| 摘要 | 第1-7页 |
| Abstract | 第7-10页 |
| 目录 | 第10-13页 |
| CONTENTS | 第13-16页 |
| 图表目录 | 第16-18页 |
| 主要符号表 | 第18-19页 |
| 1 绪论 | 第19-47页 |
| ·诱导多能干细胞的研究背景和意义 | 第19-20页 |
| ·iPSC的研究进展 | 第20-45页 |
| ·iPSCs研究的内容 | 第20-21页 |
| ·向靶细胞传递因子的方式 | 第21-27页 |
| ·细胞类型的选择与因子组合 | 第27-29页 |
| ·iPSCs克隆的鉴定 | 第29-33页 |
| ·iPSCs的形成机制 | 第33-43页 |
| ·iPSCs的治疗潜能 | 第43-45页 |
| ·iPSCs领域研究中的问题 | 第45页 |
| ·本文的选题依据和研究内容 | 第45-47页 |
| 2 两因子和四因子多顺反子质粒载体的构建 | 第47-71页 |
| ·引言 | 第47页 |
| ·实验仪器与设备 | 第47-48页 |
| ·实验材料与方法 | 第48-51页 |
| ·试剂 | 第48页 |
| ·实验方法 | 第48-51页 |
| ·构建pIRES2-OSKM-EGFP和pIRES2-OS-EGFP载体 | 第51-56页 |
| ·构建pDown-Oct4-P2A-Sox2片段 | 第51-52页 |
| ·构建pTail-T2A-Klf4-E2A-c-Myc片段 | 第52-53页 |
| ·构建pIRES2-OSKM-EGFP载体 | 第53-55页 |
| ·构建pIRES2-OS-EGFP载体 | 第55-56页 |
| ·实验结果 | 第56-60页 |
| ·构建pDown-Oct4-P2A-Sox2片段和pTail-T2A-Klf4-E2A-c-Myc片段的菌落PCR鉴定 | 第56-58页 |
| ·载体pIRES2-OSKM-EGFP和pIRES2-OS-EGFP的酶切鉴定 | 第58-60页 |
| ·载体结构图谱 | 第60-67页 |
| ·pIRES2-EGFP骨架载体介绍 | 第60-61页 |
| ·pIRES2-OSKM-EGFP与pIRES2-OS-EGFP载体模式图介绍 | 第61页 |
| ·pIRES2-OSKM-EGFP全序列 | 第61-67页 |
| ·讨论 | 第67-70页 |
| ·小结 | 第70-71页 |
| 3 四因子多顺反子质粒重编程人脂肪干细胞为诱导多能干细胞 | 第71-97页 |
| ·仪器设备及材料 | 第72-74页 |
| ·实验仪器与设备 | 第72页 |
| ·药品与试剂 | 第72-74页 |
| ·试剂配制与实验方法 | 第74-83页 |
| ·试剂配制 | 第74-76页 |
| ·实验方法 | 第76-83页 |
| ·结果 | 第83-93页 |
| ·分离培养的ADSCs形态 | 第83-84页 |
| ·ADSCs特异表面分子的表达 | 第84页 |
| ·iPSC的建立 | 第84-86页 |
| ·iPSC的多能性检测 | 第86-89页 |
| ·多能性相关的基因表达 | 第89-90页 |
| ·iPSCs基因组稳定性检测 | 第90-91页 |
| ·iPSC体外分化实验 | 第91-93页 |
| ·iPSC体内分化实验 | 第93页 |
| ·讨论 | 第93-95页 |
| ·小结 | 第95-97页 |
| 4 携带Oct4和Sox2两因子质粒载体重编程ADSCs为诱导多能干细胞 | 第97-107页 |
| ·实验仪器与设备 | 第97页 |
| ·实验材料与方法 | 第97-99页 |
| ·主要试剂 | 第97-98页 |
| ·实验方法 | 第98-99页 |
| ·结果 | 第99-104页 |
| ·仅携带二转录因子的质粒载体能够转染ADSCs | 第99-100页 |
| ·iPSC的建立及其多能性检测 | 第100页 |
| ·多能性基因表达与基因组稳定性检测 | 第100-103页 |
| ·iPSCs体外分化实验 | 第103页 |
| ·iPSCs体内分化实验 | 第103-104页 |
| ·讨论 | 第104-106页 |
| ·小结 | 第106-107页 |
| 5 诱导多能干细胞向神经细胞分化的研究 | 第107-121页 |
| ·仪器设备与材料 | 第108页 |
| ·实验仪器与设备 | 第108页 |
| ·主要试剂 | 第108页 |
| ·试剂配制与实验方法 | 第108-112页 |
| ·试剂配制 | 第108-109页 |
| ·实验方法 | 第109-112页 |
| ·实验结果 | 第112-117页 |
| ·多顺反子质粒载体转染人来源ADSCs | 第112-113页 |
| ·转染细胞表达多能性标记 | 第113-115页 |
| ·细胞基因组稳定性检测 | 第115页 |
| ·多能细胞向神经细胞分化 | 第115-117页 |
| ·讨论 | 第117-120页 |
| ·小结 | 第120-121页 |
| 6 结论与展望 | 第121-123页 |
| 参考文献 | 第123-136页 |
| 附录 | 第136-138页 |
| 致谢 | 第138-140页 |
| 作者简介 | 第140页 |
| 攻读博士学位期间科研项目及科研成果 | 第140-142页 |
