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名贵中药冬虫夏草品种及蛋白组分研究

摘要第1-5页
Abstract第5-13页
缩略词第13-14页
前言第14-17页
 1、立题依据第14-15页
 2、研究内容第15-17页
第一章 冬虫夏草品种研究第17-29页
 1、冬虫夏草菌基原品种考证第17-20页
   ·冬虫夏草菌无性型第17-18页
   ·冬虫夏草菌有性型第18-20页
 2、冬虫夏草虫体基原品种考证第20-21页
 3、中药冬虫夏草的命名第21-25页
   ·药材正名(中文名)第21-22页
   ·药材拉丁名第22-23页
   ·基原中文名与拉丁名第23-24页
   ·对药典定义中药冬虫夏草的建议第24-25页
 4、小结第25-26页
 附表第26-29页
第二章 冬虫夏草蛋白质2-DE方法优化与特征性蛋白的鉴定第29-60页
 1. 材料第29-30页
   ·药材第29-30页
   ·试剂第30页
   ·仪器第30页
 2. 方法第30-38页
   ·冬虫夏草蛋白质2-DE方法学优化第31-33页
     ·冬虫夏草蛋白质2-DE实验流程第31页
     ·实验步骤第31-33页
     ·蛋白质回收第33页
   ·冬虫夏草蛋白质含量测定第33-38页
     ·Bradford法第33-35页
     ·BCA法第35-36页
     ·Lowry法第36-38页
   ·SDS-PAGE第38页
   ·数据处理第38页
 3. 结果第38-56页
   ·2-DE方法学优化结果第38-42页
     ·蛋白上样量优化第38-40页
     ·水化方式选择第40-41页
     ·盐桥的影响第41-42页
   ·蛋白含量测定方法选择第42-44页
     ·Bradford法测定结果第42-43页
     ·BCA法测定结果第43页
     ·Lowry法测定结果第43-44页
   ·冬虫夏草蛋白2-DE重现性研究第44-47页
     ·同一产地同一批次冬虫夏草2-DE图谱分析第44-46页
     ·同一产地不同批次冬虫夏草2-DE图谱分析第46-47页
   ·不同产地冬虫夏草蛋白多样性分析第47-52页
     ·蛋白含量测定结果第47-48页
     ·SDS-PAGE图谱分析第48页
     ·蛋白2-DE表达图谱分析第48-52页
   ·正品虫草特征性蛋白分析第52-56页
     ·不同产地冬虫夏草共有蛋白分析第52-53页
     ·特征性蛋白寻找第53-55页
     ·特征性蛋白MALDI-TOF-MS结构鉴定第55-56页
 4. 小结与讨论第56-60页
   ·冬虫夏草蛋白2-DE方法学优化第56-57页
   ·冬虫夏草蛋白含量测定第57-58页
   ·正品冬虫夏草特征性蛋白与质量评价第58-60页
第三章 冬虫夏草免疫活性蛋白研究第60-103页
 1. 免疫活性检测细胞方法学研究第60-69页
   ·材料第60-61页
     ·试剂第60-61页
     ·仪器第61页
     ·实验动物第61页
   ·方法第61-63页
     ·小鼠腹腔巨噬细胞的提取、分离与纯化第61-62页
     ·试验分组及处理第62页
     ·巨噬细胞活力测定第62-63页
       ·细胞形态观察第62页
       ·细胞成活率检测第62-63页
       ·细胞吞噬功能测定(中性红法)第63页
     ·巨噬细胞分泌因子IL-1,IL-2,IL-12,TNF-α检测第63页
   ·结果第63-69页
     ·巨噬细胞活力测定结果第63-65页
       ·细胞形态观察第63-64页
       ·细胞存活率结果第64页
       ·细胞吞噬能力测定第64-65页
     ·巨噬细胞分泌因子条件考察结果第65-69页
       ·不同浓度LPS对巨噬细胞分泌因子的影响第65-66页
       ·不同给药时间对分泌因子的影响第66-67页
       ·不同给药停止时间对分泌因子的影响第67-68页
       ·不同分泌时间对分泌因子的影响第68-69页
   ·小结第69页
 2. 冬虫夏草免疫活性蛋白提取分离研究第69-101页
   ·材料第69-70页
     ·药材第69页
     ·试剂第69-70页
     ·仪器第70页
   ·方法第70-71页
     ·蛋白质含量测定第70页
     ·蛋白质提取第70页
     ·SDS-PAGE第70-71页
     ·免疫活性测定第71页
     ·数据处理第71页
   ·结果第71-101页
     ·冬虫夏草蛋白质提取方法优化第71-78页
     ·蛋白质稳定性研究第78-83页
       ·保存溶液选择第79-81页
       ·保存温度考察第81-82页
       ·保存时间考察第82-83页
     ·活性蛋白分离第83-101页
       ·超滤分离第83-95页
       ·葡聚糖凝胶初步柱层析分离第95-101页
 3. 小结与讨论第101-103页
   ·冬虫夏草蛋白稳定性第101-102页
   ·冬虫夏草蛋白免疫活性第102-103页
全文结论第103-106页
附图第106-109页
参考文献第109-117页
文献综述第117-129页
 参考文献第125-129页
致谢第129-130页
在读期间公开发表的学术论文、专著及科研成果第130-131页

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