| ABBREVIATION | 第1-7页 |
| 摘要 | 第7-9页 |
| ABSTRACT | 第9-11页 |
| 前言 | 第11-15页 |
| 1 卵巢癌 | 第11页 |
| 2 叶酸受体 α | 第11-12页 |
| 3 基于叶酸受体 α 的卵巢癌基因免疫治疗 | 第12-13页 |
| 4 CpG ODN佐剂 | 第13页 |
| 5 本文研究思路及技术路线图 | 第13-15页 |
| 第一章 FRα真核表达重组质粒的构建 | 第15-35页 |
| ·实验材料和仪器 | 第15-19页 |
| ·菌种与质粒 | 第15页 |
| ·细胞株 | 第15-16页 |
| ·试剂 | 第16-17页 |
| ·培养基/缓冲液配制 | 第17-18页 |
| ·仪器 | 第18-19页 |
| ·实验方法 | 第19-29页 |
| ·FRα cDNA的制备 | 第19-21页 |
| ·FRα- pcDNA3.1 重组质粒的构建 | 第21-26页 |
| ·重组质粒鉴定 | 第26-27页 |
| ·重组质粒的大量制备以及测定 | 第27-29页 |
| ·实验结果 | 第29-33页 |
| ·FRα cDNA的制备 | 第29-30页 |
| ·FRα-pcDNA3.1 重组质粒的构建 | 第30-33页 |
| ·讨论 | 第33-34页 |
| ·本章小结 | 第34-35页 |
| 第二章 FRα 在HEK293细胞中的瞬时表达以及鉴定 | 第35-46页 |
| ·实验材料和仪器 | 第35-37页 |
| ·细胞株 | 第35页 |
| ·试剂 | 第35-36页 |
| ·培养基/缓冲液配方 | 第36-37页 |
| ·仪器 | 第37页 |
| ·脂质体法瞬时转染HEK293细胞 | 第37-38页 |
| ·HEK293细胞铺板 | 第37-38页 |
| ·转染样品的准备 | 第38页 |
| ·FRα 表达鉴定 | 第38-42页 |
| ·Western blot鉴定 | 第38-40页 |
| ·细胞免疫荧光鉴定 | 第40页 |
| ·RT-PCR鉴定 | 第40-42页 |
| ·实验结果 | 第42-44页 |
| ·Western blot鉴定 | 第42-43页 |
| ·细胞免疫荧光 | 第43-44页 |
| ·RT-PCR鉴定 | 第44页 |
| ·讨论 | 第44-45页 |
| ·本章小结 | 第45-46页 |
| 第三章 叶酸受体α核酸疫苗活性研究 | 第46-60页 |
| ·实验材料及仪器 | 第46-47页 |
| ·实验动物 | 第46页 |
| ·试剂 | 第46-47页 |
| ·培养基/缓冲液配方 | 第47页 |
| ·仪器 | 第47页 |
| ·实验方法 | 第47-51页 |
| ·DNA疫苗免疫 | 第47-48页 |
| ·小鼠血清抗体滴度检测 | 第48-49页 |
| ·小鼠脾细胞增殖实验 | 第49-50页 |
| ·CTL特异性杀伤实验 | 第50-51页 |
| ·实验结果 | 第51-57页 |
| ·血清中抗体滴度检测 | 第51-54页 |
| ·小鼠脾细胞增殖实验 | 第54-56页 |
| ·CTL实验 | 第56-57页 |
| ·讨论 | 第57-59页 |
| ·本章小结 | 第59-60页 |
| 本文总结 | 第60-61页 |
| 参考文献 | 第61-63页 |
| 综述 | 第63-72页 |
| 参考文献 | 第69-72页 |
| 附录1 pMD-18T质粒图谱及 pc DNA3.1(+) 质粒图谱 | 第72-73页 |
| 附录2 FRα-pc DNA3.1测序结果 | 第73-74页 |
| 附录3 硕士阶段已发表文章 | 第74-75页 |
| 致谢 | 第75页 |