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褐牙鲆(Paralichthys olivaceus)和杂交鲆(P.olivaceus♀×P.dentatus♂)幼鱼高温耐受性研究

致谢第1-5页
摘要第5-8页
ABSTRACT第8-16页
第一章 文献综述第16-41页
   ·鱼类对温度的感知和适应第16-21页
     ·鱼类的温度感受器第16-18页
     ·鱼类的体温第18-19页
     ·鱼类对温度适应范围的研究进展第19-21页
   ·鱼类对温度升高的响应的研究进展第21-37页
     ·温度升高对鱼类存活率的影响第21-22页
     ·温度升高对鱼类行为学的影响第22-23页
     ·温度升高对鱼类组织结构的影响第23-26页
     ·温度升高对鱼类氧化应激反应的影响第26-30页
     ·温度升高对鱼类自身免疫反应的影响第30-31页
     ·温度升高对鱼类能量支出的影响第31-32页
     ·热休克蛋白 70 的研究进展第32-37页
   ·鱼类热致死机制的研究进展第37-38页
   ·水产动物耐热遗传育种的研究进展第38-39页
   ·本研究的目的及意义第39-41页
第二章 褐牙鲆对高温的生态适应性观察第41-65页
   ·研究背景第41页
   ·材料与方法第41-49页
     ·实验材料第41-42页
     ·实验设计和取样第42-44页
     ·主要仪器和试剂第44页
       ·主要仪器第44页
       ·主要试剂第44页
     ·不同组织的石蜡切片第44-45页
     ·酶的相对活力测定第45-46页
       ·组织匀浆制备第45页
       ·总蛋白的测定第45页
       ·超氧化物歧化酶(SOD)的测定第45-46页
       ·谷胱甘肽(GSH)的测定第46页
       ·溶菌酶(LZM)的测定第46页
       ·丙酮酸激酶(PK)的测定第46页
     ·实时荧光定量 PCR 检测第46-49页
       ·总 RNA 提取和 cDNA 第一条链的合成第46-47页
       ·实时荧光定量 PCR第47-49页
     ·数据统计第49页
   ·结果第49-60页
     ·褐牙鲆不同组织的组织学变化第49-53页
     ·褐牙鲆各个组织中酶的相对活力变化第53-56页
     ·褐牙鲆各个组织中 hsp70 基因表达量的变化第56-60页
       ·褐牙鲆各个组织在 32℃下 hsp70 基因表达量的变化第56-58页
       ·褐牙鲆在 32℃下不同时间的 hsp70 基因的组织表达差异第58-60页
   ·讨论第60-65页
     ·高温对褐牙鲆肝、肾和鳃的组织结构影响最显著第60-61页
     ·高温对褐牙鲆各个组织酶相对活力的影响第61-63页
     ·不同组织 hsp70 表达量的变化第63-64页
     ·鳃和肝是研究高温胁迫的理想组织第64-65页
第三章 慢性升温对褐牙鲆、杂交鲆组织学、酶学及 hsp70 表达影响的研究第65-81页
   ·研究背景第65页
   ·材料与方法第65-68页
     ·实验材料第65-66页
     ·实验设计和取样第66页
     ·主要仪器和试剂第66-67页
     ·鳃组织的石蜡切片第67页
     ·酶的相对活力测定第67页
       ·过氧化氢酶(CAT)的测定第67页
     ·实时荧光定量 PCR 检测第67页
     ·数据统计第67-68页
   ·结果第68-74页
     ·褐牙鲆、杂交鲆行为学变化及累计存活率分析第68-70页
     ·褐牙鲆、杂交鲆鳃的组织学变化第70-72页
     ·褐牙鲆、杂交鲆 SOD、CAT、LZM 和 PK 的变化第72-73页
     ·褐牙鲆、杂交鲆 hsp70 基因表达量的变化第73-74页
   ·讨论第74-81页
     ·杂交鲆累计存活率高于褐牙鲆第74-75页
     ·慢性升温模式下褐牙鲆的鳃组织受到严重的破坏第75-77页
     ·慢性升温模式下褐牙鲆、杂交鲆酶的相对活力变化差异第77-79页
     ·慢性升温对褐牙鲆和杂交鲆 hsp70 表达量的影响第79-80页
     ·小结第80-81页
第四章 急性升温对褐牙鲆、杂交鲆组织学、酶学及 hsp70 表达影响的研究第81-99页
   ·研究背景第81页
   ·材料与方法第81-83页
     ·实验材料第81-82页
     ·实验设计和取样第82页
     ·主要仪器和试剂第82页
     ·组织切片及投射电镜观察第82-83页
       ·透射电镜样品的处理第82-83页
     ·酶的相对活力测定第83页
     ·实时荧光定量 PCR 检测第83页
     ·数据统计第83页
   ·结果第83-94页
     ·褐牙鲆、杂交鲆行为学变化及累计存活率分析第83-86页
     ·褐牙鲆、杂交鲆鳃的组织学变化第86-89页
     ·褐牙鲆、杂交鲆 SOD、GSH、LZM 和 PK 的变化第89-92页
     ·褐牙鲆、杂交鲆 hsp70 基因表达量的变化第92-94页
   ·讨论第94-99页
     ·急性升温模式下褐牙鲆、杂交鲆行为学及累计存活率变化第94-96页
     ·急性升温模式下褐牙鲆、杂交鲆鳃的结构变化第96页
     ·急性升温模式下褐牙鲆、杂交鲆酶的相对活力变化第96-97页
     ·急性升温模式下褐牙鲆、杂交鲆 hsp70 基因表达量变化第97-98页
     ·小结第98-99页
第五章 29℃下褐牙鲆、大西洋牙鲆和杂交鲆的相关酶活力及 hsp70/hsc70/hsp90 表达量的变化第99-124页
   ·研究背景第99-100页
   ·材料与方法第100-108页
     ·实验材料第100页
     ·实验设计和取样第100页
     ·主要仪器和试剂第100-101页
       ·主要仪器第100-101页
       ·主要试剂第101页
     ·褐牙鲆、大西洋牙鲆及杂交鲆 hsp70/hsp90 基因克隆第101-105页
       ·总 RNA 提取和 cDNA 第一条链合成第101页
       ·hsp70/hsp90 基因部分 cDNA 序列获得第101-103页
       ·hsp70/hsp90 基因 cDNA 全序列获得(RACE)第103-105页
       ·hsp70/hsp90 基因序列分析及进化树构建第105页
     ·酶的相对活力测定第105页
     ·实时荧光定量 PCR 检测第105-107页
       ·总 RNA 提取和 cDNA 第一条链的合成第105页
       ·实时荧光定量 PCR第105-107页
     ·数据统计第107-108页
   ·结果第108-120页
     ·褐牙鲆、大西洋牙鲆、杂交鲆 hsp70/hsp90 基因克隆及序列分析第108-116页
       ·hsp70 基因克隆及序列分析第108-111页
       ·hsp90 基因克隆及序列分析第111-116页
     ·褐牙鲆、大西洋牙鲆及杂交鲆 SOD、GSH、LZM 和 PK 的变化第116-118页
     ·褐牙鲆、大西洋牙鲆及杂交鲆 hsp70/hsc70/hsp90 基因表达量的变化第118-120页
   ·讨论第120-124页
     ·褐牙鲆、大西洋牙鲆和杂交鲆 hsp70/hsp90 基因 cDNA 序列高度保守第120-121页
     ·29℃下褐牙鲆、大西洋牙鲆及杂交鲆酶的相对活力变化第121-122页
     ·29℃下褐牙鲆、大西洋牙鲆及杂交鲆 hsp70/hsc70/hsp90 基因表达量变化第122-123页
     ·小结第123-124页
第六章 结论与展望第124-127页
   ·主要研究结论第124-125页
   ·展望第125-127页
参考文献第127-143页
作者简介第143-144页
博士期间发表和完成的论文第144页

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