组序列的测定和分析第37-57页
   ·实验材料及方法第37-47页
     ·病鱼来源第37页
     ·总 RNA 的提取第37-38页
     ·病毒 RNA 中间片段的克隆、测序及序列分析第38-40页
     ·5’-RACE 测定病毒 RNA 的 5’末端第40-43页
     ·环化 RACE 克隆病毒 RNA 的 3’末端及病毒全长 RNA 序列的拼接第43-45页
     ·病毒 RNA1 和 RNA2 全序列的比对与分析第45-47页
   ·结果第47-55页
     ·半滑舌鳎神经坏死病毒 RNA1 和 RNA2 全长的克隆第47页
     ·病毒 RNA1 和 RNA2 基因组全序列的测定与分析第47-51页
     ·核苷酸序列二级结构预测第51-52页
     ·病毒的多序列比对及系统进化树分析第52-55页
   ·小结第55-57页
第五章 臭氧对 RGNNV RNA 破坏效果的评价方法的建立与应用第57-69页
   ·材料与方法第58-62页
     ·实验用毒株和菌株第58页
     ·引物设计第58-59页
     ·总 RNA 提取第59页
     ·cDNA 的合成第59页
     ·体外合成 RNA 模板第59-61页
     ·LR RT-PCR 方法反应体系的建立及参数优化第61页
     ·LR RT-PCR 方法的灵敏度和特异性第61-62页
     ·应用 LR RT-PCR 方法评价臭氧对 RGNNV RNA2 的破坏效果第62页
   ·实验结果第62-66页
     ·LR RT-PCR 反应体系和参数的优化第62-63页
     ·LR RT-PCR 检测方法的灵敏度及特异性第63-65页
     ·应用 LR RT-PCR 方法评价臭氧对 RGNNV RNA2 的破坏效果第65-66页
   ·小结第66-69页
参考文献第69-79页
致谢第79页

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