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半滑舌鳎免疫因子ISG15和Mig1的抗病毒功能研究

致谢第1-5页
摘要第5-7页
Abstract第7-11页
第一章 前言第11-22页
   ·鱼类先天免疫系统第11-12页
   ·鱼类先天免疫与抗病毒第12-19页
     ·宿主对病毒的识别与信号通路的激活第12-14页
     ·干扰素第14-19页
       ·干扰素的分类与命名第14-15页
       ·干扰素诱导的基因(ISGs)第15-16页
       ·ISG156第16-19页
   ·肿大细胞病毒第19-20页
   ·半滑舌鳎简介第20-21页
   ·本研究的目的和意义第21-22页
第二章 半滑舌鳎 cDNA 文库的构建及抗病毒因子的筛选第22-32页
   ·材料和方法第22-28页
     ·半滑舌鳎cDNA文库的构建第22-27页
       ·病原刺激及半滑舌鳎脾、肾组织的收集第22-23页
       ·半滑舌鳎RNA的提取第23-24页
       ·半滑舌鳎cDNA的合成第24-27页
       ·文库构建第27页
     ·半滑舌鳎抗病毒基因的筛选第27-28页
   ·结果与讨论第28-32页
     ·CsISG15 序列分析第28-30页
     ·CsMig1 序列分析第30-32页
第三章 CsISG15、CsMig1 与半滑舌鳎抗病毒免疫的相关性研究第32-59页
   ·材料和方法第32-53页
     ·正常生理条件下CsISG15、CsMig1 在各组织中的表达分布第32-34页
     ·病毒感染后CsISG15、CsMig1 在主要免疫器官中的表达变化第34-36页
     ·病毒感染后CsISG15 在头肾淋巴细胞中的表达变化第36-39页
     ·提高或降低CsISG15、CsMig1 的表达对淋巴细胞抗病毒能力的影响29第39-53页
       ·RNA干扰质粒pRiCsISG15 和过量表达载体pCsMig1 的构建...29第39-48页
       ·质粒转染淋巴细胞第48-49页
       ·RNA干扰和过量表达效果检测第49-51页
       ·RNA干扰和过量表达对淋巴细胞抗病毒感染的影响第51-53页
 3,2 结果和讨论第53-59页
     ·CsISG15、CsMig1 的组织特异性表达第53-54页
     ·病毒感染后CsISG15、CsMig1 在主要免疫器官及免疫细胞中的表达变化第54-56页
     ·RNA干扰降低CsISG15 表达对淋巴细胞抗病毒感染的影响第56-57页
     ·过量表达CsMig1 对淋巴细胞抗病毒感染的影响第57-58页
     ·讨论与小结第58-59页
第四章 CsISG15 重组蛋白的抗病毒功能研究第59-79页
   ·材料和方法第59-73页
     ·野生型重组蛋白rCsISG15 原核表达株的构建第59-61页
     ·突变型重组蛋白rCsISG15M原核表达株的构建第61-62页
     ·重组蛋白rCsISG15、rCsISG15M的诱导表达和纯化第62-64页
     ·大鼠抗rCsISG15 多克隆抗体的制备第64-66页
     ·CsISG15 重组蛋白的功能研究第66-71页
       ·CsISG15 重组蛋白对巨噬细胞活性的影响第66-68页
       ·CsISG15 重组蛋白对淋巴细胞抗病毒感染的影响第68-69页
       ·抗体中和CsISG15 对淋巴细胞抗病毒感染的影响第69-70页
       ·CsISG15 重组蛋白对淋巴细胞中各种免疫因子表达的影响第70-71页
     ·病毒感染后CsISG15 在脾、肾中表达变化的Western Blot验证第71-73页
   ·结果和讨论第73-79页
     ·重组蛋白的诱导表达和纯化第73-74页
     ·抗体效价和特异性检测第74页
     ·重组蛋白对巨噬细胞的激活效应第74-75页
     ·重组蛋白对淋巴细胞抗病毒感染的影响第75页
     ·抗体中和CsISG15 对淋巴细胞抗病毒感染的影响第75-76页
     ·重组蛋白对淋巴细胞免疫相关因子表达的调节第76-77页
     ·病毒刺激头肾、脾中 CsISG15 表达的 Western Blot 验证第77-78页
     ·小结与讨论第78-79页
第五章 CsMig1 上游调控因子的初步研究第79-81页
   ·材料和方法第79-80页
   ·结果和讨论第80-81页
结论第81-82页
参考文献第82-87页
附录 常见溶液的配置第87-91页
个人简历第91页
博士期间发表的文章第91页

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