| 摘要 | 第1-11页 |
| Abstract | 第11-13页 |
| 第一部分 引言 | 第13-20页 |
| ·泛素-蛋白酶体系统简介 | 第14-18页 |
| ·泛素-蛋白酶体系统简介 | 第14-15页 |
| ·泛素连接酶简介 | 第15-18页 |
| ·研究E3底物的方法 | 第18-19页 |
| ·本论文的研究内容 | 第19-20页 |
| 第二部分 利用泛素连接酶的蛋白质相互作用结构域高效筛选底物 | 第20-86页 |
| 第一章 前言 | 第21-24页 |
| ·PDZ结构域简介 | 第21页 |
| ·LNX家族简介 | 第21-23页 |
| ·技术策略 | 第23-24页 |
| 第二章 LNX蛋白家族PDZ结构域结合特性的研究 | 第24-40页 |
| ·前言 | 第24-26页 |
| ·实验材料和方法 | 第26-28页 |
| ·实验材料 | 第26页 |
| ·实验方法 | 第26-28页 |
| ·实验结果 | 第28-38页 |
| ·自激活检测 | 第28-29页 |
| ·应用高效验证筛选体系研究LNX家族PDZ结构域的结合特性 | 第29-38页 |
| ·章节讨论 | 第38-40页 |
| 第三章 在体外泛素化体系中鉴定LNX1的潜在底物 | 第40-51页 |
| ·前言 | 第40-41页 |
| ·材料与方法 | 第41-45页 |
| ·实验材料 | 第41-42页 |
| ·实验方法 | 第42-45页 |
| ·实验结果 | 第45-49页 |
| ·LNX及其截断体表达 | 第45-46页 |
| ·人工底物表达和纯化结果 | 第46页 |
| ·体外泛素化反应结果 | 第46-49页 |
| ·章节讨论 | 第49-51页 |
| 第四章 细胞内验证LNX1的天然底物 | 第51-64页 |
| ·前言 | 第51页 |
| ·材料与方法 | 第51-54页 |
| ·实验材料 | 第51-52页 |
| ·实验方法 | 第52-54页 |
| ·实验结果与讨论 | 第54-64页 |
| ·PBK是LNX1的天然底物 | 第54-58页 |
| ·BCR是LNX1的天然底物 | 第58-62页 |
| ·GAS2L2可能不是LNX1的天然底物 | 第62-63页 |
| ·小结 | 第63-64页 |
| 第五章 LNX家族PDZ结构域相互作用 | 第64-70页 |
| ·前言 | 第64页 |
| ·材料与方法 | 第64-65页 |
| ·实验材料 | 第64页 |
| ·实验方法 | 第64-65页 |
| ·实验结果与讨论 | 第65-70页 |
| ·LNX家族PDZ-PDZ相互作用的研究 | 第65-67页 |
| ·LNX1PDZ-PDZ相互作用对LNX1可能的调节机制 | 第67-70页 |
| 第六章 LNX1功能分析 | 第70-83页 |
| ·前言 | 第70-71页 |
| ·材料和方法 | 第71-74页 |
| ·实验材料 | 第71页 |
| ·实验方法 | 第71-74页 |
| ·实验结果与讨论 | 第74-81页 |
| ·LNX1泛素化降解PBK的生理学意义 | 第74-76页 |
| ·GO分析配体功能 | 第76-79页 |
| ·配体之间功能相关性分析 | 第79-81页 |
| ·章节讨论 | 第81-83页 |
| 第七章 讨论 | 第83-86页 |
| ·本策略的优点及局限性 | 第83-84页 |
| ·本策略的推广性 | 第84-86页 |
| 第三部分 利用活噬菌体文库作为底物筛选泛素连接酶的底物 | 第86-142页 |
| 第一章 前言 | 第87-90页 |
| ·噬菌体展示系统简介 | 第87-88页 |
| ·泛素连接酶MDM2的简介 | 第88页 |
| ·技术路线 | 第88-90页 |
| 第二章 利用获噬菌体文库作为底物筛选MDM2的底物 | 第90-125页 |
| ·实验材料和方法 | 第90-93页 |
| ·实验材料 | 第90-91页 |
| ·实验方法 | 第91-93页 |
| ·实验结果 | 第93-122页 |
| ·MDM2适用于本筛选体系 | 第93-95页 |
| ·利用噬菌体展示系统筛选MDM2底物 | 第95-119页 |
| ·筛选结果总结分析 | 第119-122页 |
| ·章节讨论 | 第122-125页 |
| 第三章 MDM2潜在底物的验证 | 第125-138页 |
| ·前言 | 第125页 |
| ·体外验证 | 第125页 |
| ·细胞内验证 | 第125页 |
| ·实验材料和方法 | 第125-128页 |
| ·实验材料 | 第125-126页 |
| ·实验方法 | 第126-128页 |
| ·实验结果 | 第128-138页 |
| ·体外泛素化实验验证的结果 | 第128-133页 |
| ·体内泛素化实验验证的结果 | 第133-137页 |
| ·小结 | 第137-138页 |
| 第四章 讨论 | 第138-142页 |
| ·本策略的优点和局限性 | 第138-139页 |
| ·本策略的推广性 | 第139页 |
| ·两部分策略之间的比较 | 第139-142页 |
| 综述：丝氨酸水解酶HtrA2的研究进展 | 第142-146页 |
| 参考文献 | 第146-157页 |
| 图索引 | 第157-159页 |
| 表格索引 | 第159-160页 |
| 个人简历 | 第160-161页 |
| 在读期间学术成果 | 第161-162页 |
| 致谢 | 第162-164页 |
