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Pseudomonas stutzeri SDM催化特性及蛋白质组学研究

中文摘要第1-8页
ABSTRACT第8-12页
目录第12-15页
缩略词第15-16页
第一章 绪论第16-42页
 1 前言第16页
 2 催化乳酸生成丙酮酸的蛋白酶类第16-23页
   ·L-乳酸氧化酶第16-17页
   ·细胞色素氧化酶b2第17-18页
   ·依赖NAD~+的乳酸脱氢酶第18-19页
   ·NAD~+非依赖性的乳酸脱氢酶(iLDH)研究第19-23页
 3 蛋白质组学研究第23-32页
   ·蛋白质组学内涵第23页
   ·蛋白质组学的研究内容第23-25页
   ·蛋白质组学的分类第25-26页
   ·双向电泳技术在蛋白质组学研究中的应用第26-27页
   ·质谱技术在蛋白质组学研究中的应用第27-30页
   ·蛋白质组学研究中面临的问题第30-32页
   ·蛋白质组学在微生物研究中的应用第32页
 4 膜蛋白质组学研究第32-37页
   ·膜蛋白第32-33页
   ·膜蛋白质组学简介第33页
   ·膜蛋白样品的预处理分离技术第33-34页
   ·研究膜蛋白质常用技术手段第34-36页
   ·影响膜蛋白质组分析的因素第36-37页
 5 膜蛋白质复合体的研究第37-40页
   ·膜蛋白质复合体第37-38页
   ·膜蛋白复合体研究中存在的问题第38页
   ·膜蛋白复合体研究方法第38-39页
   ·2D BN/SDS-PAGE操作流程第39-40页
 6 立题依据及研究的目的和意义第40页
 7 论文研究的主要内容第40-42页
第二章 蛋白质组学在Pseudomonas stutzeri SDM代谢途径初步分析中的应用第42-58页
 1 材料和方法第42-47页
   ·主要仪器和试剂第42-43页
   ·菌株及培养条件第43-44页
   ·实验方法第44-47页
 2 结果第47-51页
   ·有机酸的鉴定:HPLC结果分析第47-48页
   ·双向电泳图谱分析第48-49页
   ·肽质量指纹谱分析第49-51页
 3 讨论第51-55页
   ·P.stutzeri SDM氧化乳酸生成丙酮酸能力分析第51-52页
   ·P.stutzeri SDM主要功能蛋白质组分类分析第52-53页
   ·DL-乳酸氧化相关的蛋白第53-54页
   ·能量代谢相关蛋白第54-55页
   ·存在的问题第55页
 4 小结第55-58页
第三章 Pseudomonas stutzeri SDM膜结合的L-和D-乳酸脱氢酶催化特性的研究第58-72页
 1 材料和方法第58-62页
   ·主要仪器和试剂第58-60页
   ·菌株及培养条件第60页
   ·实验方法第60-62页
 2 结果第62-69页
   ·不同碳源条件下菌体产生iLDH的研究第62-63页
   ·P.stutzeri SDM菌体细胞中iLDH酶活性的定位第63页
   ·葡萄糖对P.stutzeri SDM中iLDH表达的影响第63-65页
   ·iLDH活性的温度稳定性第65-66页
   ·iLDH酶促动力学特点第66-68页
   ·iLDH的辅基或辅酶的确定第68-69页
 3 讨论第69-71页
 4 小结第71-72页
第四章 不同表面活性剂处理Pseudomonas stutzeri SDM膜结构及蛋白质组学分析第72-94页
 1 材料和方法第72-76页
   ·试剂第72-73页
   ·菌株及培养条件第73-74页
   ·实验方法第74-76页
 2 结果第76-85页
   ·不同表面活性剂对膜组分蛋白质溶解第76-77页
   ·双向电泳图谱第77-82页
   ·肽质量指纹谱分析第82-85页
 3 讨论第85-91页
   ·样品处理第85-87页
   ·蛋白质的沉淀第87-88页
   ·数据库查询第88页
   ·膜蛋白质的鉴定第88-90页
   ·存在的问题第90-91页
 4 小结第91-94页
第五章 2D BN/SDS-PAGE技术在Pseudomonas stutzeri SDM膜蛋白质研究中的应用第94-112页
 1 材料和方法第94-97页
   ·试剂第94-96页
   ·菌株及培养条件第96页
   ·实验方法第96-97页
 2 结果第97-104页
   ·不同表面活性剂对iLDH催化活性的影响第97-99页
   ·不同DM浓度选择第99-100页
   ·DM浓度对iLDH酶活性的影响第100-101页
   ·2D BN/SDS-PAGE第101-102页
   ·肽质量指纹谱分析第102-104页
 3 讨论第104-110页
   ·表面活性剂的选择第105-106页
   ·电泳方法的选择第106-107页
   ·活性染色方法的建立第107-108页
   ·MALDI-TOF MS鉴定的蛋白质第108-109页
   ·存在的问题第109-110页
 4 小结第110-112页
第六章 不同碳源培养条件下Pseudomonas stutzeri SDM功能蛋白质组研究第112-122页
 1 材料和方法第112-114页
   ·试剂第112页
   ·菌株及培养条件第112-113页
   ·实验方法第113-114页
 2 结果第114-117页
   ·菌体生长和转化丙酮酸能力第114-115页
   ·双向电泳图谱分析第115-116页
   ·肽质量指纹谱分析第116-117页
 3 讨论第117-120页
   ·乳酸特异表达的蛋白第117-119页
   ·乙醇特异表达的蛋白第119-120页
 4 小结第120-122页
附录第122-128页
参考文献第128-144页
总结和展望第144-148页
 1 全文总结第144-145页
 2 论文创新点第145页
 3 今后工作展望第145-148页
攻读博士学位期间取得的学术成果第148-150页
致谢第150-152页
学位论文评阅及答辩情况表第152页

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