| 缩写词 | 第1-10页 |
| 摘要 | 第10-13页 |
| Abstract | 第13-17页 |
| 第一章 引言 | 第17-28页 |
| 1 古树名木保护研究现状 | 第18-19页 |
| ·古树名木保护措施研究现状 | 第18-19页 |
| ·古树名木基因资源的挖掘与利用 | 第19页 |
| 2 植物遗传多样性的 DNA 分子标记技术 | 第19-21页 |
| ·RAPD 标记技术 | 第20页 |
| ·ISSR 标记技术 | 第20页 |
| ·SRAP 标记技术 | 第20-21页 |
| 3 植物离体种质资源保存研究进展 | 第21-23页 |
| ·一般保存 | 第21-22页 |
| ·限制生长保存 | 第22-23页 |
| ·超低温保存 | 第23页 |
| 4 植物 WRKY 家族基因研究进展 | 第23-26页 |
| ·WRKY 家族基因的结构特点 | 第24页 |
| ·WRKY 家族基因的分类 | 第24-25页 |
| ·WRKY 家族基因的生物学功能 | 第25-26页 |
| ·WRKY 基因调控植物的生物胁迫及其信号转导过程 | 第25页 |
| ·WRKY 基因调控植物的非生物胁迫及其信号转导过程 | 第25-26页 |
| ·WRKY 基因在植物的形态建成及生长发育中的作用 | 第26页 |
| 5 龙眼古树研究与保护现状 | 第26-27页 |
| 6 本试验研究的内容及意义 | 第27-28页 |
| ·本研究的意义 | 第27页 |
| ·本研究的主要内容 | 第27-28页 |
| 第二章 龙眼古树遗传多样性的 ISSR 分析 | 第28-37页 |
| 1 材料与方法 | 第28-31页 |
| ·试验材料 | 第28-29页 |
| ·主要实验设备及试验试剂 | 第29页 |
| ·主要试验设备 | 第29页 |
| ·主要试验试剂 | 第29页 |
| ·方法 | 第29-31页 |
| ·龙眼古树总 DNA 的提取及检测 | 第29-30页 |
| ·ISSR 反应引物筛选 | 第30页 |
| ·ISSR-PCR 扩增 | 第30页 |
| ·数据分析与方法 | 第30-31页 |
| 2 结果与分析 | 第31-35页 |
| ·龙眼古树总 DNA 的提取及检测 | 第31-32页 |
| ·ISSR 引物筛选 | 第32-33页 |
| ·龙眼古树资源 ISSR 分析 | 第33-34页 |
| ·ISSR 标记龙眼古树的遗传相似系数及聚类分析 | 第34-35页 |
| 3 讨论 | 第35-37页 |
| ·龙眼古树核心种质的构建 | 第35-36页 |
| ·龙眼古树种质资源的亲缘关系分布与地理分布有关 | 第36-37页 |
| 第三章 龙眼古树种质资源的离体限制生长保存 | 第37-55页 |
| 1 材料与方法 | 第37-38页 |
| ·材料 | 第37页 |
| ·方法 | 第37-38页 |
| ·外植体的处理方法 | 第37-38页 |
| ·诱导培养基和初始诱导胚性愈伤组织的继代保存 | 第38页 |
| ·不同浓度 B9对龙眼古树 EC 继代保存的影响 | 第38页 |
| ·不同浓度的高渗化合物对龙眼古树 EC 继代保存的影响 | 第38页 |
| ·8 份龙眼古树核心种质 EC 的离体保存 | 第38页 |
| ·数据处理 | 第38页 |
| 2 结果与分析 | 第38-53页 |
| ·不同浓度 B9对龙眼古树 EC 离体保存过程中的影响 | 第38-43页 |
| ·不同浓度 B9对龙眼古树 EC 离体保存过程中生长量的影响 | 第38-40页 |
| ·不同浓度 B9对龙眼古树 EC 离体保存过程中细胞活力的影响 | 第40-43页 |
| ·不同浓度高渗化合物对龙眼古树 EC 离体保存过程中的影响 | 第43-51页 |
| ·不同浓度高渗化合物对龙眼古树 EC 离体保存过程中生长量的影响 | 第43-47页 |
| ·不同浓度高渗化合物对龙眼古树 EC 离体保存过程中细胞活力的影响 | 第47-51页 |
| ·不同浓度 B9、高渗化合物对龙眼古树 EC 离体保存过程中愈伤组织生长状况的影响 | 第51-52页 |
| ·8 份龙眼古树核心种质 EC 的离体保存 | 第52-53页 |
| 3 讨论 | 第53-55页 |
| ·适当浓度的 B9有利于延长龙眼古树 EC 的继代时间 | 第53页 |
| ·蔗糖在龙眼古树 EC 限制生长保存过程中具有重要的作用 | 第53-54页 |
| ·影响不同龙眼古树 EC 生长不一致的主要原因 | 第54-55页 |
| 第四章 龙眼古树 EC WRKY 家族基因的克隆及其 qPCR 的表达分析 | 第55-105页 |
| 第一节 龙眼古树 EC WRKY 家族基因的克隆 | 第55-74页 |
| 1 材料与方法 | 第55-62页 |
| ·材料 | 第55-56页 |
| ·试验材料 | 第55-56页 |
| ·试验试剂 | 第56页 |
| ·试验仪器 | 第56页 |
| ·方法 | 第56-62页 |
| ·龙眼胚性愈伤组织 WRKY 家族基因的分类 | 第56页 |
| ·龙眼古树胚性愈伤组织总 RNA 的提取及 cDNA 第一链的合成 | 第56页 |
| ·龙眼古树胚型愈伤组织 WRKY 家族基因的的引物设计与 PCR 扩增 | 第56-61页 |
| ·目的片段 PCR 扩增体系 | 第61页 |
| ·目的片段的回收、克隆和测序 | 第61-62页 |
| ·龙眼古树 WRKY 家族基因全长片段的拼接及分析 | 第62页 |
| 2 结果与分析 | 第62-73页 |
| ·龙眼胚性愈伤组织转录组数据库中 WRKY 家族基因的分类 | 第62-63页 |
| ·龙眼古树胚性愈伤组织总 RNA 的提取及完整性的检测 | 第63-64页 |
| ·龙眼古树胚性愈伤组织 WRKY 家族基因 cDNA 全长序列的扩增 | 第64-66页 |
| ·龙眼古树 EC WRKY 家族基因 cDNA 3’末端序列的克隆 | 第64-65页 |
| ·龙眼古树 EC WRKY 家族基因 cDNA 5’末端序列的克隆 | 第65-66页 |
| ·龙眼古树 EC WRKY 家族基因 cDNA 全长序列的拼接、ORF 验证及分析 | 第66-73页 |
| ·龙眼古树 EC WRKY 家族基因 cDNA 全长序列的拼接 | 第66-67页 |
| ·龙眼古树 EC WRKY 家族基因 cDNA 全长序列的 ORF 验证 | 第67-69页 |
| ·龙眼古树 EC WRKY 家族基因 cDNA 全长序列的分析 | 第69-73页 |
| 3 讨论 | 第73-74页 |
| ·龙眼 EC WRKY 家族基因可能的作用 | 第73页 |
| ·龙眼古树 EC WRKY 蛋白结构的高度保守保证了其功能的稳定性 | 第73-74页 |
| 第二节 龙眼古树 EC WRKY 家族基因的生物信息学分析 | 第74-95页 |
| 1 材料与方法 | 第74-75页 |
| ·材料 | 第74-75页 |
| ·方法 | 第75页 |
| 2 结果与分析 | 第75-94页 |
| ·龙眼古树 EC WRKY 家族基因的蛋白质理化性质预测分析 | 第75-78页 |
| ·龙眼古树 EC WRKY 家族基因的蛋白质跨膜区结构预测分析 | 第78-80页 |
| ·龙眼古树 EC WRKY 家族基因的蛋白质信号肽预测分析 | 第80-81页 |
| ·龙眼古树 EC WRKY 家族基因的蛋白质亚细胞定位 | 第81-82页 |
| ·龙眼古树 EC WRKY 家族基因蛋白质磷酸化位点预测分析 | 第82-84页 |
| ·龙眼古树 EC WRKY 家族基因蛋白质功能位点预测分析 | 第84-85页 |
| ·龙眼古树 EC WRKY 家族基因蛋白质卷曲螺旋结构预测分析 | 第85-87页 |
| ·龙眼古树 EC WRKY 家族基因的保守结构域的预测分析 | 第87-89页 |
| ·龙眼古树 EC WRKY 家族基因蛋白质二级结构预测分析 | 第89-91页 |
| ·龙眼古树 EC WRKY 家族基因蛋白质三维结构预测分析 | 第91-92页 |
| ·龙眼古树 EC WRKY 家族基因的聚类分析 | 第92-94页 |
| 3 讨论 | 第94-95页 |
| ·龙眼古树 EC WRKY 蛋白具有丰富的磷酸化位点 | 第94页 |
| ·龙眼古树 EC WRKY 蛋白的结构特点与其功能的关系 | 第94-95页 |
| ·龙眼古树 EC WRKY 蛋白可能参与到植物的抗寒过程 | 第95页 |
| 第三节 低温胁迫条件下龙眼古树 EC WRKY 家族基因的定量表达分析 | 第95-105页 |
| 1 材料与方法 | 第96-97页 |
| ·材料 | 第96页 |
| ·方法 | 第96-97页 |
| ·龙眼古树 EC 总 RNA 的提取及 cDNA 的合成 | 第96页 |
| ·实时荧光定量 PCR 引物设计 | 第96-97页 |
| ·实时荧光定量 PCR 反应体系及内参基因 | 第97页 |
| ·不同温度处理龙眼古树 EC WRKY 家族基因的 qPCR 表达 | 第97页 |
| ·不同低温持续时间龙眼古树 EC WRKY 家族基因的 qPCR 表达 | 第97页 |
| ·不同古树与栽培品种之间 EC WRKY 家族基因的 qPCR 表达 | 第97页 |
| 2 结果与分析 | 第97-103页 |
| ·标准曲线的建立及内参基因和目的基因的特异性扩增 | 第97-99页 |
| ·不同温度处理龙眼古树 EC WRKY 家族基因的 qPCR 表达分析 | 第99-101页 |
| ·不同低温持续时间龙眼古树 EC WRKY 家族基因的 qPCR 表达分析 | 第101-102页 |
| ·不同古树与栽培品种之间 EC WRKY 家族基因的 qPCR 表达分析 | 第102-103页 |
| 3 讨论 | 第103-105页 |
| ·龙眼古树 WRKY 基因家族成员之间的表达模式存在较大的差异 | 第103-104页 |
| ·WRKY 基因在龙眼古树与现代栽培品种中的表达模式不相同 | 第104-105页 |
| 第五章 小结 | 第105-111页 |
| 参考文献 | 第111-119页 |
| 附录 1 图版及图版说明 | 第119-135页 |
| 附录 2 29 份龙眼古树种质资源生长状况 | 第135-136页 |
| 附录 3 龙眼古树的 ISSR 分析的遗传相似系数 | 第136-137页 |
| 附录 4 龙眼古树 EC WRKY 家族基因 cDNA3'末端、5'末端及 ORF 序列信息 | 第137-147页 |
| 附录 5 龙眼古树家 EC WRKY 家族基因登陆序列信息 | 第147-153页 |
| 攻读硕士期间发表论文、参加学术会议与获奖情况 | 第153-154页 |
| 致谢 | 第154页 |
