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人HSPC117基因对细胞迁移行为影响及基因表观调控的初步研究

摘要第1-9页
Abstract第9-11页
1 前言第11-23页
   ·HSPC117 蛋白概述第11-13页
     ·HSPC117 基因结构特征第11-12页
     ·HSPC117 蛋白生物学功能第12-13页
     ·HSPC117 蛋白研究现状第13页
   ·哺乳动物细胞的体外培养与细胞生长第13-15页
     ·体外细胞培养方式与细胞类型第13-14页
     ·细胞增殖第14页
     ·细胞生长第14-15页
   ·哺乳动物 DNA 甲基化研究概况第15-17页
     ·DNA 甲基化第15页
     ·哺乳动物 DNA 甲基化研究进展第15-16页
     ·DNA 甲基化与生物机体关联第16-17页
     ·DNA 甲基化转移酶抑制剂——5-氮杂-2’-脱氧胞苷第17页
   ·哺乳动物组蛋白乙酰化研究概况第17-19页
     ·组蛋白修饰第17-18页
     ·哺乳动物组蛋白乙酰化研究进展第18页
     ·组蛋白乙酰化与生物机体的关联第18-19页
     ·组蛋白去乙酰化抑制剂——曲古抑菌素 A第19页
   ·基质金属蛋白酶(MMPs)及其组织金属蛋白酶抑制剂(TIMPs)与细胞迁移运动第19-22页
     ·细胞迁移运动及其机制第19-20页
     ·基质金属蛋白酶家族(MMPs)结构特征第20-21页
     ·基质金属蛋白酶-2,-14(MMP-2,-14)第21页
     ·组织金属蛋白酶抑制因子-2(TIMP-2)第21-22页
   ·实验目的与意义第22-23页
2 实验材料与方法第23-36页
   ·实验材料第23-25页
     ·实验细胞株第23页
     ·实验试剂第23页
     ·主要仪器设备第23-24页
     ·主要药品的配制第24-25页
     ·主要生物学软件第25页
     ·实验相关生物信息学网站第25页
   ·实验方法第25-36页
     ·人 HSPC117 基因克隆与测序第25-28页
     ·pEGFP-C1-HSPC117 重组质粒构建第28-31页
     ·HSPC117 基因亚细胞定位第31-32页
     ·HSPC117 基因过表达对 JEG-3 细胞中 MMP-2、MMP-14、TIMP-2 基因表达的影响第32-34页
     ·细胞划痕法测定 HSPC117 基因过表达对细胞迁移的影响第34页
     ·不同浓度 TSA 和 5-aza-CdR 单独用药对 JEG-3 细胞生长的影响第34-35页
     ·Real-time PCR 检测 TSA 与 5-aza-CdR 单独及联合用药对 JEG-3 细胞中 HSPC117 基因表达的影响第35-36页
3 结果与分析第36-47页
   ·HSPC117 基因的 TA 克隆与亚细胞定位结果第36-41页
     ·人 HSPC117 基因目的片段的 PCR 扩增结果第36页
     ·目的 DNA 片段重组质粒双酶切鉴定结果第36-37页
     ·目的 DNA 片段测序结果第37-38页
     ·pMD18-T-HSPC117 质粒和 pEGFP-C1 质粒双酶切结果第38页
     ·重组质粒菌液 PCR 鉴定结果第38-39页
     ·瞬时转染重组质粒 24h 与 48h HSPC117 基因的定位结果第39-41页
   ·过表达 HSPC117 基因的 JEG-3 细胞中 MMP-2 基因、MMP-14 基因及 TIMP-2 基因相对表达量变化第41-42页
   ·过表达 HSPC117 基因对 JEG-3 细胞迁移速率的影响第42-44页
   ·不同浓度 TSA 与 5-aza-CdR 对 JEG-3 细胞生长的影响结果第44-45页
   ·TSA 及 5-aza-CdR 不同处理对 JEG-3 细胞中 HSPC117 基因表达的影响第45-47页
4 讨论第47-51页
   ·HSPC117 基因的亚细胞定位第47页
   ·HSPC117 基因过表达对细胞粘附相关基因表达的影响第47-48页
   ·HSPC117 基因过表达对细胞迁移的影响第48-49页
   ·TSA 对 HSPC117 基因表达的影响第49页
   ·5-aza-CdR 对 HSPC117 基因表达的影响第49-51页
5 结论第51-52页
参考文献第52-59页
攻读硕士学位期间发表的学术论文第59页

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