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抗虫基因cry3Bb*对早粳稻空育131的转化

中文摘要第1-5页
Abstract第5-7页
目录第7-10页
第1章 前言第10-23页
   ·Bt 与 Bt 基因简介第10-14页
     ·Bt 蛋白的分类第10-12页
     ·Bt 蛋白的结构第12-13页
     ·Bt 蛋白的杀虫机理第13-14页
   ·cry3 类基因研究简介第14-15页
   ·鞘翅目昆虫对国内的农作物危害情况第15-16页
   ·国内外转 Bt 基因水稻的研究进展第16-17页
   ·转 Bt 基因水稻中技术方法概况第17-19页
     ·以植物细胞原生质体为基因受体第17页
     ·以植物单细胞为基因受体第17-18页
     ·以植物外植体为基因受体第18页
     ·以植物愈伤组织为基因受体第18页
     ·花粉管通道法第18-19页
     ·基因枪转化法第19页
     ·农杆菌介导法第19页
   ·针对害虫产生抗性的管理措施第19-21页
     ·高剂量/庇护所策略第20页
     ·基因聚合策略第20-21页
     ·Bt 蛋白时空特异表达策略第21页
   ·研究目的与意义第21-23页
第2章 材料与方法第23-36页
   ·植物材料第23页
   ·细菌菌株第23页
   ·目的基因与质粒载体第23-25页
   ·主要试剂与仪器设备第25-26页
     ·主要试剂第25页
     ·主要仪器设备第25-26页
   ·细菌培养基第26-27页
   ·目的基因的验证第27-30页
     ·农杆菌质粒的提取(碱裂解法)第27页
     ·E. coli 的感受态制备与转化(电击法)第27-28页
     ·质粒的酶切验证第28-29页
     ·质粒的 PCR 验证第29-30页
   ·农杆菌介导粳稻空育 131 遗传转化体系优化第30-32页
     ·糙米最佳消毒时间的确定第30页
     ·粳稻愈伤诱导培养基的选择第30-31页
     ·愈伤组织诱导及继代培养基 2,4-D、6-BA 和 NAA第31-32页
     ·活性炭或维生素 C 对水稻愈伤组织褐化的影响第32页
     ·根瘤农杆菌浓度对抗性愈伤率与农杆菌复发率的影响第32页
   ·农杆菌介导粳稻空育 131 的遗传转化第32页
   ·转 cry3Bb*基因 T0代植株分子检测第32-36页
第3章 结果与分析第36-46页
   ·目的基因验证第36-37页
     ·质粒酶切第36页
     ·质粒 PCR第36-37页
   ·农杆菌介导的粳稻空育 131 遗传转化体系的优化第37-42页
     ·糙米消毒第37-38页
     ·粳稻愈伤诱导培养基第38-39页
     ·生长调节剂浓度组合对愈伤组织诱导的影响第39-40页
     ·活性炭或维生素 C 对愈伤组织褐化的影响第40-41页
     ·农杆菌液浓度对抗性愈伤率和农杆菌复发率的影响第41-42页
   ·空育 131 遗传转化第42-44页
   ·转基因水稻 T0代鉴定选择第44-46页
     ·Basta 抗性检测第44页
     ·PCR 检测第44-45页
     ·RT-PCR 检测第45-46页
第4章 讨论第46-51页
   ·培育抗负泥虫早粳稻空育 131( cry3Bb*)的必要性第46页
   ·粳稻成熟胚愈伤组织诱导及其继代的基本培养基第46-47页
   ·水稻愈伤组织诱导及继代时添加的生长调节剂第47-48页
   ·水稻愈伤组织诱导及继代过程中褐化问题的解决第48页
   ·侵染水稻愈伤组织的根瘤农杆菌菌液浓度第48-49页
   ·今后进一步开展的工作第49-51页
第5章 结论第51-52页
参考文献第52-59页
附录第59-63页
致谢第63页

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