| 中文摘要 | 第1-7页 |
| 英文摘要 | 第7-14页 |
| 1 绪论 | 第14-20页 |
| 1．1 课题目的和意义 | 第14-16页 |
| 1．2 主要研究内容、技术关键和预期目标 | 第16-17页 |
| 1．2．1 主要研究内容 | 第16页 |
| 1．2．2 技术关键 | 第16-17页 |
| 1．2．3 预期达到的目标 | 第17页 |
| 1．3 拟采用的技术路线和研究步骤 | 第17-19页 |
| 1．3．1 技术路线 | 第17-18页 |
| 1．3．2 研究步骤 | 第18-19页 |
| 1．4 创新性 | 第19-20页 |
| 2 高通量药物筛选与G-蛋白偶联受体 | 第20-36页 |
| 2．1 高通量药物筛选 | 第20-26页 |
| 2．1．1 药物筛选模型 | 第20-23页 |
| 2．1．2 高容量的样品库 | 第23-25页 |
| 2．1．3 自动化工作站 | 第25页 |
| 2．1．4 高效率的数据处理系统 | 第25-26页 |
| 2．2 G-蛋白偶联受体 | 第26-36页 |
| 2．2．1 G-蛋白偶联受体是高通量筛选的重要药靶 | 第26-27页 |
| 2．2．2 G-蛋白偶联受体的高通量筛选 | 第27-36页 |
| 3 减肥药物与NeuromedinU研究进展 | 第36-46页 |
| 3．1 肥胖病因及其减肥药物研究 | 第36-39页 |
| 3．1．1 肥胖病因研究 | 第36-37页 |
| 3．1．2 减肥药物研究 | 第37-39页 |
| 3．2 Neuromedin U及其受体的研究进展 | 第39-46页 |
| 3．2．1 Neuromedin U的结构 | 第39-41页 |
| 3．2．2 Neuromedin U的受体 | 第41-43页 |
| 3．2．3 Neuromedin U及其受体的组织分布 | 第43页 |
| 3．2．4 Neuromedin U的功能 | 第43-46页 |
| 4 高通量筛选模型的建立 | 第46-57页 |
| 4．1 高通量筛选模型设计 | 第46-48页 |
| 4．1．1 基本原理 | 第46页 |
| 4．1．2 响应元件及启动子的选择 | 第46-47页 |
| 4．1．3 报告基因的选择 | 第47-48页 |
| 4．2 材料与仪器 | 第48-49页 |
| 4．2．1 实验菌株 | 第48页 |
| 4．2．2 主要仪器 | 第48页 |
| 4．2．3 主要试剂 | 第48-49页 |
| 4．2．4 主要溶液 | 第49页 |
| 4．3 hNMU2R高通量筛选模型的建立 | 第49-54页 |
| 4．3．1 hNMU2R受体质粒（NMU2R/pcDNA3．1（+）构建 | 第49-52页 |
| 4．3．2 报告基因质粒（3×MRE/3×CRE/SRE-LUC/pGL3） | 第52页 |
| 4．3．3 hNMU2R筛选细胞株的建立 | 第52-54页 |
| 4．4 阴性细胞株的建立 | 第54-55页 |
| 4．5 其他受体筛选细胞株的建立 | 第55-56页 |
| 4．6 小结 | 第56-57页 |
| 5 筛选条件优化及模型评估 | 第57-68页 |
| 5．1 材料和方法 | 第57页 |
| 5．1．1 仪器 | 第57页 |
| 5．1．2 药品与试剂 | 第57页 |
| 5．1．3 筛选检测方法 | 第57页 |
| 5．2 NMU2R筛选细胞株筛选条件的优化及评估 | 第57-62页 |
| 5．2．1 荧光素酶表达时间的确定 | 第57-58页 |
| 5．2．2 96孔板每孔接种细胞数目的确定 | 第58-59页 |
| 5．2．3 溶剂DMSO的用量 | 第59-60页 |
| 5．2．4 Bright-Glo试剂用量的确定 | 第60页 |
| 5．2．5 筛选模型的评估 | 第60-62页 |
| 5．3 MC4筛选细胞株的筛选条件优化及评估 | 第62-66页 |
| 5．3．1 96孔板细胞接种数目 | 第62-63页 |
| 5．3．2 荧光素酶表达时间 | 第63-64页 |
| 5．3．3 溶剂DMSO的用量 | 第64页 |
| 5．3．4 Bright-Glo试剂用量 | 第64-65页 |
| 5．3．5 筛选方法的评估 | 第65-66页 |
| 5．4 M1R和阴性筛选细胞株筛选条件的优化及评估 | 第66页 |
| 5．5 讨论与结论 | 第66-68页 |
| 5．5．1 讨论 | 第66页 |
| 5．5．2 结论 | 第66-68页 |
| 6 天然产物提取物库 | 第68-84页 |
| 6．1 天然产物有效成分的提取方法 | 第68-69页 |
| 6．1．1 溶剂提取法 | 第68-69页 |
| 6．1．2 水蒸汽蒸馏法 | 第69页 |
| 6．2 天然产物提取物库的建立 | 第69-84页 |
| 6．2．1 天然产物原料的选择 | 第69页 |
| 6．2．2 提取 | 第69-84页 |
| 7 Neuromedin U2受体激动剂的高通量筛选 | 第84-92页 |
| 7．1 材料和方法 | 第84页 |
| 7．1．1 仪器 | 第84页 |
| 7．1．2 药品与试剂 | 第84页 |
| 7．2 实验方法 | 第84页 |
| 7．3 结果与讨论 | 第84-91页 |
| 7．3．1 天然产物水提物NMU2R的筛选结果 | 第84-88页 |
| 7．3．2 天然产物的阴性细胞株和MC4R、M1R细胞株检验 | 第88-89页 |
| 7．3．3 天然产物自身颜色和荧光的干扰测定 | 第89-90页 |
| 7．3．4 中成药或保健食品的NMU2R筛选结果 | 第90-91页 |
| 7．3．5 讨论 | 第91页 |
| 7．4 结论 | 第91-92页 |
| 8 活性单体分离、鉴定与结构-活性关系研究 | 第92-108页 |
| 8．1 活性单体的分离、纯化与鉴定 | 第92-100页 |
| 8．1．1 基本原理 | 第92-93页 |
| 8．1．2 实验材料和方法 | 第93-95页 |
| 8．1．3 实验结果与讨论 | 第95-100页 |
| 8．2 NMU2R激动剂的结构－活性关系研究 | 第100-107页 |
| 8．2．1 实验材料和方法 | 第100页 |
| 8．2．2 结果与讨论 | 第100-107页 |
| 8．3 结论 | 第107-108页 |
| 9 单纯性肥胖动物模型与动物实验 | 第108-113页 |
| 9．1 材料与方法 | 第108-109页 |
| 9．1．1 实验材料 | 第108页 |
| 9．1．2 实验方法 | 第108-109页 |
| 9．2 实验结果 | 第109-111页 |
| 9．2．1 基础血糖和胰岛素水平 | 第109-110页 |
| 9．2．2 血脂比较 | 第110页 |
| 9．2．3 脂肪率及游离脂肪酸 | 第110-111页 |
| 9．2．4 钳夹试验 | 第111页 |
| 9．3 讨论 | 第111页 |
| 9．4 结论 | 第111-113页 |
| 10 结论与展望 | 第113-115页 |
| 10．1 结论 | 第113-114页 |
| 10．2 问题 | 第114页 |
| 10．3 展望 | 第114-115页 |
| 致谢 | 第115-116页 |
| 参考文献 | 第116-123页 |
| 附录 | 第123页 |
