目录 | 第1-7页 |
摘要 | 第7-9页 |
ABSTRACT | 第9-12页 |
縮略词表 | 第12-14页 |
第一章 文献综述:兔出血症(RHD)的研究进展 | 第14-40页 |
1 兔病毒性出血症的流行现状 | 第14-16页 |
2 RHDV的分类 | 第16页 |
3 RHDV的形态特征 | 第16-17页 |
4 RHDV病毒基因组结构与功能 | 第17-18页 |
5 结构蛋白 | 第18-20页 |
·VP60 | 第19-20页 |
·VP10 | 第20页 |
6 非结构蛋白 | 第20-21页 |
7 病毒的理化特性 | 第21页 |
8 病毒的血凝性 | 第21-22页 |
9 血清型及进化特点 | 第22页 |
10 RHDV致病性 | 第22-23页 |
11 RHDV的培养 | 第23-24页 |
12 RHDV的实验室检测 | 第24-25页 |
13 不同载体表达兔出血症病毒VP60蛋白的研究进展 | 第25-28页 |
·杆状病毒—昆虫细胞表达系统 | 第26页 |
·大肠杆菌表达系统 | 第26-27页 |
·酵母表达系统 | 第27-28页 |
·植物表达系统 | 第28页 |
·腺病毒表达载体 | 第28页 |
14 兔出血症灭活疫苗研究进展 | 第28-29页 |
15 兔出血症病毒重组病毒疫苗 | 第29-30页 |
16 关于RHDV疫苗存在的问题与展望 | 第30-32页 |
参考文献 | 第32-40页 |
第二章 :四种携带OVA CD8~+T细胞表位重组穿梭载体的构建 | 第40-64页 |
摘要 | 第40-41页 |
1 材料与方法 | 第41-48页 |
·质粒、菌种 | 第41页 |
·主要试剂与工具酶 | 第41页 |
·核酸序列分析 | 第41页 |
·构建图示 | 第41-42页 |
·引物设计 | 第42-43页 |
·目的基因的扩增 | 第43-45页 |
·常规方法PCR构建目的基因G-V-0-579 | 第43页 |
·重叠区扩增基因拼接法(SOE法)构建目的基因G-v-o-502-510、G-v-o-411-417、G-v-o-302-309 | 第43-45页 |
·T/A克隆与鉴定 | 第45-46页 |
·重组转移载体的构建与鉴定 | 第46-47页 |
·穿梭载体Bacmid的构建与鉴定 | 第47-48页 |
2 结果 | 第48-57页 |
·重组穿梭载体Bacmid-V-579的构建 | 第48-50页 |
·重组穿梭载体Bacmid-V-502-510、Bacmid-V-411-417、Bacmid-V-302-309的构建 | 第50-57页 |
3 讨论 | 第57-60页 |
·外源表位插入位置的选择 | 第57-58页 |
·SOE法操作要点 | 第58-60页 |
参考文献 | 第60-62页 |
ABSTRACT | 第62-64页 |
第三章 :四种嵌合蛋白的表达及鉴定 | 第64-80页 |
摘要 | 第64-65页 |
1 材料与方法 | 第65-69页 |
·质粒、菌株与细胞 | 第65页 |
·主要试剂与工具酶 | 第65页 |
·重组杆状病毒的构建和筛选 | 第65-66页 |
·重组病毒的传代与初步鉴定 | 第66-68页 |
·表达产物的鉴定 | 第68-69页 |
2 结果 | 第69-73页 |
·重组蛋白的表达鉴定 | 第69-72页 |
·红细胞凝集特性鉴定 | 第72-73页 |
3 讨论 | 第73-76页 |
·嵌合蛋白的红细胞凝集特性 | 第73页 |
·免疫荧光和western blot | 第73-74页 |
·RHDV VLPs的构建 | 第74-76页 |
参考文献 | 第76-79页 |
ABSTRACT | 第79-80页 |
第四章 嵌合蛋白的电镜观察和免疫原性研究 | 第80-94页 |
摘要 | 第80页 |
1 材料与方法 | 第80-83页 |
·试剂、培养基及重组病毒 | 第80-81页 |
·实验动物 | 第81页 |
·嵌合蛋白的电镜观察 | 第81页 |
·嵌合蛋白免疫原性的研究 | 第81-83页 |
2 结果 | 第83-86页 |
·电镜观察 | 第83-84页 |
·小鼠血清中VP60抗体水平的检测 | 第84-85页 |
·小鼠血清中TNF-α的含量检测 | 第85-86页 |
3 讨论 | 第86-89页 |
·电镜观察重组蛋白VLPs的形成 | 第86-87页 |
·插入位点与体液免疫应答相关性 | 第87页 |
·VLPs与细胞免疫应答相关性 | 第87-89页 |
参考文献 | 第89-92页 |
ABSTRACT | 第92-94页 |
全文总结 | 第94-96页 |
附录 | 第96-100页 |
致谢 | 第100页 |