摘要 | 第1-6页 |
Abstract | 第6-11页 |
引言 | 第11-13页 |
第一章 文献综述 | 第13-21页 |
·半滑舌鳎病毒性疾病研究进展 | 第13-16页 |
·淋巴囊肿病毒 | 第13-14页 |
·细胞肿大虹彩病毒 | 第14页 |
·传染性胰脏坏死病毒 | 第14-15页 |
·鱼类神经坏死病毒 | 第15页 |
·病毒性出血性败血症病毒 | 第15-16页 |
·鱼类神经坏死病毒分子生物学检测方法 | 第16-18页 |
·PCR 及 RT-PCR | 第16页 |
·荧光定量 PCR | 第16-17页 |
·多重 PCR | 第17页 |
·环介导核酸等温扩增 | 第17-18页 |
·基因芯片 | 第18页 |
·小结 | 第18-21页 |
第二章 半滑舌鳎神经坏死病毒病的发现与疾病调查 | 第21-29页 |
·材料与方法 | 第21-24页 |
·患病半滑舌鳎鱼苗养殖情况调查 | 第21页 |
·RT-PCR方法筛查病毒性神经坏死病病原 | 第21-23页 |
·现场快速高灵敏检测试剂盒筛查病原 | 第23-24页 |
·育苗场鱼类神经坏死病毒感染的调查 | 第24页 |
·结果 | 第24-27页 |
·半滑舌鳎鱼苗养殖情况的调查 | 第24-25页 |
·半滑舌鳎体内鱼类神经坏死病毒的 RT-PCR 检测结果 | 第25-26页 |
·NNV 现场快速高灵敏检测试剂盒检测结果 | 第26页 |
·育苗场感染鱼类神经坏死病毒鱼苗统计 | 第26-27页 |
·小结 | 第27-29页 |
第三章 疾病的人工感染实验及组织病理观察 | 第29-37页 |
·材料与方法 | 第29-31页 |
·病料准备 | 第29页 |
·病料匀浆液的准备 | 第29页 |
·半滑舌鳎人工感染实验 | 第29-30页 |
·人工感染实验 RT-PCR 检测 | 第30页 |
·石蜡切片制备与观察 | 第30-31页 |
·结果 | 第31-35页 |
·累积死亡率统计 | 第31-32页 |
·人工感染样品的 RT-PCR 检测 | 第32页 |
·病鱼的组织病理变化 | 第32-35页 |
·小结 | 第35-37页 |
第四章 感染半滑舌鳎的神经坏死病毒基因组序列的测定和分析 | 第37-57页 |
·实验材料及方法 | 第37-47页 |
·病鱼来源 | 第37页 |
·总 RNA 的提取 | 第37-38页 |
·病毒 RNA 中间片段的克隆、测序及序列分析 | 第38-40页 |
·5’-RACE 测定病毒 RNA 的 5’末端 | 第40-43页 |
·环化 RACE 克隆病毒 RNA 的 3’末端及病毒全长 RNA 序列的拼接 | 第43-45页 |
·病毒 RNA1 和 RNA2 全序列的比对与分析 | 第45-47页 |
·结果 | 第47-55页 |
·半滑舌鳎神经坏死病毒 RNA1 和 RNA2 全长的克隆 | 第47页 |
·病毒 RNA1 和 RNA2 基因组全序列的测定与分析 | 第47-51页 |
·核苷酸序列二级结构预测 | 第51-52页 |
·病毒的多序列比对及系统进化树分析 | 第52-55页 |
·小结 | 第55-57页 |
第五章 臭氧对 RGNNV RNA 破坏效果的评价方法的建立与应用 | 第57-69页 |
·材料与方法 | 第58-62页 |
·实验用毒株和菌株 | 第58页 |
·引物设计 | 第58-59页 |
·总 RNA 提取 | 第59页 |
·cDNA 的合成 | 第59页 |
·体外合成 RNA 模板 | 第59-61页 |
·LR RT-PCR 方法反应体系的建立及参数优化 | 第61页 |
·LR RT-PCR 方法的灵敏度和特异性 | 第61-62页 |
·应用 LR RT-PCR 方法评价臭氧对 RGNNV RNA2 的破坏效果 | 第62页 |
·实验结果 | 第62-66页 |
·LR RT-PCR 反应体系和参数的优化 | 第62-63页 |
·LR RT-PCR 检测方法的灵敏度及特异性 | 第63-65页 |
·应用 LR RT-PCR 方法评价臭氧对 RGNNV RNA2 的破坏效果 | 第65-66页 |
·小结 | 第66-69页 |
参考文献 | 第69-79页 |
致谢 | 第79页 |