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茶树抗坏血酸生物合成相关酶基因的克隆与表达分析

摘要第1-6页
ABSTRACT第6-8页
目录第8-10页
第一章 文献综述第10-18页
   ·引言第10-11页
   ·植物体内 AsA 的合成途径第11-13页
     ·L-半乳糖途径(L-galactose pathway)第11-12页
     ·古洛糖途径(L-glucose pathway)第12页
     ·D-半乳糖醛酸途径(galacturonic acid pathway)第12页
     ·肌醇途径(Myo-Inositol pathway)第12-13页
   ·抗坏血酸的氧化还原途径第13页
   ·AsA 生物合成相关酶基因调控的研究进展第13-15页
   ·积累 AsA 的调控措施第15-16页
   ·茶叶中 AsA 研究进展第16-17页
   ·研究内容、目的与意义第17-18页
第二章 茶树 AsA 生物合成相关酶基因的克隆第18-40页
   ·实验材料第18页
   ·实验方法第18-26页
     ·总 RNA 提取和检测第18-19页
     ·cDNA 第一链的合成第19页
     ·特异片段克隆第19-22页
     ·cDNA 的 3’/5’RACE 反应第22-24页
     ·cDNA 全长扩增第24-26页
     ·序列的生物信息学分析第26页
   ·结果与分析第26-37页
     ·总 RNA 的提取第26-27页
     ·基因克隆与序列分析第27-37页
   ·讨论第37-40页
     ·特异片段扩增及其产物的测序第37-38页
     ·RACE-PCR 反应第38页
     ·生物信息学分析第38-40页
第三章 实时定量 PCR第40-45页
   ·实验材料与试剂第40页
   ·实验方法第40页
   ·结果与分析第40-43页
     ·茶树新梢中 GMP 基因的表达量分析第41-42页
     ·茶树新梢中 GME 基因的表达量分析第42页
     ·茶树新梢中 GDH 基因的表达量分析第42-43页
   ·讨论第43-45页
第四章 原核表达第45-52页
   ·材料与试剂第45页
   ·实验方法第45-48页
     ·原核表达载体的构建第45-46页
     ·E.coli BL21(DE3)原核表达的诱导第46-47页
     ·聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)第47-48页
   ·结果与分析第48-50页
     ·茶树 GMP 基因的原核表达与 SDS-PAGE 分析第48-49页
     ·茶树 GME 基因的原核表达与 SDS-PAGE 分析第49页
     ·茶树 GDH 基因的原核表达与 SDS-PAGE 分析第49-50页
   ·讨论第50-52页
第五章 结论第52-53页
参考文献第53-58页
附录第58-63页
致谢第63-64页
作者简介第64页

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