致谢 | 第1-5页 |
摘要 | 第5-7页 |
Abstract | 第7-11页 |
第一章 前言 | 第11-22页 |
·鱼类先天免疫系统 | 第11-12页 |
·鱼类先天免疫与抗病毒 | 第12-19页 |
·宿主对病毒的识别与信号通路的激活 | 第12-14页 |
·干扰素 | 第14-19页 |
·干扰素的分类与命名 | 第14-15页 |
·干扰素诱导的基因(ISGs) | 第15-16页 |
·ISG156 | 第16-19页 |
·肿大细胞病毒 | 第19-20页 |
·半滑舌鳎简介 | 第20-21页 |
·本研究的目的和意义 | 第21-22页 |
第二章 半滑舌鳎 cDNA 文库的构建及抗病毒因子的筛选 | 第22-32页 |
·材料和方法 | 第22-28页 |
·半滑舌鳎cDNA文库的构建 | 第22-27页 |
·病原刺激及半滑舌鳎脾、肾组织的收集 | 第22-23页 |
·半滑舌鳎RNA的提取 | 第23-24页 |
·半滑舌鳎cDNA的合成 | 第24-27页 |
·文库构建 | 第27页 |
·半滑舌鳎抗病毒基因的筛选 | 第27-28页 |
·结果与讨论 | 第28-32页 |
·CsISG15 序列分析 | 第28-30页 |
·CsMig1 序列分析 | 第30-32页 |
第三章 CsISG15、CsMig1 与半滑舌鳎抗病毒免疫的相关性研究 | 第32-59页 |
·材料和方法 | 第32-53页 |
·正常生理条件下CsISG15、CsMig1 在各组织中的表达分布 | 第32-34页 |
·病毒感染后CsISG15、CsMig1 在主要免疫器官中的表达变化 | 第34-36页 |
·病毒感染后CsISG15 在头肾淋巴细胞中的表达变化 | 第36-39页 |
·提高或降低CsISG15、CsMig1 的表达对淋巴细胞抗病毒能力的影响29 | 第39-53页 |
·RNA干扰质粒pRiCsISG15 和过量表达载体pCsMig1 的构建...29 | 第39-48页 |
·质粒转染淋巴细胞 | 第48-49页 |
·RNA干扰和过量表达效果检测 | 第49-51页 |
·RNA干扰和过量表达对淋巴细胞抗病毒感染的影响 | 第51-53页 |
3,2 结果和讨论 | 第53-59页 |
·CsISG15、CsMig1 的组织特异性表达 | 第53-54页 |
·病毒感染后CsISG15、CsMig1 在主要免疫器官及免疫细胞中的表达变化 | 第54-56页 |
·RNA干扰降低CsISG15 表达对淋巴细胞抗病毒感染的影响 | 第56-57页 |
·过量表达CsMig1 对淋巴细胞抗病毒感染的影响 | 第57-58页 |
·讨论与小结 | 第58-59页 |
第四章 CsISG15 重组蛋白的抗病毒功能研究 | 第59-79页 |
·材料和方法 | 第59-73页 |
·野生型重组蛋白rCsISG15 原核表达株的构建 | 第59-61页 |
·突变型重组蛋白rCsISG15M原核表达株的构建 | 第61-62页 |
·重组蛋白rCsISG15、rCsISG15M的诱导表达和纯化 | 第62-64页 |
·大鼠抗rCsISG15 多克隆抗体的制备 | 第64-66页 |
·CsISG15 重组蛋白的功能研究 | 第66-71页 |
·CsISG15 重组蛋白对巨噬细胞活性的影响 | 第66-68页 |
·CsISG15 重组蛋白对淋巴细胞抗病毒感染的影响 | 第68-69页 |
·抗体中和CsISG15 对淋巴细胞抗病毒感染的影响 | 第69-70页 |
·CsISG15 重组蛋白对淋巴细胞中各种免疫因子表达的影响 | 第70-71页 |
·病毒感染后CsISG15 在脾、肾中表达变化的Western Blot验证 | 第71-73页 |
·结果和讨论 | 第73-79页 |
·重组蛋白的诱导表达和纯化 | 第73-74页 |
·抗体效价和特异性检测 | 第74页 |
·重组蛋白对巨噬细胞的激活效应 | 第74-75页 |
·重组蛋白对淋巴细胞抗病毒感染的影响 | 第75页 |
·抗体中和CsISG15 对淋巴细胞抗病毒感染的影响 | 第75-76页 |
·重组蛋白对淋巴细胞免疫相关因子表达的调节 | 第76-77页 |
·病毒刺激头肾、脾中 CsISG15 表达的 Western Blot 验证 | 第77-78页 |
·小结与讨论 | 第78-79页 |
第五章 CsMig1 上游调控因子的初步研究 | 第79-81页 |
·材料和方法 | 第79-80页 |
·结果和讨论 | 第80-81页 |
结论 | 第81-82页 |
参考文献 | 第82-87页 |
附录 常见溶液的配置 | 第87-91页 |
个人简历 | 第91页 |
博士期间发表的文章 | 第91页 |