| 中文摘要 | 第1-7页 |
| 英文摘要 | 第7-13页 |
| 英文缩略词 | 第13-15页 |
| 1 绪论 | 第15-27页 |
| ·引言 | 第15-16页 |
| ·TRAIL分子的国内外研究概况 | 第16-22页 |
| ·TRAIL分子的结构与功能 | 第16-18页 |
| ·TRAIL分子的受体 | 第18-19页 |
| ·TRAIL诱导肿瘤细胞凋亡的机制 | 第19-20页 |
| ·TRAIL与肿瘤治疗 | 第20-22页 |
| ·研究目的与研究方法 | 第22-25页 |
| ·研究目的 | 第22-23页 |
| ·研究方法 | 第23-25页 |
| ·研究内容与实验设计 | 第25-27页 |
| 2 TRAIL胞外区cDNA的克隆 | 第27-45页 |
| ·材料 | 第27-28页 |
| ·细胞系与质粒 | 第27页 |
| ·主要试剂 | 第27页 |
| ·主要仪器 | 第27-28页 |
| ·方法 | 第28-34页 |
| ·HL-60细胞的培养 | 第28页 |
| ·HL-60细胞总RNA的提取 | 第28页 |
| ·RT-PCR反应 | 第28-29页 |
| ·重组质粒pUC18／hTRAIL_(41～281)的构建 | 第29-30页 |
| ·pUC18／hTRAIL_(41～281)质粒转化大肠杆菌 | 第30-31页 |
| ·pUC18／hTRAIL_(41～281)重组子的筛选 | 第31-33页 |
| ·hTRAIL_(41～281)cDNA序列分析 | 第33-34页 |
| ·结果 | 第34-41页 |
| ·RT-PCR结果 | 第34-35页 |
| ·重组pUC18／hTRAIL_(41～281)质粒的构建及鉴定 | 第35-36页 |
| ·重组pUC18／hTRAIL_(41～281)质粒的DNA序列测定 | 第36-38页 |
| ·重组pUC19-hTRAIL_(41～281)质粒的构建及鉴定 | 第38-39页 |
| ·重组pUC19／hTRAIL_(41～281)质粒的cDNA序列测定 | 第39-41页 |
| ·讨论 | 第41-45页 |
| ·PCR反应引物设计 | 第41页 |
| ·RT-PCR反应 | 第41-42页 |
| ·pUC18、pUC19质粒的选择 | 第42页 |
| ·质粒在大肠杆菌中的转化 | 第42-45页 |
| 3 rhsTRAIL_(41～281)的表达及纯化 | 第45-65页 |
| ·材料 | 第45页 |
| ·菌株及质粒 | 第45页 |
| ·主要试剂 | 第45页 |
| ·主要仪器 | 第45页 |
| ·方法 | 第45-51页 |
| ·重组质粒pQE-80L／hTRAIL_(41～281)的构建 | 第45-46页 |
| ·重组质粒pQE-80L／hTRAIL_(41～281)的转化及鉴定 | 第46-47页 |
| ·融合蛋白的诱导表达 | 第47页 |
| ·表达蛋白的SDS-PAGE分析 | 第47页 |
| ·融合蛋白表达方式的鉴定 | 第47页 |
| ·表达蛋白的分离纯化 | 第47-48页 |
| ·目的蛋白的复性 | 第48-49页 |
| ·目的蛋白的鉴定 | 第49-51页 |
| ·结果 | 第51-58页 |
| ·重组质粒pQE-80L／hTRAIL_(41～281)的构建及鉴定 | 第51-53页 |
| ·融合蛋白的诱导表达 | 第53页 |
| ·融合蛋白表达方式的鉴定 | 第53-55页 |
| ·目的蛋白的纯化及复性 | 第55-56页 |
| ·目的蛋白的鉴定 | 第56-58页 |
| ·讨论 | 第58-65页 |
| ·表达系统与表达质粒的选择 | 第58-59页 |
| ·融合蛋白的诱导表达 | 第59-60页 |
| ·表达蛋白的纯化 | 第60-62页 |
| ·目的蛋白的复性 | 第62-63页 |
| ·目的蛋白的鉴定 | 第63-65页 |
| 4 rhsTRAIL_(41～281)分子的生物学活性检测 | 第65-87页 |
| ·材料 | 第65页 |
| ·细胞株 | 第65页 |
| ·主要试剂 | 第65页 |
| ·主要仪器 | 第65页 |
| ·方法 | 第65-69页 |
| ·细胞培养 | 第65页 |
| ·细胞凋亡的形态学特征观察 | 第65-66页 |
| ·台盼蓝排斥试验检测细胞活力 | 第66页 |
| ·细胞毒性试验 | 第66-67页 |
| ·流式细胞仪检测细胞凋亡 | 第67-68页 |
| ·DNA断裂实验 | 第68-69页 |
| ·统计学分析 | 第69页 |
| ·结果 | 第69-82页 |
| ·细胞凋亡的形态学特征观察结果 | 第69页 |
| ·台盼蓝排斥试验结果 | 第69-70页 |
| ·MTT比色试验结果 | 第70-71页 |
| ·流式细胞仪检测结果 | 第71-82页 |
| ·DNA断裂实验结果 | 第82页 |
| ·讨论 | 第82-87页 |
| ·Jurkat细胞凋亡的形态学变化 | 第83页 |
| ·rhsTRAIL_(41～281)作用后细胞活力的检测 | 第83-84页 |
| ·rhsTRAIL_(41～281)诱导Jurkat细胞凋亡的定量检测 | 第84页 |
| ·rhsTRAIL_(41～281)诱导Jurkat细胞凋亡的定性分析 | 第84-85页 |
| ·rhsTRAIL_(41～281)的生物学活性分析 | 第85-87页 |
| 5 全文总结及后续工作建议 | 第87-89页 |
| ·结论 | 第87-88页 |
| ·后续工作建议 | 第88-89页 |
| 致谢 | 第89-91页 |
| 参考文献 | 第91-99页 |
| 附录: 作者在攻读博士学位期间发表的论文目录 | 第99页 |
