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矮牵牛PhTCP2基因的克隆、表达分析及超量表达研究

目录第1-7页
摘要第7-9页
Abstract第9-11页
第一章 文献综述第11-17页
   ·转录因子研究进展第11-13页
     ·转录因子的结构和功能第11-12页
     ·转录因子的分类第12页
     ·植物转录因子的功能第12-13页
   ·TCP基因家族研究进展第13-17页
     ·TCP基因家族概述第13页
     ·TCP结构域第13-14页
     ·TCP基因家族的分类第14页
     ·TCP基因生化特征第14-15页
     ·TCP基因的功能第15-17页
第二章 引言第17-19页
   ·研究背景及意义第17-18页
   ·技术路线第18-19页
第三章 矮牵牛PhTCP2基因的克隆第19-27页
   ·实验材料与试剂第19-20页
     ·植物材料第19页
     ·菌株与载体第19页
     ·主要仪器设备第19页
     ·主要化学试剂及试剂盒第19页
     ·自配的主要试剂和常用培养基配方第19-20页
   ·实验方法第20-24页
     ·植物材料的种植第20页
     ·矮牵牛基因组DNA的提取第20-21页
     ·PCR引物设计及PCR扩增第21-22页
     ·BioSpin Gel Extraction kit回收目的DNA片段第22页
     ·回收纯化产物与pMD19-T载体连接第22页
     ·大肠杆菌感受态细胞的制备第22-23页
     ·将连接产物转化到大肠杆菌感受态细胞中第23页
     ·转化子的鉴定第23-24页
     ·PhTCP2基因的生物信息学分析第24页
   ·结果与分析第24-26页
     ·矮牵牛基因组DNA的检测第24页
     ·矮牵牛PhTCP2基因的克隆第24-25页
     ·矮牵牛PhTCP2基因结构分析第25页
     ·矮牵牛PhTCP2基因进化树分析第25-26页
   ·讨论第26-27页
第四章 矮牵牛PhTCP2基因转录的实时荧光定量PCR分析第27-41页
   ·实验材料与试剂第27页
     ·实验材料第27页
     ·主要试剂第27页
     ·主要仪器设备与耗材第27页
   ·实验方法第27-31页
     ·植物的取材第27-28页
     ·矮牵牛cDNA第一链的合成第28-30页
       ·总RNA的提取第28-29页
       ·检测RNA的浓度和质量第29页
       ·cDNA第一链的合成第29-30页
     ·PhTCP2表达特性分析第30-31页
   ·结果与分析第31-40页
     ·总RNA提取与质量控制第31-32页
     ·phTCP2基因表达特性分析第32-40页
   ·讨论第40-41页
第五章 矮牵牛PhTCP2基因超量表达研究第41-54页
   ·实验材料第41-42页
     ·植物材料第41页
     ·菌株与载体第41页
     ·主要仪器设备第41页
     ·试剂盒及主要试剂第41页
     ·常用试剂配制第41-42页
     ·矮牵牛转化基本培养基第42页
   ·实验方法第42-47页
     ·植物材料的处理第42-43页
     ·表达载体的构建第43-44页
     ·农杆菌电转化感受态的制备第44-45页
     ·电击杯的处理及农杆菌电转化感受态细胞的转化第45页
     ·农杆菌介导矮牵牛的转化第45-46页
     ·转基因植株的检测第46-47页
     ·转基因植株表型观察第47页
   ·结果与分析第47-52页
     ·PhTCP2基因超量表达载体的构建第47-48页
     ·转基因矮牵牛的获得和检测第48-51页
     ·转基因植株的表型观察第51-52页
   ·讨论第52-54页
第六章 矮牵牛Ph TCP2基因的沉默表达研究第54-65页
   ·实验材料第54页
     ·植物材料第54页
     ·菌株与载体第54页
     ·主要仪器设备第54页
     ·试剂盒及主要试剂第54页
     ·常用试剂配制第54页
     ·矮牵牛转化基本培养基第54页
   ·实验方法第54-58页
     ·植物材料的处理第54-55页
     ·表达载体的构建第55-56页
     ·双元载体转入农杆菌第56页
     ·农杆菌介导矮牵牛的转化第56-57页
     ·转基因植株的检测第57-58页
     ·转基因植株表型观察第58页
   ·结果与分析第58-64页
     ·矮牵牛PhTCP2基因SRDX沉默载体(pGMF512)的构建第58-59页
     ·沉默载体转入农杆菌第59-60页
     ·转基因矮牵牛的获得和检测第60-63页
     ·转基因矮牵牛表型观察第63-64页
   ·讨论第64-65页
第七章 结论第65-67页
   ·结论第65页
     ·矮牵牛PhTCP2基因克隆及特征分析第65页
     ·矮牵牛PhTCP2基因转录表达分析第65页
     ·矮牵牛PhTCP2基因超表达研究第65页
     ·矮牵牛PhTCP2基因沉默研究第65页
   ·下一步计划第65-67页
参考文献第67-73页
缩略词表第73-75页
致谢第75-77页
附录第77页

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