摘要 | 第1-7页 |
Abstract | 第7-11页 |
第一章 引言 | 第11-18页 |
·植物寄生性线虫及孢囊线虫简介 | 第11页 |
·禾谷孢囊线虫及其危害 | 第11-14页 |
·禾谷孢囊线虫的分类地位和形态特征 | 第11-12页 |
·禾谷孢囊线虫的发生分布与危害状况 | 第12-14页 |
·植物线虫寄生相关基因及酸性磷酸酯酶的研究进展 | 第14-15页 |
·植物线虫寄生相关基因研究进展 | 第14页 |
·酸性磷酸酯酶的研究进展 | 第14-15页 |
·植物内寄生性线虫 RNA 干扰机制 | 第15-17页 |
·RNAi 作用机制 | 第15-16页 |
·dsRNA 导入机制 | 第16页 |
·影响 RNA 干扰效果的因素 | 第16-17页 |
·研究目的及意义 | 第17-18页 |
·目的 | 第17页 |
·研究意义 | 第17-18页 |
第二章 禾谷孢囊线虫酸性磷酸酯酶基因(Ha-acp1)全长克隆 | 第18-38页 |
·试验材料和方法 | 第18-31页 |
·线虫材料 | 第18页 |
·试剂及仪器 | 第18页 |
·酸性磷酸酯酶 cDNA 的扩增 | 第18-26页 |
·酸性磷酸酯酶基因 gDNA 全长的扩增 | 第26-28页 |
·序列生物信息学分析 | 第28页 |
·酸性磷酸酯酶基因的 Southern 杂交 | 第28-31页 |
·结果与分析 | 第31-37页 |
·禾谷孢囊线虫酸性磷酸酯酶基因 Ha-acp1 cDNA 全长克隆 | 第31-33页 |
·基因序列分析和系统发育树分析 | 第33-34页 |
·禾谷孢囊线虫酸性磷酸酯酶基因 Ha-acp1 gDNA 全长序列 | 第34-35页 |
·酸性磷酸酯酶基因 Ha-acp1 southern blot 分析 | 第35-37页 |
·讨论与小结 | 第37-38页 |
第三章 酸性磷酸酯酶基因原位杂交实验 | 第38-43页 |
·实验材料与仪器 | 第38页 |
·材料 | 第38页 |
·主要试剂 | 第38页 |
·仪器 | 第38页 |
·实验方法 | 第38-41页 |
·溶液配制 | 第38页 |
·探针合成 | 第38-39页 |
·线虫固定 | 第39-40页 |
·原位杂交的过程 | 第40-41页 |
·结果分析 | 第41-42页 |
·探针标记 | 第41页 |
·实验结果 | 第41-42页 |
·本章小结 | 第42-43页 |
第四章 RNAi 介导 Ha-acp1 基因功能验证 | 第43-55页 |
·材料方法 | 第43-49页 |
·材料 | 第43页 |
·主要试剂 | 第43页 |
·主要仪器 | 第43页 |
·Ha-acp1 基因 dsRNA 干扰片段的合成 | 第43-46页 |
·禾谷孢囊线虫体外 RNA 干扰实验 | 第46-47页 |
·RT-PCR 检测 Ha-acp1 基因转录水平 | 第47-49页 |
·体外 RNA 干扰处理后线虫侵染实验 | 第49页 |
·干扰后表型分析 | 第49页 |
·结果与分析 | 第49-53页 |
·Ha-acp1 基因 dsRNA 合成 | 第49-50页 |
·浸泡体系优化结果 | 第50页 |
·禾谷孢囊线虫侵染前二龄幼虫取食效果 | 第50-51页 |
·干扰后 Ha-acp1 基因转录水平检测 | 第51-52页 |
·体外 RNA 干扰后线虫侵染表型分析 | 第52-53页 |
·小结与讨论 | 第53-55页 |
第五章 全文结论 | 第55-57页 |
参考文献 | 第57-63页 |
致谢 | 第63-64页 |
作者简历 | 第64页 |