致谢 | 第1-8页 |
中文摘要 | 第8-9页 |
ABSTRACT | 第9-10页 |
第一章 文献综述 | 第10-17页 |
1 猪繁殖与呼吸综合征研究进展 | 第10-11页 |
·猪繁殖与呼吸综合征 | 第10页 |
·猪繁殖与呼吸综合征病毒基因组 | 第10-11页 |
·猪繁殖与呼吸综合征病毒免疫学研究进展 | 第11页 |
2 猪繁殖与呼吸综合征的抗体依赖性增强作用 | 第11-12页 |
3 猪繁殖与呼吸综合征病毒细胞受体研究进展 | 第12-15页 |
·硫酸乙酰肝素(Heparan Sulfate,HS)受体 | 第12-13页 |
·唾液酸黏附素(Sialoadhesin,Sn)受体 | 第13页 |
·CD163(Cluster of Differentiation 163)分子 | 第13-14页 |
·波形蛋白( Vimentin) | 第14-15页 |
·CD151(Cluster of Differentiation 151)分子 | 第15页 |
4 猪繁殖与呼吸综合征病毒感染引起的免疫抑制 | 第15页 |
5 基因转染技术研究进展 | 第15-16页 |
6 本研究的意义 | 第16-17页 |
第二章 猪繁殖与呼吸综合征病毒细胞受体CD163、Sn 的克隆及真核表达载体的构建 | 第17-34页 |
1 材料 | 第18-21页 |
·菌种、质粒 | 第18页 |
·酶及主要试剂 | 第18-19页 |
·主要试剂的配制 | 第19页 |
·试剂的配制 | 第19-20页 |
·主要仪器设备 | 第20-21页 |
2 方法 | 第21-30页 |
·猪肺巨噬细胞的采集 | 第21-22页 |
·PAM 细胞总RNA 的提取及cDNA 的合成 | 第22-23页 |
·猪CD163、Sn 片段的克隆 | 第23-27页 |
·真核表达载体 PIREShyg-CD163 和 pcDNA3.1-Sn 的构建 | 第27-30页 |
3 结果与分析 | 第30-33页 |
·提取猪肺巨噬细胞PAM 的总RNA | 第30页 |
·poCD163 和Sn 基因的PCR 扩增 | 第30-31页 |
·克隆载体PMD-19-T-CD163 和PMD-19-T-Sn 的构建 | 第31-32页 |
·真核表达载体PIREShyg-CD163 和pcDNA3.1-Sn 的构建 | 第32-33页 |
4 讨论 | 第33-34页 |
第三章 CD163 和Sn 的功能鉴定 | 第34-52页 |
1 材料 | 第34-35页 |
·菌种、质粒、病毒 | 第34页 |
·细胞及培养基 | 第34页 |
·试剂和抗体 | 第34页 |
·主要试剂的配制 | 第34-35页 |
2 方法 | 第35-43页 |
·PK-15 转染条件的优化 | 第35-40页 |
·CD163 和Sn 功能鉴定 | 第40-43页 |
3. 结果 | 第43-50页 |
·PMD-19-T-GFP 质粒的菌液PCR 鉴定 | 第43页 |
·真核表达质粒pcDNA3.1-GFP 和PIREShyg3-GFP 的构建 | 第43-44页 |
·PK-15 细胞转染条件的优化 | 第44-47页 |
·CD163 和Sn 的功能鉴定 | 第47-50页 |
4 讨论 | 第50-52页 |
第四章 CD163 和FcγRⅡ在PRRSV 感染过程中的协同作用 | 第52-55页 |
1 材料 | 第52页 |
·病毒、细胞和质粒 | 第52页 |
·仪器设备 | 第52页 |
·试剂配制 | 第52页 |
2 方法 | 第52-53页 |
·pcDNA3.1- FcγRII 和PIREShyg-CD163 共转染PK-15 | 第52页 |
·转染细胞接毒 | 第52-53页 |
·流式细胞检测PRRSV 感染结果 | 第53页 |
3 结果与分析 | 第53-55页 |
全文结论 | 第55-56页 |
参考文献 | 第56-59页 |
附录 参加的科研项目 | 第59页 |
硕士期间发表的论文 | 第59页 |