| 摘要 | 第1-5页 |
| ABSTRACT | 第5-8页 |
| 一.文献综述 | 第8-15页 |
| 1. OsDPR的研究进展 | 第8-9页 |
| ·研究背景 | 第8页 |
| ·OsDPR的结构特点及功能分析 | 第8-9页 |
| ·OsDPR通过CyclinD2.1抑制转基因烟草生长 | 第9页 |
| 2. HoARH1——人类肿瘤抑制基因 | 第9-11页 |
| ·ARH1基因的结构特点 | 第9-10页 |
| ·ARH1能够调控细胞周期并抑制细胞增殖 | 第10-11页 |
| 3. COP Ⅱ转运机制 | 第11-13页 |
| ·COP Ⅱ的分泌途径 | 第11页 |
| ·COP Ⅱ的募集和装配 | 第11-13页 |
| 4. OsSec24与烟草根毛H~+分泌相关 | 第13页 |
| 5. H~+-ATPase相关背景 | 第13-14页 |
| ·分泌酸性物质与H~+-ATPase相关 | 第13-14页 |
| ·植物中的H~+-ATPase | 第14页 |
| 6. 本文研究的目的和意义 | 第14-15页 |
| 二.材料及试剂 | 第15-18页 |
| 1. 实验材料 | 第15页 |
| ·植物材料 | 第15页 |
| ·实验菌株 | 第15页 |
| ·质粒载体 | 第15页 |
| 2. 常用配方 | 第15-17页 |
| ·水稻悬浮细胞的培养—OsNT培养基 | 第15-16页 |
| ·水稻原生质体制备及其瞬时转化所用试剂 | 第16-17页 |
| ·酶解buffer的配制 | 第16页 |
| ·W5的配制 | 第16页 |
| ·mmg的配制 | 第16页 |
| ·PEG/Ca的配制 | 第16页 |
| ·Incubation Solution的配制 | 第16-17页 |
| 3. 合成引物及测序 | 第17页 |
| 4. 实验仪器 | 第17-18页 |
| 三.实验方法 | 第18-24页 |
| 1. 水稻种子的播种 | 第18页 |
| 2. 植物表达载体pBI221-OsDPR::eGFP的构建 | 第18-19页 |
| 3. 水稻原生质体的制备及瞬时转化 | 第19页 |
| 4. Hela细胞表达载体HA-OsDPR的构建 | 第19页 |
| 5. 重组质粒转染Hela细胞 | 第19-20页 |
| 6. 酵母细胞表达载体pYES-OsPMA2::mcherry的构建 | 第20-21页 |
| ·酵母细胞表达载体pYES::mcherry的构建 | 第20页 |
| ·酵母细胞表达载体pYES-OsPMA2::mcherry的构建 | 第20-21页 |
| 7. 酵母细胞表达载体lac181-OsSec24::GFP的构建 | 第21页 |
| 8. 酵母的重组质粒转化 | 第21-22页 |
| 9. 非损伤测氢离子流速的方法 | 第22页 |
| 10. 植物表达载体pBI221-OsSec24::eGFP的构建 | 第22页 |
| 11. 农杆菌GV3101感受态的制备及转化 | 第22-23页 |
| 12. 水稻悬浮细胞的永久转化 | 第23-24页 |
| 四.实验结果与分析 | 第24-39页 |
| 1. OsDPR转基因水稻的表型分析 | 第24-25页 |
| ·OsDPR转基因水稻的萌发观察 | 第24页 |
| ·OsDPR转基因水稻植株的表型分析 | 第24-25页 |
| 2. OsDPR的亚细胞定位 | 第25-28页 |
| ·植物表达载体pBI221-OsDPR::eGFP的构建 | 第25-26页 |
| ·细胞核染料的使用方法的探究 | 第26-27页 |
| ·OsDPR的亚细胞定位 | 第27-28页 |
| 3. 做抗癌的尝试 | 第28-29页 |
| ·Hela细胞表达载体HA-OsDPR的构建 | 第28页 |
| ·重组质粒转入Hela细胞并检测 | 第28-29页 |
| 4. 酵母工作 | 第29-34页 |
| ·酵母细胞表达载体pYES-OsPMA2::mcherry的构建 | 第29-31页 |
| ·酵母细胞表达载体lac181-OsSec24::GFP的构建 | 第31-32页 |
| ·转基因酵母的定位观察 | 第32页 |
| ·转基因和野生型酵母泌氢量对比 | 第32-34页 |
| 5. 水稻原生质体的瞬时转化 | 第34-37页 |
| ·植物表达载体pBI221-OsSec24::eGFP的构建 | 第34-35页 |
| ·双基因瞬转的水稻原生质体的定位观察 | 第35-37页 |
| ·双基因瞬转水稻原生质体非损伤 | 第37页 |
| 6. 非损伤测转基因水稻根毛H~+流速 | 第37-39页 |
| 五.讨论与展望 | 第39-43页 |
| 1. 推测OsDPR是一种细胞分裂的转录抑制因子 | 第39-41页 |
| 2. OsSec24在缺铁条件下上调表达可能是植物相应缺铁不良环境的一种方式 | 第41-43页 |
| 参考文献 | 第43-46页 |
| 致谢 | 第46-48页 |
| 附录 | 第48-68页 |
