摘要 | 第1-7页 |
Abstract | 第7-11页 |
目录 | 第11-14页 |
引言 | 第14-15页 |
第一章 聚乙烯亚胺与壳聚糖作为基因载体中的应用 | 第15-20页 |
·聚乙烯亚胺在基因载体中的应用 | 第15-17页 |
·聚乙烯亚胺的特性 | 第15-16页 |
·聚乙烯亚胺衍生物 | 第16-17页 |
·聚乙二醇(polyethylene glycol, PEG)对聚乙烯亚胺的修饰 | 第16-17页 |
·靶向基团对聚乙烯亚胺的修饰 | 第17页 |
·提高聚乙烯亚胺的生物降解性 | 第17页 |
·壳聚糖在基因载体的应用 | 第17-19页 |
·壳聚糖特性 | 第17-18页 |
·修饰壳聚糖的亲水基团 | 第18页 |
·提高壳聚糖的转染效率 | 第18-19页 |
·结语 | 第19-20页 |
第二章 OTMCS-PEI-R13 的合成与表征 | 第20-28页 |
·材料与仪器 | 第20-21页 |
·材料 | 第20-21页 |
·仪器 | 第21页 |
·实验方法 | 第21-23页 |
·双功能肽R13 的构建 | 第21页 |
·双功能肽R13 与Hela细胞、B16 细胞体外亲和能力的测定 | 第21-22页 |
·OTMCS-PEI-R13 的合成 | 第22-23页 |
·两亲性壳聚糖OTMCS的合成 | 第22页 |
·OTMCS-PEI的合成 | 第22-23页 |
·OTMCS-PEI-R13 的合成 | 第23页 |
·结果与讨论 | 第23-26页 |
·双功能肽R13 的构建及亲和能力 | 第23-24页 |
·OTMCS-PEI的合成 | 第24-26页 |
·两亲性壳聚糖OTMCS的FT-IR与1H-NMR分析 | 第24-25页 |
·OTMCS-PEI的合成 | 第25-26页 |
·OTMCS-PEI-R13 的合成 | 第26页 |
·结论 | 第26-28页 |
第三章 OTMCS-PEI和OTMCS-PEI-R13 理化性质 | 第28-44页 |
·试剂与仪器 | 第28-29页 |
·实验方法 | 第29-33页 |
·OTMCS-PEI-R13 水解能力考查 | 第29页 |
·OTMCS-PEI-R13 缓冲能力的考查 | 第29页 |
·OTMCS-PEI-R13/DNA复合物形态观察 | 第29-30页 |
·粒径 | 第30页 |
·表面电位 | 第30页 |
·琼脂糖凝胶电泳阻滞分析 | 第30-31页 |
·抗DNA酶降解的能力 | 第31页 |
·抗血清能力 | 第31-32页 |
·抗肝素钠解离能力 | 第32页 |
·细胞毒性 | 第32-33页 |
·结果与讨论 | 第33-42页 |
·OTMCS-PEI-R13 水解能力考查 | 第33-34页 |
·OTMCS-PEI-R13 缓冲能力考查 | 第34页 |
·OTMCS-PEI-R13/DNA形态观察 | 第34-35页 |
·粒径 | 第35-36页 |
·表面电位 | 第36-37页 |
·凝胶电泳阻滞分析 | 第37-38页 |
·抗DNA酶降解的能力 | 第38-39页 |
·抗血清能力 | 第39-40页 |
·抗肝素钠解离能力 | 第40-41页 |
·细胞毒性 | 第41-42页 |
·结论 | 第42-44页 |
第四章 OTMCS-PEI及OTMCS-PEI-R13 的体内外转染 | 第44-59页 |
·试剂及仪器 | 第44-45页 |
·实验方法 | 第45-48页 |
·质粒的抽提与纯化 | 第45-46页 |
·绿色荧光蛋白报告基因体外转染 | 第46页 |
·虫荧光素酶报告基因体外转染~ | 第46-47页 |
·虫荧光素酶报告基因体内转染~ | 第47页 |
·OTMCS-PEI-R13/DNA复合物细胞内定位 | 第47-48页 |
·结果与讨论 | 第48-57页 |
·质粒的抽提与纯化 | 第48页 |
·绿色荧光蛋白报告基因体外转染 | 第48-51页 |
·虫荧光素酶报告基因Hela细胞体外转染 | 第51-53页 |
·虫荧光素酶报告基因B16 细胞体外转染 | 第53-54页 |
·虫荧光素酶报告基因体内转染 | 第54页 |
·激光倒置显微镜观察复合物入胞情况 | 第54-57页 |
·结论 | 第57-59页 |
全文总结 | 第59-61页 |
参考文献 | 第61-67页 |
致谢 | 第67-68页 |
硕士期间研究成果与奖励 | 第68-69页 |