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福建山羊卵巢cDNA文库构建及产羔性状相关基因多态性分析

目录第1-9页
摘要第9-11页
Abstract第11-13页
第一章 文献综述第13-22页
 1 福建地方山羊品种简介第13-14页
   ·闽东山羊第13页
   ·戴云山羊第13页
   ·福清山羊第13-14页
 2 繁殖性状相关基因的研究进展第14-18页
   ·BMP15 基因第14-15页
     ·BMP15 概述第14页
     ·BMP15 的研究进展第14-15页
   ·GDF9 基因第15-16页
     ·GDF9 概述第15页
     ·GDF9 的研究进展第15-16页
   ·LH-β基因第16页
     ·LH-β概述第16页
     ·LH-β的研究进展第16页
   ·GnRHR 基因第16-17页
     ·GnRHR 概述第16-17页
     ·GnRHR 的研究进展第17页
   ·BMPR-IB 基因第17-18页
     ·BMPR-IB 概述第17-18页
     ·BMPR-IB 的研究进展第18页
 3 均一化全长 cDNA 文库的构建第18-20页
   ·全长 CDNA 文库的构建方法第19页
   ·全长 CDNA 文库的均一化策略第19-20页
   ·均一化全长 CDNA 文库的研究进展第20页
 4 分子标记技术简介第20-21页
 5 本研究的目的意义第21-22页
第二章 试验研究第22-57页
 试验一:福清山羊卵巢均一化全长 cDNA 文库的构建第22-32页
  1 材料第22页
   ·试验材料第22页
   ·主要仪器设备第22页
   ·主要试剂第22页
  2 试验方法第22-26页
   ·提取总 RNA第22-23页
   ·逆转录反应第23页
   ·CDNA 第二链的合成第23-24页
   ·产物的纯化第24页
   ·DSN 均一化处理第24-25页
   ·均一化 CDNA 的扩增及纯化第25页
   ·均一化 CDNA 扩增产物的酶切与回收第25页
   ·酶切产物与载体的连接第25页
   ·连接产物的电转化第25-26页
   ·插入片段大小的检测第26页
   ·均一化全长 CDNA 文库的测序与 EST 分析第26页
  3 结果与分析第26-30页
   ·总 RNA 的提取第26-27页
   ·双链 CDNA 的合成第27页
   ·DSN 酶均一化处理效果比较第27-28页
   ·插入片段检测第28-29页
   ·ESTS 序列分析与功能注释第29-30页
  4 讨论第30-32页
   ·文库构建方法第30-31页
   ·ESTS 结果第31-32页
 试验二:福建地方山羊繁殖性状相关基因多态性分析第32-57页
  1 材料第32页
   ·试验动物第32页
   ·主要仪器设备第32页
   ·主要试剂及其配制第32页
   ·工具酶及主要试剂第32页
  2 试验方法第32-37页
   ·基因组 DNA 提取第32-33页
   ·DNA 纯度检测第33页
     ·琼脂糖凝胶电泳检测第33页
     ·紫外分光光度计检测第33页
   ·目的片段 PCR 扩增第33-35页
     ·引物设计第33-34页
     ·PCR 反应条件优化第34-35页
     ·PCR 目的片段检测第35页
   ·基因多态性检测第35-37页
     ·PCR-SSCP 单链构象多态性检测第35-36页
     ·PCR-RFLP 限制性片段长度多态性检测第36-37页
   ·数据处理及分析第37页
  3 结果与分析第37-53页
   ·基因组 DNA 提取效果第37-38页
   ·BMP15 基因 SNPS 检测与繁殖性状关联分析第38-43页
     ·片段 A 的 SNPs 检测结果第38-39页
     ·片段 A 的多态性与繁殖性状关联分析第39-40页
     ·片段 B 的 SNPs 检测结果第40-41页
     ·片段 B 的多态性与繁殖性状关联分析第41-43页
   ·GDF9 基因 SNPS 检测与繁殖性状关联分析第43-45页
     ·片段 C 的 SNPs 检测结果第43-44页
     ·片段 C 的多态性与繁殖性状关联分析第44-45页
   ·LH-β基因 SNPS 检测与繁殖性状关联分析第45-47页
     ·片段 D 的 SNPs 检测结果第45-46页
     ·片段 D 的多态性与繁殖性状关联分析第46-47页
   ·GnRHR 基因 SNPS 检测与繁殖性状关联分析第47-50页
     ·片段 E 的 SNPs 检测结果第47-49页
     ·片段 E 的多态性与繁殖性状关联分析第49-50页
   ·BMPR-IB 基因 SNPS 检测与繁殖性状关联分析第50-53页
     ·片段 F 的 SNPs 检测结果第50-51页
     ·片段 F 的多态性与繁殖性状关联分析第51-53页
  4 讨论第53-57页
   ·PCR 扩增的影响因素第53页
   ·PCR-SSCP 的影响因素第53-54页
   ·PCR-RFLP 的影响因素第54-55页
   ·基因多态性分析结果第55-57页
     ·BMP15 基因多态性分析结果第55页
     ·GDF9 基因多态性分析结果第55页
     ·LH-β基因多态性分析结果第55-56页
     ·GnRHR 基因多态性分析结果第56页
     ·BMPR-IB 基因多态性分析结果第56-57页
第三章 结论第57-59页
参考文献第59-67页
附录第67-74页
致谢第74页

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