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禾谷孢囊线虫酸性磷酸酯酶基因的克隆及功能初步分析

摘要第1-7页
Abstract第7-11页
第一章 引言第11-18页
   ·植物寄生性线虫及孢囊线虫简介第11页
   ·禾谷孢囊线虫及其危害第11-14页
     ·禾谷孢囊线虫的分类地位和形态特征第11-12页
     ·禾谷孢囊线虫的发生分布与危害状况第12-14页
   ·植物线虫寄生相关基因及酸性磷酸酯酶的研究进展第14-15页
     ·植物线虫寄生相关基因研究进展第14页
     ·酸性磷酸酯酶的研究进展第14-15页
   ·植物内寄生性线虫 RNA 干扰机制第15-17页
     ·RNAi 作用机制第15-16页
     ·dsRNA 导入机制第16页
     ·影响 RNA 干扰效果的因素第16-17页
   ·研究目的及意义第17-18页
     ·目的第17页
     ·研究意义第17-18页
第二章 禾谷孢囊线虫酸性磷酸酯酶基因(Ha-acp1)全长克隆第18-38页
   ·试验材料和方法第18-31页
     ·线虫材料第18页
     ·试剂及仪器第18页
     ·酸性磷酸酯酶 cDNA 的扩增第18-26页
     ·酸性磷酸酯酶基因 gDNA 全长的扩增第26-28页
     ·序列生物信息学分析第28页
     ·酸性磷酸酯酶基因的 Southern 杂交第28-31页
   ·结果与分析第31-37页
     ·禾谷孢囊线虫酸性磷酸酯酶基因 Ha-acp1 cDNA 全长克隆第31-33页
     ·基因序列分析和系统发育树分析第33-34页
     ·禾谷孢囊线虫酸性磷酸酯酶基因 Ha-acp1 gDNA 全长序列第34-35页
     ·酸性磷酸酯酶基因 Ha-acp1 southern blot 分析第35-37页
   ·讨论与小结第37-38页
第三章 酸性磷酸酯酶基因原位杂交实验第38-43页
   ·实验材料与仪器第38页
     ·材料第38页
     ·主要试剂第38页
     ·仪器第38页
   ·实验方法第38-41页
     ·溶液配制第38页
     ·探针合成第38-39页
     ·线虫固定第39-40页
     ·原位杂交的过程第40-41页
   ·结果分析第41-42页
     ·探针标记第41页
     ·实验结果第41-42页
   ·本章小结第42-43页
第四章 RNAi 介导 Ha-acp1 基因功能验证第43-55页
   ·材料方法第43-49页
     ·材料第43页
     ·主要试剂第43页
     ·主要仪器第43页
     ·Ha-acp1 基因 dsRNA 干扰片段的合成第43-46页
     ·禾谷孢囊线虫体外 RNA 干扰实验第46-47页
     ·RT-PCR 检测 Ha-acp1 基因转录水平第47-49页
     ·体外 RNA 干扰处理后线虫侵染实验第49页
     ·干扰后表型分析第49页
   ·结果与分析第49-53页
     ·Ha-acp1 基因 dsRNA 合成第49-50页
     ·浸泡体系优化结果第50页
     ·禾谷孢囊线虫侵染前二龄幼虫取食效果第50-51页
     ·干扰后 Ha-acp1 基因转录水平检测第51-52页
     ·体外 RNA 干扰后线虫侵染表型分析第52-53页
   ·小结与讨论第53-55页
第五章 全文结论第55-57页
参考文献第57-63页
致谢第63-64页
作者简历第64页

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