| 摘要 | 第1-5页 |
| ABSTRACT | 第5-7页 |
| 英文縮写表 | 第7-11页 |
| 第一部分 前言 | 第11-26页 |
| 1 模式生物的新星—斑马鱼 | 第11-16页 |
| ·模式生物 | 第11页 |
| ·斑马鱼作为模式生物的优势及其研究概述 | 第11-13页 |
| ·斑马鱼胚胎早期发育过程概述 | 第13-16页 |
| 2 KCTD10基因概述 | 第16-21页 |
| ·BTB/POZ结构域 | 第16-18页 |
| ·KCTD10基因背景 | 第18-20页 |
| ·斑马鱼KCTD10基因结构 | 第20-21页 |
| 3 反义码啉环寡聚核苷酸基因沉默技术 | 第21-24页 |
| 4 本研究的目的与意义 | 第24-26页 |
| 第二部分 材料与方法 | 第26-48页 |
| 1 实验材料 | 第26-30页 |
| ·实验动物 | 第26页 |
| ·菌种 | 第26页 |
| ·工具酶 | 第26页 |
| ·载体 | 第26-27页 |
| ·试剂 | 第27页 |
| ·试剂(盒) | 第27页 |
| ·所需溶液 | 第27-29页 |
| ·主要仪器设备 | 第29-30页 |
| 2. 实验方法 | 第30-48页 |
| ·用PCR方法扩增KCTD10编码的基因 | 第30-35页 |
| ·重组载体的构建 | 第35-36页 |
| ·总RNA的提取及cDNA合成 | 第36-38页 |
| ·半定量PCR | 第38-39页 |
| ·探针合成 | 第39-40页 |
| ·探针纯化(RNeasy Mini试剂盒法) | 第40-41页 |
| ·整胚原位杂交 | 第41-45页 |
| ·mRNA的制备与显微注射 | 第45-48页 |
| 第三部分 结果与分析 | 第48-63页 |
| 1 KCTD10基因的生物信息学分析 | 第48-49页 |
| ·KCTD10基因的序列分析 | 第48-49页 |
| ·斑马鱼KCTD10同源性比较 | 第49页 |
| 2 表达载体的构建 | 第49-51页 |
| ·PCR扩增出KCTD10目的片段 | 第49-50页 |
| ·KCTD10表达载体的构建 | 第50-51页 |
| 3 Semi RT-PCR分析KCTD10在斑马鱼胚胎和成体中的表达 | 第51-53页 |
| ·RNA抽提 | 第51-52页 |
| ·半定量PCR分析 | 第52-53页 |
| 4 整胚原位杂交分析KCTD10 mRNA在胚胎发育中的表达 | 第53-55页 |
| ·DIG-标记的mRNA探针的制备 | 第53页 |
| ·斑马鱼KCTD10基因的原位杂交表达谱 | 第53-55页 |
| 5 抑制KCTD10基因的表达 | 第55-59页 |
| ·Morpholino有效性的判断 | 第55-56页 |
| ·MO抑制KCTD10的表达对斑马鱼胚胎发育的影响 | 第56-59页 |
| 6 表型挽救 | 第59-60页 |
| 7 抑制斑马鱼KCTD10基因的表达对心脏和血管发育的影响 | 第60-63页 |
| ·抑制斑马鱼KCTD10基因表达影响早期心血管发育过程 | 第60-62页 |
| ·抑制斑马鱼KCTD10基因表达影响早期血管发育过程 | 第62-63页 |
| 第四部分 讨论 | 第63-66页 |
| 参考文献 | 第66-75页 |
| 硕士期间发表的论文 | 第75-76页 |
| 致谢 | 第76-77页 |
