目录 | 第1-5页 |
中文摘要 | 第5-7页 |
ABSTRACT | 第7-9页 |
缩略词英汉对照表 | 第9-11页 |
前言 | 第11-17页 |
实验材料 | 第17-21页 |
一、主要化学试剂 | 第17页 |
二、抗体 | 第17-18页 |
三、细胞系 | 第18页 |
四、工具酶、分子量标准及试剂盒 | 第18-19页 |
五、质粒载体 | 第19页 |
六、菌株 | 第19页 |
七、仪器设备 | 第19-20页 |
八、软件 | 第20-21页 |
实验方法 | 第21-41页 |
[分子生物学相关实验] | 第21-35页 |
一、常规表达质粒构建 | 第21-31页 |
二、哺乳动物细胞的冻存、复苏、转染 | 第31-33页 |
三、建立稳定细胞株 | 第33-35页 |
[免疫学相关实验] | 第35-41页 |
一、荧光流式细胞分析技术 | 第35-36页 |
二、激光扫描共聚焦显微镜 | 第36-37页 |
三、蛋白质的SDS-PAGE梯度凝胶电泳 | 第37-39页 |
四、湿转法Western Blot | 第39-41页 |
实验结果 | 第41-75页 |
1. 人Fcα/μR-EC2结构域的同源建模 | 第41-43页 |
2. 野生型人Fcα/μR在真核细胞上的表达及配体结合鉴定 | 第43-46页 |
3. 人Fcα/μR-EC2结构域中三个CDR样环对人Fcα/μR配体结合能力的影响 | 第46-58页 |
·人Fcα/μR-EC2结构域CDR样环置换突变体的构建 | 第46-51页 |
·人Fcα/μR-EC2结构域CDR样环置换突变体的表达 | 第51-52页 |
·人Fcα/μR-EC2结构域三个CDR样环对结合IgA的影响 | 第52-55页 |
·人Fcα/μR-EC2结构域三个CDR样环对结合IgM的影响 | 第55-58页 |
4. 人Fcα/μR-EC2结构域CDR样环内氨基酸对人Fcα/μR配体结合能力的影响 | 第58-75页 |
·人Fcα/μR-EC2结构域CDR样环内点突变受体的构建 | 第59-63页 |
·CDR1、CDR2样环状结构内氨基酸对人Fcα/μR结合IgA的影响 | 第63-67页 |
·CDR1、CDR2样环状结构内氨基酸对人Fcα/μR结合IgM的影响 | 第67-70页 |
·CDR3样环状结构内氨基酸对人Fcα/μR结合IgA的影响 | 第70-73页 |
·CDR3样环状结构内氨基酸对人Fcα/μR结合IgM的影响 | 第73-75页 |
结论 | 第75-76页 |
讨论 | 第76-83页 |
1. 人Fcα/μR-EC2结构域CDR样环对配体结合的影响 | 第76-79页 |
2. 人Fcα/μR在IgM上结合位点的推测 | 第79-80页 |
3. 对实验研究方法的考虑 | 第80-83页 |
·同源建模辅助蛋白质结构与功能的研究 | 第80页 |
·人Fcα/μR突变体构建方法的选择 | 第80-82页 |
·人Fcα/μR表达细胞系的选择 | 第82-83页 |
参考文献 | 第83-87页 |
综述 | 第87-98页 |
参考文献 | 第94-98页 |
附录 | 第98-110页 |
附录Ⅰ 质粒载体图谱和多克隆位点 | 第98-101页 |
附录Ⅱ 人fcamr突变实验引物序列表 | 第101-102页 |
附录Ⅲ 氨基酸缩写对照表 | 第102-104页 |
附录Ⅳ 人fcamr核苷酸序列 | 第104-105页 |
附录Ⅴ 人Fcα/μR氨基酸序列 | 第105-106页 |
附录Ⅵ 人pigr核苷酸序列 | 第106-108页 |
附录Ⅶ 人pIgR氨基酸序列 | 第108-109页 |
附录Ⅷ 攻读博士学位期间发表文章情况 | 第109-110页 |
致谢 | 第110-111页 |
个人简历 | 第111-113页 |