| 第一部分 乙酰化修饰在二型干扰素受体介导的信号通路中作用的研究 I | 第1-9页 |
| 摘要 | 第7-8页 |
| Abstract | 第8-9页 |
| 第二部分 Survivin 调控的溶瘤腺病毒表达 IL-24 蛋白对人肝癌细胞 PLC 作用机制的探究 III | 第9-14页 |
| 摘要 | 第9-10页 |
| Abstract | 第10-14页 |
| 第一部分 乙酰化修饰在二型干扰素受体介导的信号通路中作用的研究 | 第14-74页 |
| 缩略语 | 第15-17页 |
| 第一章 蛋白质乙酰化修饰的研究进展 | 第17-27页 |
| 1 蛋白质乙酰化修饰研究概况 | 第17-18页 |
| 2 乙酰基转移酶和去乙酰化酶 | 第18-20页 |
| ·乙酰基转移酶 | 第18-19页 |
| ·去乙酰化酶 | 第19-20页 |
| 3 干扰素受体（IFNR）的乙酰化 | 第20-23页 |
| ·干扰素受体的分类 | 第20-22页 |
| ·一型干扰素受体乙酰化研究进展 | 第22页 |
| ·二型干扰素受体乙酰化研究进展 | 第22-23页 |
| 4 JAK-STAT 途径乙酰化修饰的研究进展 | 第23-26页 |
| ·STATs 家族及其分类 | 第23-25页 |
| ·STAT1 的乙酰化 | 第25-26页 |
| 5 乙酰化修饰的研究意义及其展望 | 第26-27页 |
| 第二章 实验的目的意义及方案设计 | 第27-29页 |
| 1 实验的目的与意义 | 第27-28页 |
| 2 实验方案 | 第28-29页 |
| 第三章 IFNgR 克隆的构建 | 第29-38页 |
| 1 材料与试剂 | 第29-31页 |
| ·材料 | 第29页 |
| ·试剂 | 第29-30页 |
| ·主要试剂的配制 | 第30页 |
| ·引物的设计与合成 | 第30-31页 |
| 2 方法 | 第31-35页 |
| ·6cMyc-IFNgR1FL 和 6cMyc-IFNgR2FL 质粒的构建 | 第31-34页 |
| ·6cMyc-IFNgR2CD 质粒的构建 | 第34-35页 |
| 3 结果 | 第35-38页 |
| ·PCR 结果 | 第35-36页 |
| ·双酶切和测序结果 | 第36-38页 |
| 第四章 突变体的构建和校正 | 第38-47页 |
| 1 材料与试剂 | 第38-40页 |
| ·材料 | 第38-39页 |
| ·试剂 | 第39页 |
| ·主要试剂的配制 | 第39页 |
| ·引物的设计与合成 | 第39-40页 |
| 2 方法 | 第40-44页 |
| ·对 IFNgR1CD 及其突变体和截断体 290 突变的校正 | 第40-42页 |
| ·构建 6cMyc-IFNgR1CD K271,272R 突变体及校正 IFNgR1CD K285R 上 290 位的突变 | 第42-43页 |
| ·构建带 Flag 标签的 STAT1 及其突变体 | 第43-44页 |
| 3 结果 | 第44-47页 |
| ·校正后的 IFNgR1CD 及其突变体和截断体双酶切鉴定和测序鉴定结果 | 第44-45页 |
| ·Flag-STAT1 及其突变体构建结果 | 第45-47页 |
| 第五章 IFNgR 的乙酰化修饰 | 第47-57页 |
| 1 材料与试剂 | 第47-51页 |
| ·材料 | 第47页 |
| ·试剂 | 第47-48页 |
| ·试剂的配制 | 第48-51页 |
| 2 方法 | 第51-53页 |
| ·细胞的培养和转染 | 第51-52页 |
| ·IP 实验 | 第52页 |
| ·Western blot 分析 | 第52-53页 |
| ·考马斯亮蓝 R-250 染色实验 | 第53页 |
| 3 结果 | 第53-57页 |
| ·IFNgR1FL、IFNgR1CD、IFNgR2FL 与 IFNgR2CD 的乙酰化修饰 | 第53-54页 |
| ·准备做质谱的 IFNgR1FL 与 IFNgR2FL 样品的考马斯亮蓝染色结果与质谱初步结果 | 第54-55页 |
| ·IFNgR1CD 突变体对其乙酰化的影响 | 第55-57页 |
| 第六章 STAT1 的乙酰化修饰 | 第57-67页 |
| 1 材料与试剂 | 第58-59页 |
| ·材料 | 第58页 |
| ·试剂 | 第58-59页 |
| ·试剂的配制 | 第59页 |
| 2 方法 | 第59-62页 |
| ·细胞的培养和转染 | 第59-61页 |
| ·内源 STAT1 乙酰化检测实验 | 第61-62页 |
| ·IP 实验方法 | 第62页 |
| ·Western blot 分析 | 第62页 |
| ·荧光素酶报告基因活性检测 | 第62页 |
| 3 结果 | 第62-67页 |
| ·IFN-γ 诱导下 Hela 细胞中内源 STAT1 的乙酰化 | 第62-63页 |
| ·STAT1 及其突变体乙酰化水平的检查 | 第63页 |
| ·STAT1 突变体对其形成二聚体的影响 | 第63-64页 |
| ·IFN-γ 诱导下 STAT1 突变体转录活性的差异 | 第64-67页 |
| 第七章 讨论 | 第67-69页 |
| 参考文献 | 第69-74页 |
| 第二部分 Survivin 调控的溶瘤腺病毒表达 IL-24 蛋白对人肝癌细胞 PLC 作用机制的探究 | 第74-88页 |
| 缩略语 | 第75-76页 |
| 第一章 引言 | 第76-78页 |
| 第二章 材料与方法 | 第78-80页 |
| 1 材料 | 第78页 |
| 2 方法 | 第78-80页 |
| ·细胞培养 | 第78页 |
| ·流式细胞术检测细胞周期 | 第78-79页 |
| ·Western blot 检测 CHOP 表达与 Caspase 剪切水平 | 第79页 |
| ·Western blot 检测 SCOS3 表达与 STAT3、p38 MAPK 磷酸化水平 | 第79-80页 |
| 第三章 结果 | 第80-84页 |
| 1 流式细胞术检测细胞周期增殖活性 | 第80-81页 |
| 2 Western blot 检测 CHOP 表达与 Caspase12 剪切水平 | 第81-82页 |
| 3 Western blot 检测 SCOS3 表达与 STAT3 磷酸化水平 | 第82页 |
| 4 Western blot 检测 p38 MAPK 磷酸化水平 | 第82-84页 |
| 第四章 讨论 | 第84-86页 |
| 参考文献 | 第86-88页 |
| 致谢 | 第88页 |
| 发表文章 | 第88页 |
