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甘蓝型油菜种皮色泽形成机理研究

摘要第1-12页
ABSTRACT第12-17页
第一章 文献综述第17-33页
   ·芸薹属作物的比较基因组学研究第17-19页
     ·芸薹属物种间的进化关系第17-18页
     ·芸薹属作物与模式植物拟南芥的比较基因组学研究第18-19页
   ·甘蓝型黄籽油菜的研究进展第19-26页
     ·甘蓝型黄籽油菜的品质特点第19页
     ·甘蓝型黄籽油菜的种质资源创新和遗传基础研究第19-20页
     ·甘蓝型油菜和拟南芥种皮结构第20-21页
     ·甘蓝型油菜种皮发育过程中相关色素和酶第21页
     ·拟南芥种皮发育及色素合成相关基因的研究第21-26页
   ·植物数量性状的基因定位研究进展第26-31页
     ·植物数量性状的遗传特点第26-27页
     ·分子标记技术及其在芸薹属作物遗传育种上的应用第27-29页
     ·甘蓝型油菜黄籽性状的基因定位研究第29-30页
     ·数量性状的基因的分离与克隆策略第30-31页
   ·油菜转基因的主要方法第31页
   ·本研究的目的意义第31-33页
第二章 黄黑籽甘蓝型油菜种皮中酚类化合物的积累动态规律和基因表达差异分析第33-53页
   ·实验材料第33-34页
     ·材料特征第33页
     ·田间试验设计第33-34页
   ·主要的实验仪器及试剂第34页
   ·实验方法第34-36页
     ·不同时期材料组织切片观察第34-35页
     ·类黄酮样品的制备及LC-MS分析第35页
     ·不同时期材料总RNA的提取及cDNA的获得第35页
     ·甘蓝型油菜类黄酮途径关键基因的表达分析第35-36页
   ·结果与分析第36-47页
     ·亲本材料品质特点第36-37页
     ·甘蓝型油菜不同发育时期种子的甲苯胺蓝(TBO)染色切片观察第37-38页
     ·黄黑籽甘蓝型油菜不同发育时期种皮中黄酮类化合物的合成与积累变化第38-41页
     ·黄黑籽甘蓝型油菜不同发育时期种皮中不溶性原花色素含量变化第41页
     ·种皮色泽与种子皮壳率和种皮色素含量的相关性分析第41-42页
     ·材料总RNA的提取第42-43页
     ·材料cDNA合成与内标调整第43页
     ·甘蓝型油菜苯丙烷生物合成基因序列分析与qRT-PCR引物设计第43-45页
     ·黄黑籽甘蓝型油菜不同发育时期种皮中类黄酮代谢相关基因表达谱分析第45-47页
   ·讨论第47-53页
     ·原花色素类多酚类物质的积累在黄黑籽甘蓝油菜种皮中具有显著差异第47-48页
     ·黄籽甘蓝型油菜种皮中与表儿茶素及其衍生物合成相关的酶和基因功能衰减比黑籽强烈第48页
     ·甘蓝型油菜种皮中不溶性原花色素的积累可能导致了黄黑籽在种皮颜色上的差异第48-49页
     ·甘蓝型油菜种皮类黄酮途径相关基因的差异表达可能是种皮色泽形成的根本原因第49-51页
     ·甘蓝型油菜黄黑籽种皮差异可能的调控机理第51-53页
第三章 甘蓝型油菜遗传图谱的完善及种皮色泽QTL定位分析第53-69页
   ·材料和方法第53-55页
     ·群体材料第53页
     ·主要的实验试剂及仪器第53页
     ·遗传连锁图谱的构建和完善第53-54页
     ·甘蓝型油菜遗传图谱与白菜基因组的共线性分析第54-55页
     ·甘蓝型油菜遗传图谱与拟南芥基因组的共线性分析第55页
     ·种皮色泽性状的考察和QTL分析第55页
   ·结果与分析第55-66页
     ·标记引物的多态性分析第55页
     ·甘蓝型油菜高密度遗传连锁图谱的构建第55-61页
     ·甘蓝型油菜遗传图谱与白菜基因组的共线性分析第61-62页
     ·甘蓝型油菜遗传图谱与拟南芥基因组的共线性分析第62-63页
     ·甘蓝型油菜种皮色泽性状的遗传分析第63-64页
     ·种皮色泽的QTL定位第64页
     ·不同环境种皮色泽相关QTL的比较第64-66页
   ·讨论第66-69页
     ·甘蓝型油菜高密度连锁遗传图谱的可靠性第66-67页
     ·甘蓝型油菜遗传图谱与白菜和拟南芥基因组的共线性分析第67-68页
     ·甘蓝型油菜黄籽性状的遗传特点第68页
     ·甘蓝型油菜黄籽性状QTL定位研究第68-69页
第四章 甘蓝型油菜黄籽性状主效QTL区间分析与候选基因的筛选第69-77页
   ·材料和方法第69-70页
     ·群体材料第69页
     ·田间试验设计第69页
     ·基因组总DNA的提取第69页
     ·甘蓝型油菜种皮色泽主效QTL区间的序列分析和共线性分析第69-70页
     ·甘蓝型油菜色素合成高峰期的差异表达基因的表达谱分析第70页
   ·结果与分析第70-75页
     ·甘蓝型油菜种皮色泽相关基因的遗传分析第70-71页
     ·甘蓝型油菜种皮色泽主效QTL区间共线性分析第71页
     ·甘蓝型油菜种皮色素等类黄酮化合物合成高峰期的相关基因的表达谱分析第71页
     ·甘蓝型油菜种皮色泽候选基因的筛选第71-75页
   ·讨论第75-77页
     ·甘蓝型油菜粒色性状相关基因的遗传特点第75页
     ·甘蓝型油菜粒色性状相关的候选基因筛选第75-77页
第五章 甘蓝型油菜粒色性状候选基因的克隆与功能研究第77-87页
   ·材料和试剂第77页
     ·实验材料第77页
     ·菌株和质粒第77页
     ·主要仪器设备第77页
     ·主要实验试剂第77页
   ·实验方法和步骤第77-80页
     ·RNAi表达载体的构建第77-78页
     ·RNAi表达载体转化甘蓝型油菜黑籽品系第78-79页
     ·超量表达载体的构建第79-80页
   ·结果与分析第80-84页
     ·候选基因RNAi片段的克隆第80-81页
     ·候选基因RNAi表达载体构建与鉴定第81-82页
     ·候选基因重组载体转化根癌农杆菌与鉴定第82页
     ·候选基因超量表达载体片段的克隆第82页
     ·候选基因超量表达载体构建与鉴定第82-83页
     ·候选基因表达载体转化根癌农杆菌与鉴定第83页
     ·转基因植株的获得及分子生物学鉴定第83-84页
     ·转基因植株的性状考察第84页
   ·讨论第84-87页
     ·候选基因在甘蓝型油菜中的克隆分析第84-85页
     ·甘蓝型油菜花序浸染法转化体系探讨第85-87页
第六章 结论第87-91页
   ·主要研究结果第87-89页
   ·主要创新之处第89页
   ·下一步的研究计划第89-91页
参考文献第91-105页
缩略词第105-107页
附录Ⅰ第107-114页
附录Ⅱ第114-159页
附表第159-173页
致谢第173-175页
发表论文及参加课题一览表第175页

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