目录 | 第1-9页 |
摘要 | 第9-11页 |
Abstract | 第11-13页 |
第一章 文献综述 | 第13-22页 |
1 福建地方山羊品种简介 | 第13-14页 |
·闽东山羊 | 第13页 |
·戴云山羊 | 第13页 |
·福清山羊 | 第13-14页 |
2 繁殖性状相关基因的研究进展 | 第14-18页 |
·BMP15 基因 | 第14-15页 |
·BMP15 概述 | 第14页 |
·BMP15 的研究进展 | 第14-15页 |
·GDF9 基因 | 第15-16页 |
·GDF9 概述 | 第15页 |
·GDF9 的研究进展 | 第15-16页 |
·LH-β基因 | 第16页 |
·LH-β概述 | 第16页 |
·LH-β的研究进展 | 第16页 |
·GnRHR 基因 | 第16-17页 |
·GnRHR 概述 | 第16-17页 |
·GnRHR 的研究进展 | 第17页 |
·BMPR-IB 基因 | 第17-18页 |
·BMPR-IB 概述 | 第17-18页 |
·BMPR-IB 的研究进展 | 第18页 |
3 均一化全长 cDNA 文库的构建 | 第18-20页 |
·全长 CDNA 文库的构建方法 | 第19页 |
·全长 CDNA 文库的均一化策略 | 第19-20页 |
·均一化全长 CDNA 文库的研究进展 | 第20页 |
4 分子标记技术简介 | 第20-21页 |
5 本研究的目的意义 | 第21-22页 |
第二章 试验研究 | 第22-57页 |
试验一:福清山羊卵巢均一化全长 cDNA 文库的构建 | 第22-32页 |
1 材料 | 第22页 |
·试验材料 | 第22页 |
·主要仪器设备 | 第22页 |
·主要试剂 | 第22页 |
2 试验方法 | 第22-26页 |
·提取总 RNA | 第22-23页 |
·逆转录反应 | 第23页 |
·CDNA 第二链的合成 | 第23-24页 |
·产物的纯化 | 第24页 |
·DSN 均一化处理 | 第24-25页 |
·均一化 CDNA 的扩增及纯化 | 第25页 |
·均一化 CDNA 扩增产物的酶切与回收 | 第25页 |
·酶切产物与载体的连接 | 第25页 |
·连接产物的电转化 | 第25-26页 |
·插入片段大小的检测 | 第26页 |
·均一化全长 CDNA 文库的测序与 EST 分析 | 第26页 |
3 结果与分析 | 第26-30页 |
·总 RNA 的提取 | 第26-27页 |
·双链 CDNA 的合成 | 第27页 |
·DSN 酶均一化处理效果比较 | 第27-28页 |
·插入片段检测 | 第28-29页 |
·ESTS 序列分析与功能注释 | 第29-30页 |
4 讨论 | 第30-32页 |
·文库构建方法 | 第30-31页 |
·ESTS 结果 | 第31-32页 |
试验二:福建地方山羊繁殖性状相关基因多态性分析 | 第32-57页 |
1 材料 | 第32页 |
·试验动物 | 第32页 |
·主要仪器设备 | 第32页 |
·主要试剂及其配制 | 第32页 |
·工具酶及主要试剂 | 第32页 |
2 试验方法 | 第32-37页 |
·基因组 DNA 提取 | 第32-33页 |
·DNA 纯度检测 | 第33页 |
·琼脂糖凝胶电泳检测 | 第33页 |
·紫外分光光度计检测 | 第33页 |
·目的片段 PCR 扩增 | 第33-35页 |
·引物设计 | 第33-34页 |
·PCR 反应条件优化 | 第34-35页 |
·PCR 目的片段检测 | 第35页 |
·基因多态性检测 | 第35-37页 |
·PCR-SSCP 单链构象多态性检测 | 第35-36页 |
·PCR-RFLP 限制性片段长度多态性检测 | 第36-37页 |
·数据处理及分析 | 第37页 |
3 结果与分析 | 第37-53页 |
·基因组 DNA 提取效果 | 第37-38页 |
·BMP15 基因 SNPS 检测与繁殖性状关联分析 | 第38-43页 |
·片段 A 的 SNPs 检测结果 | 第38-39页 |
·片段 A 的多态性与繁殖性状关联分析 | 第39-40页 |
·片段 B 的 SNPs 检测结果 | 第40-41页 |
·片段 B 的多态性与繁殖性状关联分析 | 第41-43页 |
·GDF9 基因 SNPS 检测与繁殖性状关联分析 | 第43-45页 |
·片段 C 的 SNPs 检测结果 | 第43-44页 |
·片段 C 的多态性与繁殖性状关联分析 | 第44-45页 |
·LH-β基因 SNPS 检测与繁殖性状关联分析 | 第45-47页 |
·片段 D 的 SNPs 检测结果 | 第45-46页 |
·片段 D 的多态性与繁殖性状关联分析 | 第46-47页 |
·GnRHR 基因 SNPS 检测与繁殖性状关联分析 | 第47-50页 |
·片段 E 的 SNPs 检测结果 | 第47-49页 |
·片段 E 的多态性与繁殖性状关联分析 | 第49-50页 |
·BMPR-IB 基因 SNPS 检测与繁殖性状关联分析 | 第50-53页 |
·片段 F 的 SNPs 检测结果 | 第50-51页 |
·片段 F 的多态性与繁殖性状关联分析 | 第51-53页 |
4 讨论 | 第53-57页 |
·PCR 扩增的影响因素 | 第53页 |
·PCR-SSCP 的影响因素 | 第53-54页 |
·PCR-RFLP 的影响因素 | 第54-55页 |
·基因多态性分析结果 | 第55-57页 |
·BMP15 基因多态性分析结果 | 第55页 |
·GDF9 基因多态性分析结果 | 第55页 |
·LH-β基因多态性分析结果 | 第55-56页 |
·GnRHR 基因多态性分析结果 | 第56页 |
·BMPR-IB 基因多态性分析结果 | 第56-57页 |
第三章 结论 | 第57-59页 |
参考文献 | 第59-67页 |
附录 | 第67-74页 |
致谢 | 第74页 |