中文摘要 | 第1-8页 |
ABSTRACT | 第8-12页 |
目录 | 第12-15页 |
缩略词 | 第15-16页 |
第一章 绪论 | 第16-42页 |
1 前言 | 第16页 |
2 催化乳酸生成丙酮酸的蛋白酶类 | 第16-23页 |
·L-乳酸氧化酶 | 第16-17页 |
·细胞色素氧化酶b2 | 第17-18页 |
·依赖NAD~+的乳酸脱氢酶 | 第18-19页 |
·NAD~+非依赖性的乳酸脱氢酶(iLDH)研究 | 第19-23页 |
3 蛋白质组学研究 | 第23-32页 |
·蛋白质组学内涵 | 第23页 |
·蛋白质组学的研究内容 | 第23-25页 |
·蛋白质组学的分类 | 第25-26页 |
·双向电泳技术在蛋白质组学研究中的应用 | 第26-27页 |
·质谱技术在蛋白质组学研究中的应用 | 第27-30页 |
·蛋白质组学研究中面临的问题 | 第30-32页 |
·蛋白质组学在微生物研究中的应用 | 第32页 |
4 膜蛋白质组学研究 | 第32-37页 |
·膜蛋白 | 第32-33页 |
·膜蛋白质组学简介 | 第33页 |
·膜蛋白样品的预处理分离技术 | 第33-34页 |
·研究膜蛋白质常用技术手段 | 第34-36页 |
·影响膜蛋白质组分析的因素 | 第36-37页 |
5 膜蛋白质复合体的研究 | 第37-40页 |
·膜蛋白质复合体 | 第37-38页 |
·膜蛋白复合体研究中存在的问题 | 第38页 |
·膜蛋白复合体研究方法 | 第38-39页 |
·2D BN/SDS-PAGE操作流程 | 第39-40页 |
6 立题依据及研究的目的和意义 | 第40页 |
7 论文研究的主要内容 | 第40-42页 |
第二章 蛋白质组学在Pseudomonas stutzeri SDM代谢途径初步分析中的应用 | 第42-58页 |
1 材料和方法 | 第42-47页 |
·主要仪器和试剂 | 第42-43页 |
·菌株及培养条件 | 第43-44页 |
·实验方法 | 第44-47页 |
2 结果 | 第47-51页 |
·有机酸的鉴定:HPLC结果分析 | 第47-48页 |
·双向电泳图谱分析 | 第48-49页 |
·肽质量指纹谱分析 | 第49-51页 |
3 讨论 | 第51-55页 |
·P.stutzeri SDM氧化乳酸生成丙酮酸能力分析 | 第51-52页 |
·P.stutzeri SDM主要功能蛋白质组分类分析 | 第52-53页 |
·DL-乳酸氧化相关的蛋白 | 第53-54页 |
·能量代谢相关蛋白 | 第54-55页 |
·存在的问题 | 第55页 |
4 小结 | 第55-58页 |
第三章 Pseudomonas stutzeri SDM膜结合的L-和D-乳酸脱氢酶催化特性的研究 | 第58-72页 |
1 材料和方法 | 第58-62页 |
·主要仪器和试剂 | 第58-60页 |
·菌株及培养条件 | 第60页 |
·实验方法 | 第60-62页 |
2 结果 | 第62-69页 |
·不同碳源条件下菌体产生iLDH的研究 | 第62-63页 |
·P.stutzeri SDM菌体细胞中iLDH酶活性的定位 | 第63页 |
·葡萄糖对P.stutzeri SDM中iLDH表达的影响 | 第63-65页 |
·iLDH活性的温度稳定性 | 第65-66页 |
·iLDH酶促动力学特点 | 第66-68页 |
·iLDH的辅基或辅酶的确定 | 第68-69页 |
3 讨论 | 第69-71页 |
4 小结 | 第71-72页 |
第四章 不同表面活性剂处理Pseudomonas stutzeri SDM膜结构及蛋白质组学分析 | 第72-94页 |
1 材料和方法 | 第72-76页 |
·试剂 | 第72-73页 |
·菌株及培养条件 | 第73-74页 |
·实验方法 | 第74-76页 |
2 结果 | 第76-85页 |
·不同表面活性剂对膜组分蛋白质溶解 | 第76-77页 |
·双向电泳图谱 | 第77-82页 |
·肽质量指纹谱分析 | 第82-85页 |
3 讨论 | 第85-91页 |
·样品处理 | 第85-87页 |
·蛋白质的沉淀 | 第87-88页 |
·数据库查询 | 第88页 |
·膜蛋白质的鉴定 | 第88-90页 |
·存在的问题 | 第90-91页 |
4 小结 | 第91-94页 |
第五章 2D BN/SDS-PAGE技术在Pseudomonas stutzeri SDM膜蛋白质研究中的应用 | 第94-112页 |
1 材料和方法 | 第94-97页 |
·试剂 | 第94-96页 |
·菌株及培养条件 | 第96页 |
·实验方法 | 第96-97页 |
2 结果 | 第97-104页 |
·不同表面活性剂对iLDH催化活性的影响 | 第97-99页 |
·不同DM浓度选择 | 第99-100页 |
·DM浓度对iLDH酶活性的影响 | 第100-101页 |
·2D BN/SDS-PAGE | 第101-102页 |
·肽质量指纹谱分析 | 第102-104页 |
3 讨论 | 第104-110页 |
·表面活性剂的选择 | 第105-106页 |
·电泳方法的选择 | 第106-107页 |
·活性染色方法的建立 | 第107-108页 |
·MALDI-TOF MS鉴定的蛋白质 | 第108-109页 |
·存在的问题 | 第109-110页 |
4 小结 | 第110-112页 |
第六章 不同碳源培养条件下Pseudomonas stutzeri SDM功能蛋白质组研究 | 第112-122页 |
1 材料和方法 | 第112-114页 |
·试剂 | 第112页 |
·菌株及培养条件 | 第112-113页 |
·实验方法 | 第113-114页 |
2 结果 | 第114-117页 |
·菌体生长和转化丙酮酸能力 | 第114-115页 |
·双向电泳图谱分析 | 第115-116页 |
·肽质量指纹谱分析 | 第116-117页 |
3 讨论 | 第117-120页 |
·乳酸特异表达的蛋白 | 第117-119页 |
·乙醇特异表达的蛋白 | 第119-120页 |
4 小结 | 第120-122页 |
附录 | 第122-128页 |
参考文献 | 第128-144页 |
总结和展望 | 第144-148页 |
1 全文总结 | 第144-145页 |
2 论文创新点 | 第145页 |
3 今后工作展望 | 第145-148页 |
攻读博士学位期间取得的学术成果 | 第148-150页 |
致谢 | 第150-152页 |
学位论文评阅及答辩情况表 | 第152页 |