中文摘要 | 第1-5页 |
Abstract | 第5-7页 |
目录 | 第7-10页 |
第1章 前言 | 第10-23页 |
·Bt 与 Bt 基因简介 | 第10-14页 |
·Bt 蛋白的分类 | 第10-12页 |
·Bt 蛋白的结构 | 第12-13页 |
·Bt 蛋白的杀虫机理 | 第13-14页 |
·cry3 类基因研究简介 | 第14-15页 |
·鞘翅目昆虫对国内的农作物危害情况 | 第15-16页 |
·国内外转 Bt 基因水稻的研究进展 | 第16-17页 |
·转 Bt 基因水稻中技术方法概况 | 第17-19页 |
·以植物细胞原生质体为基因受体 | 第17页 |
·以植物单细胞为基因受体 | 第17-18页 |
·以植物外植体为基因受体 | 第18页 |
·以植物愈伤组织为基因受体 | 第18页 |
·花粉管通道法 | 第18-19页 |
·基因枪转化法 | 第19页 |
·农杆菌介导法 | 第19页 |
·针对害虫产生抗性的管理措施 | 第19-21页 |
·高剂量/庇护所策略 | 第20页 |
·基因聚合策略 | 第20-21页 |
·Bt 蛋白时空特异表达策略 | 第21页 |
·研究目的与意义 | 第21-23页 |
第2章 材料与方法 | 第23-36页 |
·植物材料 | 第23页 |
·细菌菌株 | 第23页 |
·目的基因与质粒载体 | 第23-25页 |
·主要试剂与仪器设备 | 第25-26页 |
·主要试剂 | 第25页 |
·主要仪器设备 | 第25-26页 |
·细菌培养基 | 第26-27页 |
·目的基因的验证 | 第27-30页 |
·农杆菌质粒的提取(碱裂解法) | 第27页 |
·E. coli 的感受态制备与转化(电击法) | 第27-28页 |
·质粒的酶切验证 | 第28-29页 |
·质粒的 PCR 验证 | 第29-30页 |
·农杆菌介导粳稻空育 131 遗传转化体系优化 | 第30-32页 |
·糙米最佳消毒时间的确定 | 第30页 |
·粳稻愈伤诱导培养基的选择 | 第30-31页 |
·愈伤组织诱导及继代培养基 2,4-D、6-BA 和 NAA | 第31-32页 |
·活性炭或维生素 C 对水稻愈伤组织褐化的影响 | 第32页 |
·根瘤农杆菌浓度对抗性愈伤率与农杆菌复发率的影响 | 第32页 |
·农杆菌介导粳稻空育 131 的遗传转化 | 第32页 |
·转 cry3Bb*基因 T0代植株分子检测 | 第32-36页 |
第3章 结果与分析 | 第36-46页 |
·目的基因验证 | 第36-37页 |
·质粒酶切 | 第36页 |
·质粒 PCR | 第36-37页 |
·农杆菌介导的粳稻空育 131 遗传转化体系的优化 | 第37-42页 |
·糙米消毒 | 第37-38页 |
·粳稻愈伤诱导培养基 | 第38-39页 |
·生长调节剂浓度组合对愈伤组织诱导的影响 | 第39-40页 |
·活性炭或维生素 C 对愈伤组织褐化的影响 | 第40-41页 |
·农杆菌液浓度对抗性愈伤率和农杆菌复发率的影响 | 第41-42页 |
·空育 131 遗传转化 | 第42-44页 |
·转基因水稻 T0代鉴定选择 | 第44-46页 |
·Basta 抗性检测 | 第44页 |
·PCR 检测 | 第44-45页 |
·RT-PCR 检测 | 第45-46页 |
第4章 讨论 | 第46-51页 |
·培育抗负泥虫早粳稻空育 131( cry3Bb*)的必要性 | 第46页 |
·粳稻成熟胚愈伤组织诱导及其继代的基本培养基 | 第46-47页 |
·水稻愈伤组织诱导及继代时添加的生长调节剂 | 第47-48页 |
·水稻愈伤组织诱导及继代过程中褐化问题的解决 | 第48页 |
·侵染水稻愈伤组织的根瘤农杆菌菌液浓度 | 第48-49页 |
·今后进一步开展的工作 | 第49-51页 |
第5章 结论 | 第51-52页 |
参考文献 | 第52-59页 |
附录 | 第59-63页 |
致谢 | 第63页 |