摘要 | 第1-10页 |
Abstract | 第10-12页 |
缩略词表 | 第12-13页 |
第一章 前言 | 第13-29页 |
1 课题提出 | 第13-14页 |
2 植物的盐害效应 | 第14-17页 |
·水分代谢 | 第14-15页 |
·植株生长 | 第15页 |
·盐离子毒害 | 第15-16页 |
·营养失衡 | 第16-17页 |
3 植物对盐胁迫的适应机制 | 第17-23页 |
·盐胁迫信号转导 | 第17-19页 |
·Ca~(2+)信号途径 | 第17-18页 |
·ABA信号途径 | 第18页 |
·MAPK级联反应途径 | 第18-19页 |
·渗透调节物质的合成 | 第19-21页 |
·糖醇类 | 第20页 |
·氨基酸及其衍生物 | 第20-21页 |
·活性氧的清除 | 第21页 |
·离子平衡重建 | 第21-23页 |
·根部吸收 | 第22页 |
·木质部装载和韧皮部回流 | 第22页 |
·离子区域化 | 第22-23页 |
4 离子转运蛋白与植物耐盐性 | 第23-27页 |
·Na~+转运蛋白 | 第24-25页 |
·K~+转运蛋白 | 第25-26页 |
·Cl~-转运蛋白 | 第26页 |
·阳离子氯离子共转运蛋白 | 第26-27页 |
·其它类型的离子转运蛋白 | 第27页 |
5 本研究的内容、目的和意义 | 第27-29页 |
第二章 不同柑橘品种对NaCl胁迫的生理响应 | 第29-42页 |
1 引言 | 第29页 |
2 材料与方法 | 第29-32页 |
·试验材料和盆栽方法 | 第29-30页 |
·试验设计、采样和测定 | 第30页 |
·相关生理指标的测定 | 第30-31页 |
·气体交换参数测定 | 第30页 |
·元素含量测定 | 第30-31页 |
·基因表达的半定量分析 | 第31-32页 |
·植物组织RNA的提取和cDNA合成 | 第31页 |
·半定量RT-PCR分析 | 第31-32页 |
·统计分析 | 第32页 |
3 结果与分析 | 第32-37页 |
·NaCl对植株生长的影响 | 第32-34页 |
·NaCl对钠和氯离子含量的影响 | 第34-35页 |
·NaCl对其他主要元素含量的影响 | 第35-37页 |
·NaCl对叶片元素含量的影响 | 第35-36页 |
·NaCl对根部元素含量的影响 | 第36-37页 |
·CitCLC、CitCCC、CitSLAC和CitICln基因的表达分析 | 第37页 |
4 讨论 | 第37-41页 |
·不同品种对NaCl胁迫的响应存在差异 | 第37-38页 |
·钠和氯的分布与柑橘耐盐性 | 第38-40页 |
·其他元素的分布与柑橘耐盐性 | 第40-41页 |
·氯离子转运相关基因对盐胁迫的响应 | 第41页 |
5 小结 | 第41-42页 |
第三章 枳PtrCLC基因的克隆与功能鉴定 | 第42-60页 |
1 前言 | 第42-43页 |
2 材料和方法 | 第43-49页 |
·植物材料和生长条件 | 第43页 |
·菌株与质粒载体 | 第43页 |
·枳PtrCLC基因的克隆 | 第43-44页 |
·基因序列分析 | 第44-45页 |
·基因表达分析 | 第45页 |
·拟南芥遗传转化 | 第45-48页 |
·载体构建 | 第45-47页 |
·农杆菌制备 | 第47页 |
·拟南芥的转化 | 第47页 |
·转基因拟南芥的抗性筛选 | 第47页 |
·转基因拟南芥的PCR检测 | 第47-48页 |
·转基因拟南芥的RT-PCR检测 | 第48页 |
·纯合体转基因拟南芥的筛选 | 第48页 |
·转基因拟南芥的耐盐性分析 | 第48-49页 |
·电导率和叶绿素测定 | 第49页 |
·元素含量测定 | 第49页 |
·统计分析 | 第49页 |
3 结果与分析 | 第49-57页 |
·PtrCLC的克隆和序列分析 | 第49-52页 |
·PtrCLC的表达模式分析 | 第52-53页 |
·拟南芥转化及转基因植株的鉴定 | 第53-54页 |
·WT、clcc突变体和OE种子的萌芽率比较 | 第54-55页 |
·盐胁迫对WT、clcc和OE拟南芥幼苗生长的影响 | 第55-56页 |
·不同株系氯、钠和钾含量比较 | 第56-57页 |
4 讨论 | 第57-59页 |
·PtrCLC具有CLC基因家族的基本特征 | 第57-58页 |
·PtrCLC能响应多种非生物胁迫 | 第58页 |
·过表达PtrCLC增加转基因拟南芥的耐盐性 | 第58-59页 |
5 小结 | 第59-60页 |
第四章 枳CLC基因家族的克隆与表达分析 | 第60-71页 |
1 前言 | 第60-61页 |
2 材料和方法 | 第61-62页 |
·植物材料和生长条件 | 第61页 |
·枳中CLC基因家族成员的克隆 | 第61-62页 |
·序列分析 | 第62页 |
·基因表达分析 | 第62页 |
3 结果与分析 | 第62-68页 |
·柑橘基因组中的CLC基因 | 第62-63页 |
·多序列比对和系统进化分析 | 第63-66页 |
·PtrCLCs在不同组织中的表达 | 第66-67页 |
·PtrCLCs在不同非生物胁迫下的表达 | 第67-68页 |
4 讨论 | 第68-70页 |
·CLC基因家族在柑橘中的分布和序列特征 | 第68页 |
·PtrCLCs在枳各个组织中普遍存在 | 第68-69页 |
·PtrCLCs对胁迫的响应不同 | 第69-70页 |
5 小结 | 第70-71页 |
第五章 枳PtrCCC基因的克隆与功能鉴定 | 第71-82页 |
1 前言 | 第71页 |
2 材料和方法 | 第71-74页 |
·植物材料和生长条件 | 第71-72页 |
·枳PtrCCC基因的克隆 | 第72页 |
·基因表达分析 | 第72页 |
·烟草的遗传转化 | 第72-73页 |
·载体构建 | 第72页 |
·试剂配制和培养基配方 | 第72-73页 |
·烟草转化过程 | 第73页 |
·转化烟草的鉴定 | 第73页 |
·转基因烟草的盐胁迫处理 | 第73页 |
·统计分析 | 第73-74页 |
3 结果与分析 | 第74-80页 |
·PtrCCC的克隆和序列分析 | 第74-76页 |
·PtrCCC的表达模式分析 | 第76页 |
·转基因烟草的获得 | 第76-78页 |
·烟草的遗传转化和抗性筛选 | 第76-77页 |
·转基因烟草的分子鉴定 | 第77-78页 |
·不同盐分对野生型(WT)转基因(OE)烟草的影响 | 第78-80页 |
4 讨论 | 第80-81页 |
·PtrCCC属于KCC类转运蛋白 | 第80页 |
·PtrCCC的表达特点 | 第80-81页 |
·转PtrCCC基因提高烟草的耐盐表现 | 第81页 |
5 小结 | 第81-82页 |
参考文献 | 第82-103页 |
附录 | 第103-104页 |
附录Ⅰ 课题资助 | 第103页 |
附录Ⅱ 相关论文 | 第103-104页 |
致谢 | 第104页 |