摘要 | 第1-6页 |
Abstract | 第6-18页 |
第1章 前言 | 第18-35页 |
·植物抗旱分子机理研究进展 | 第18-24页 |
·渗透调节 | 第18-21页 |
·脯氨酸 | 第19页 |
·海藻糖 | 第19-20页 |
·甜菜碱 | 第20-21页 |
·Lea蛋白、AQP和DHNs | 第21-22页 |
·Lea蛋白 | 第21页 |
·AQP | 第21页 |
·DHNs | 第21-22页 |
·受ABA等内源激素调节基因 | 第22-24页 |
·植物复水机制研究进展 | 第24-26页 |
·基因差异表达研究方法技术原理及其应用 | 第26-29页 |
·cDNA-AFLP差异显示分析技术原理、特点及其研究进展 | 第26-28页 |
·cDNA-SCoT差异显示分析技术原理、特点及其研究进展 | 第28-29页 |
·甘蔗抗旱分子机理研究进展 | 第29-33页 |
·本研究的立项依据及意义 | 第33-35页 |
第2章 甘蔗伸长期对水分胁迫的生理响应 | 第35-51页 |
·试验材料与方法 | 第35-41页 |
·供试材料和材料种植 | 第35-36页 |
·试验处理 | 第36页 |
·试验测定的指标和方法 | 第36-40页 |
·土壤相对含水量测定 | 第36页 |
·脯氨酸(Pro)含量测定 | 第36页 |
·△~1-吡咯啉-5-羧酸合成酶(P5CS)活性测定测定 | 第36-37页 |
·脯氨酸脱氢酶(ProDH)活性测定 | 第37页 |
·过氧化物酶(POD)活性测定 | 第37页 |
·过氧化氢酶(CAT)活性测定 | 第37-38页 |
·超氧化物歧化酶(SOD)活性测定 | 第38页 |
·超氧阴离子(O_2~-)含量测定 | 第38页 |
·脱落酸(ABA)含量测定 | 第38-39页 |
·丙二醛(MDA)含量测定 | 第39页 |
·谷胱甘肽还原酶(GSH-R)活性测定 | 第39页 |
·可溶性糖含量测定 | 第39-40页 |
·可溶性蛋白质含量测定 | 第40页 |
·多胺氧化酶(PAO)活性测定 | 第40页 |
·数据处理 | 第40-41页 |
·结果与分析 | 第41-49页 |
·土壤相对含水量 | 第41页 |
·甘蔗叶片MDA含量变化 | 第41-42页 |
·甘蔗叶片可溶性糖含量变化 | 第42-43页 |
·甘蔗叶片可溶性蛋白质含量变化 | 第43页 |
·甘蔗叶片O_2~-含量变化 | 第43-44页 |
·甘蔗叶片POD活性变化 | 第44-45页 |
·甘蔗叶片CAT活性变化 | 第45页 |
·甘蔗叶片SOD活性变化 | 第45-46页 |
·甘蔗叶片GSH-R活性变化 | 第46页 |
·甘蔗叶片脯氨酸含量变化 | 第46-47页 |
·甘蔗叶片P5CS活性变化 | 第47页 |
·甘蔗叶片ProDH活性变化 | 第47-48页 |
·甘蔗叶片ABA含量变化 | 第48-49页 |
·甘蔗叶片PAO活性变化 | 第49页 |
·小结 | 第49-51页 |
·渗透调节物质 | 第50页 |
·膜损伤及保护系统 | 第50页 |
·内源激素及相关酶 | 第50-51页 |
第3章 甘蔗伸长期水分胁迫诱导相关基因差异表达分析 | 第51-101页 |
·甘蔗干旱和干旱后复水基因cDNA-AFLP差异显示分析 | 第52-70页 |
·材料种植和处理 | 第52页 |
·方法 | 第52-61页 |
·总RNA的提取 | 第52-53页 |
·cDNA第一链合成 | 第53页 |
·cDNA第二链的合成 | 第53页 |
·双链cDNA纯化 | 第53页 |
·双链cDNA酶切反应 | 第53-54页 |
·接头退火及连接 | 第54-55页 |
·预扩增 | 第55页 |
·选择性扩增 | 第55-56页 |
·选择性扩增产物电泳检测 | 第56-57页 |
·差异片段的回收、再扩增、再回收 | 第57-58页 |
·反向Northern印迹杂交验证 | 第58-59页 |
·差异片段克隆 | 第59页 |
·质粒抽提 | 第59-60页 |
·测序 | 第60页 |
·序列比较及基因功能分析 | 第60-61页 |
·cDNA-AFLP分离水分胁迫诱导表达基因结果与分析 | 第61-70页 |
·总RNA提取和第一链cDNA合成 | 第61页 |
·甘蔗叶片干旱和复水诱导基因表达分谱分析 | 第61-62页 |
·差异片段回收及反向Northern印迹杂交验证 | 第62-64页 |
·部分验证为阳性TDFs的克隆及核苷酸序列分析 | 第64-67页 |
·受干旱和干旱后复水诱导表达基因功能分析和功能类群 | 第67-70页 |
·甘蔗干旱和干旱后复水基因cDNA-SCoT差异显示分析 | 第70-100页 |
·材料种植和处理 | 第70页 |
·方法 | 第70-74页 |
·总RNA的提取 | 第70页 |
·cDNA第一链合成 | 第70页 |
·SCoT引物设计及SCoT-PCR扩增反应体系、反应程序 | 第70-72页 |
·电泳检测 | 第72-73页 |
·差异片段的回收、再扩增、再回收 | 第73页 |
·反向Northern印迹杂交验证 | 第73页 |
·差异片段克隆 | 第73页 |
·质粒抽提 | 第73页 |
·测序 | 第73页 |
·序列比较及基因功能分析 | 第73-74页 |
·cDNA-SCoT分离水分胁迫诱导表达基因结果与分析 | 第74-100页 |
·总RNA提取和cDNA第一链合成 | 第74页 |
·甘蔗叶片水分胁迫下基因差异表达谱分析 | 第74-75页 |
·差异片段回收及反向Northern印迹杂交验证 | 第75-76页 |
·部分验证为阳性差异片段的克隆、核苷酸序列分析和基因功能推测分析 | 第76-97页 |
·受干旱和干旱后复水诱导表达基因功能类群 | 第97-100页 |
·小结 | 第100-101页 |
·cDNA-AFLP差异显示表达分析 | 第100页 |
·cDNA-SCoT差异显示表达分析 | 第100-101页 |
第4章 水分胁迫诱导基因片段的半定量RT-PCR表达分析 | 第101-109页 |
·材料和方法 | 第102-105页 |
·材料种植和处理 | 第102页 |
·方法 | 第102-105页 |
·总RNA提取 | 第102页 |
·cDNA第一链合成 | 第102页 |
·半定量RT-PCR | 第102-105页 |
·结果与分析 | 第105-108页 |
·小结 | 第108-109页 |
第5章 甘蔗水分胁迫诱导表达基因全长CDNA克隆与结构分析 | 第109-145页 |
·材料和方法 | 第109-111页 |
·材料种植 | 第109页 |
·甘蔗叶片总RNA提取 | 第109页 |
·甘蔗cDNA第一链的合成 | 第109页 |
·引物设计、合成 | 第109-110页 |
·目的基因片段回收纯化 | 第110页 |
·目的基因克隆 | 第110页 |
·质粒抽提 | 第110页 |
·测序 | 第110页 |
·基因序列的生物学信息分析软件及网站 | 第110-111页 |
·结果与分析 | 第111-144页 |
·总RNA提取及cDNA第一链合成 | 第111-112页 |
·甘蔗Sc-atpI基因克隆及其序列分析 | 第112-118页 |
·甘蔗Sc-atpI基因的RT-PCR扩增 | 第112-113页 |
·甘蔗Sc-atpI基因核苷酸序列分析 | 第113-114页 |
·甘蔗Sc-atpI基因编码的氨基酸序列结构分析 | 第114-117页 |
·甘蔗Sc-atpI基因编码氨基酸序列同源比对以及系统进化树分析 | 第117-118页 |
·甘蔗Sc-SUT1基因克隆及其序列分析 | 第118-124页 |
·甘蔗Sc-SUT1基因的RT-PCR扩增 | 第118页 |
·甘蔗Sc-SUT1基因核苷酸序列分析 | 第118页 |
·甘蔗Sc-SUT1基因编码氨基酸序列保守区分析 | 第118-120页 |
·甘蔗Sc-SUT1基因编码氨基酸序列同源比对以及系统进化树分析 | 第120-124页 |
·甘蔗Sc-SAMDC3基因克隆及其序列分析 | 第124-132页 |
·甘蔗Sc-SAMDC3基因的RT-PCR扩增 | 第124-125页 |
·甘蔗Sc-SAMDC3基因核苷酸序列分析 | 第125-126页 |
·甘蔗Sc-SAMDC3基因编码氨基酸序列保守区分析 | 第126-127页 |
·甘蔗Sc-SAMDC3基因编码氨基酸序列同源比对以及系统进化树分析 | 第127-132页 |
·甘蔗Sc-Tuba3基因克隆及其序列分析 | 第132-138页 |
·甘蔗Sc-Tuba3基因RT-PCR扩增 | 第132-133页 |
·甘蔗Sc-Tuba3基因核苷酸序列分析 | 第133-134页 |
·甘蔗Sc-Tuba3基因编码氨基酸序列保守区分析 | 第134-136页 |
·甘蔗Sc-Tuba3基因编码氨基酸序列同源比对以及系统进化树分析 | 第136-138页 |
·甘蔗Sc-HSP70基因克隆及其序列分析 | 第138-144页 |
·甘蔗Sc-HSP70基因RT-PCR扩增 | 第138-139页 |
·甘蔗Sc-HSP70基因核苷酸序列分析 | 第139-140页 |
·甘蔗Sc-HSP70基因编码氨基酸序列保守区分析 | 第140-144页 |
·甘蔗Sc-HSP70基因编码氨基酸序列同源比对以及系统进化树分析 | 第144页 |
·小结 | 第144-145页 |
第6章 讨论与结论 | 第145-156页 |
·全文讨论 | 第145-154页 |
·GT11对水分胁迫的生理响应机制 | 第145-147页 |
·渗透调节物质 | 第145-146页 |
·膜损伤及保护系统 | 第146页 |
·内源激素及相关酶 | 第146-147页 |
·水分胁迫诱导基因差异表达分析 | 第147-151页 |
·cDNA-AFLP差异显示分析 | 第147-148页 |
·cDNA-SCoT差异显示分析 | 第148页 |
·两种差异表达方法比较 | 第148-149页 |
·两种基因差异显示方法结果比较 | 第149页 |
·甘蔗水分胁迫相关基因筛选和分离 | 第149-151页 |
·基因Semi-QRT-PCR表达分析 | 第151-153页 |
·抗旱类基因 | 第151-152页 |
·恢复生长调节类基因 | 第152页 |
·双重功能类基因 | 第152页 |
·基因定量表达方法 | 第152-153页 |
·基因克隆与结构分析 | 第153-154页 |
·全文结论 | 第154-155页 |
·论文创新点 | 第155页 |
·问题与展望 | 第155-156页 |
致谢 | 第156-157页 |
参考文献 | 第157-175页 |
附录 | 第175页 |