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贻贝肽与贻贝多糖对衰老的干预作用及其机制

摘要第1-8页
ABSTRACT第8-19页
第一章 绪论第19-37页
   ·贻贝概述第19-22页
     ·贻贝的种类及其分布第19页
     ·中国贻贝的种类及其分布第19-20页
     ·贻贝的营养与功能第20-21页
     ·贻贝的生产与加工第21-22页
   ·贻贝肽和贻贝多糖的研究进展第22-27页
     ·贻贝肽第22-25页
     ·贻贝多糖第25-27页
   ·衰老及抗衰老的研究进展第27-35页
     ·衰老机制第28-31页
     ·食物干预衰老的研究进展第31-35页
   ·立题依据和意义第35页
   ·主要研究内容第35-37页
第二章 贻贝肽的制备第37-55页
   ·前言第37-38页
   ·试验材料及仪器设备第38-39页
     ·试验材料与试剂第38页
     ·主要试验仪器及设备第38-39页
   ·试验方法第39-46页
     ·贻贝粉基本成分分析第39页
     ·可溶性蛋白质含量的测定第39页
     ·贻贝蛋白质组成测定第39-40页
     ·贻贝蛋白pI的测定第40-41页
     ·贻贝蛋白的制备第41-42页
     ·肽得率的测定第42页
     ·水解度(DH)测定第42页
     ·对羟自由基清除率的测定第42-43页
     ·对二苯基苦味酰基苯肼自由基(DPPH)清除率测定第43页
     ·各种蛋白酶活力的测定第43页
     ·贻贝蛋白的单酶反应第43-45页
     ·贻贝蛋白的复合酶解第45页
     ·贻贝蛋白酶解物的超滤分级第45-46页
     ·氨基酸组成测定第46页
     ·统计学分析第46页
   ·结果与讨论第46-54页
     ·贻贝粉的基本组成分第46页
     ·贻贝粉的蛋白质组成第46-47页
     ·pH值对贻贝蛋白提取率的影响第47-48页
     ·几种酶活力测定的结果第48页
     ·最佳用酶的筛选第48-50页
     ·单酶水解条件的优化第50-51页
     ·复合酶水解工艺的确定第51-52页
     ·贻贝蛋白复合酶酶解液的分级第52-53页
     ·贻贝蛋白酶解物的氨基酸评价第53-54页
   ·本章小结第54-55页
第三章 贻贝多糖的制备第55-67页
   ·前言第55-56页
   ·试验材料及仪器设备第56-57页
     ·试验材料及试剂第56页
     ·试验仪器及设备第56-57页
   ·试验方法第57-61页
     ·总糖含量的测定第57页
     ·热水浸提多糖方法第57-58页
     ·粗多糖的分离与纯化第58页
     ·粗多糖的杂质分析第58页
     ·特征颜色反应第58-59页
     ·硫酸基含量测定第59页
     ·糖醛酸含量测定第59-60页
     ·糖胺聚糖含量测定第60页
     ·单糖组成分析第60-61页
   ·结果与讨论第61-66页
     ·热水浸提条件的优化第61-62页
     ·粗多糖两种提取方法比较第62页
     ·粗多糖的物理性状第62-63页
     ·粗多糖的定性分析第63页
     ·粗多糖的纯度分析第63-64页
     ·粗多糖的糖醛酸含量第64页
     ·粗多糖的硫酸基含量第64-65页
     ·多糖的糖胺聚糖含量第65页
     ·多糖的单糖组成第65-66页
   ·本章小结第66-67页
第四章 贻贝肽、多糖对细胞衰老的延缓作用第67-87页
   ·前言第67-68页
   ·试验材料及仪器设备第68-69页
     ·细胞系第68页
     ·试验材料第68页
     ·主要试剂第68-69页
     ·试验仪器及设备第69页
   ·试验方法第69-74页
     ·细胞培养第69-70页
     ·诱导细胞早衰的H_2O_2浓度确定第70页
     ·贻贝肽、多糖培养液的配制第70页
     ·细胞分组与处理第70页
     ·细胞活力检测第70-71页
     ·细胞死亡率的测定第71页
     ·细胞还原型谷胱甘肽(GSH)含量测定第71页
     ·衰老相关的β-半乳糖苷酶活性(SA-β-Gal)测定第71-72页
     ·衰老相关异染色质中心(SAHF)检测第72页
     ·细胞周期分析第72-73页
     ·线粒体膜电位(△Ψ)的检测第73页
     ·Real Time-PCR检测细胞Nampt、Prx1、Sirt1 mRNA的基因表达第73-74页
     ·统计分析第74页
   ·结果与讨论第74-86页
     ·诱导MRC-5细胞早衰的H_2O_2的浓度确定第74-75页
     ·衰老相关的多种指标检测结果第75-83页
     ·贻贝肽、多糖对细胞内的GSH含量的影响第83-84页
     ·贻贝肽、多糖对MRC-5细胞Prx1、Nampt、Sirt1 mRNA表达的影响第84-86页
   ·本章小结第86-87页
第五章 贻贝肽、多糖对果蝇生命活力与寿命的影响第87-97页
   ·前言第87-88页
   ·试验材料与仪器设备第88页
     ·试验材料第88页
     ·试验仪器及设备第88页
   ·试验方法第88-90页
     ·果蝇培养基配制第88页
     ·果蝇寿命试验第88-89页
     ·果蝇性活力测定第89页
     ·丙二醛(MDA)含量的测定第89-90页
     ·超氧化物歧化酶(SOD)含量测定第90页
     ·统计分析第90页
   ·结果与讨论第90-95页
     ·对果蝇寿命的影响第90-92页
     ·对果蝇性活力的影响第92-93页
     ·果蝇体内超氧化物歧化酶(SOD)活力的测定结果第93-94页
     ·对果蝇体内丙二醛(MDA)含量的影响第94-95页
   ·本章小结第95-97页
第六章 贻贝肽、多糖对衰老小鼠脑退行性变化的干预作用第97-115页
   ·前言第97-98页
   ·试验材料与仪器设备第98页
     ·试验材料及试剂第98页
     ·主要仪器与设备第98页
   ·试验方法第98-102页
     ·试验流程第98-99页
     ·试验动物分组第99页
       ·试验动物第99页
       ·动物分组第99页
     ·Morris水迷宫第99-100页
     ·避暗穿梭试验第100页
     ·旋转棒试验第100-101页
     ·海马CA1区神经元密度检测第101页
     ·脑组织匀浆制备第101页
     ·乳酸含量测定第101页
     ·NO含量和NOS活性测定第101页
     ·Western blot检测脑组织中Akt、PI3K的蛋白表达水平第101-102页
     ·统计方法第102页
   ·结果与讨论第102-113页
     ·Morris水迷宫试验第102-104页
     ·避暗穿梭试验第104-106页
     ·旋转棒试验第106-107页
     ·对衰老小鼠脑组织海马CA1区神经元的影响第107-109页
     ·对乳酸浓度的影响第109页
     ·对脑组织NO及NOS含量影响第109-111页
     ·对Akt、PI3K的蛋白表达的影响第111-113页
   ·本章小结第113-115页
第七章 贻贝肽、多糖对衰老小鼠糖脂代谢的影响第115-129页
   ·前言第115-116页
   ·试验材料与设备第116-117页
     ·试验材料及试剂第116页
     ·试验仪器及设备第116-117页
   ·试验方法第117-118页
     ·试验动物第117页
     ·动物分组及干预处理第117页
     ·血样本的留取第117页
     ·组织匀浆液的制备第117页
     ·氧化损伤指标的测定第117页
     ·肝脏、脂肪组织中PPARγ、PPARα的蛋白表达水平的检测第117-118页
     ·数据处理与统计方法第118页
   ·结果与讨论第118-127页
     ·对D-半乳糖致衰老小鼠毛发表观特征的影响第118页
     ·对小鼠体重的影响第118-120页
     ·对小鼠脏器系数的影响第120-121页
     ·对小鼠血糖及血脂含量的影响第121-123页
     ·对小鼠肝组织中糖原、游离脂肪酸含量的影响第123-124页
     ·对小鼠肝肾组织氧化损伤的影响第124-126页
     ·对小鼠肝脏、脂肪中PPARα、PPARγ蛋白表达的影响第126-127页
   ·本章小结第127-129页
第八章 结论与展望第129-131页
   ·主要结论第129页
   ·工作展望第129-131页
创新点第131-133页
参考文献第133-147页
致谢第147-148页
攻读博士学位期间发表论文及专利第148页

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