| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-13页 |
| CONTENTS | 第13-18页 |
| 图表目录 | 第18-20页 |
| 缩略表 | 第20-22页 |
| 1 绪论 | 第22-48页 |
| ·引言 | 第22-23页 |
| ·抑癌蛋白PTEN的研究进展 | 第23-34页 |
| ·PTEN的发现 | 第23-24页 |
| ·PTEN的蛋白结构 | 第24-26页 |
| ·PTEN和PI3K/AKT通路 | 第26-29页 |
| ·PTEN的蛋白磷酸酶酶活性 | 第29-30页 |
| ·PTEN与多种蛋白之间的相互作用 | 第30-31页 |
| ·PTEN与肿瘤的关系 | 第31-34页 |
| ·癌蛋白AIB1的研究进展 | 第34-45页 |
| ·p160家族 | 第34-35页 |
| ·AIB1的蛋白结构 | 第35-36页 |
| ·AIB1的翻译后修饰 | 第36-39页 |
| ·AIB1的功能 | 第39-42页 |
| ·AIB1与肿瘤的关系 | 第42-45页 |
| ·本论文的选题依据和研究内容 | 第45-48页 |
| ·选题依据 | 第45-46页 |
| ·研究内容 | 第46-48页 |
| 2 PTEN对AIB1蛋白水平的影响 | 第48-66页 |
| ·引言 | 第48页 |
| ·仪器与试剂 | 第48-50页 |
| ·仪器 | 第48-49页 |
| ·试剂 | 第49-50页 |
| ·菌种、细胞及质粒 | 第50页 |
| ·实验方法 | 第50-55页 |
| ·Gfp-PTEN G129R质粒构建 | 第50-51页 |
| ·质粒提取 | 第51页 |
| ·细胞培养 | 第51页 |
| ·细胞转染 | 第51页 |
| ·细胞裂解 | 第51-52页 |
| ·考马斯亮蓝法测蛋白浓度 | 第52页 |
| ·免疫印迹(Western Blot,WB) | 第52-54页 |
| ·免疫沉淀(Immunoprecipitation,IP) | 第54页 |
| ·反转录PCR | 第54-55页 |
| ·PCR扩增目的片段 | 第55页 |
| ·结果与讨论 | 第55-63页 |
| ·不同剂量PTEN对AIB1蛋白水平的影响 | 第55-56页 |
| ·PTEN的赖磷酸酶活性对AIB1蛋白水平的影响 | 第56-57页 |
| ·PTEN对AIB1蛋白合成和降解过程的影响 | 第57-58页 |
| ·PTEN对内源AIB1蛋白水平的影响 | 第58-59页 |
| ·PTEN对AIB1蛋白稳定性的影响 | 第59-61页 |
| ·PTEN对AIB1泛素化水平的影响 | 第61-62页 |
| ·PI3K/AKT通路对AIB1蛋白水平的影响 | 第62-63页 |
| ·讨论 | 第63-65页 |
| ·小结 | 第65-66页 |
| 3 PTEN和AIB1之间相互作用的确定 | 第66-76页 |
| ·引言 | 第66页 |
| ·仪器与试剂 | 第66-67页 |
| ·仪器 | 第66页 |
| ·试剂 | 第66页 |
| ·菌种、细胞及质粒 | 第66-67页 |
| ·实验方法 | 第67-68页 |
| ·质粒提取 | 第67页 |
| ·细胞培养 | 第67页 |
| ·细胞转染 | 第67页 |
| ·免疫沉淀(immunoprecipitation,IP) | 第67页 |
| ·核质分离 | 第67-68页 |
| ·免疫荧光 | 第68页 |
| ·结果与分析 | 第68-74页 |
| ·PTEN和AIB1之间相互作用的确定 | 第68-69页 |
| ·细胞核内PTEN和AIB1之间相互作用的确定 | 第69-71页 |
| ·PTEN-AIB1相互作用与PTEN磷酸酶活性的关系 | 第71-72页 |
| ·PTEN与AIB1相互作用结构域的确定 | 第72-74页 |
| ·讨论 | 第74-75页 |
| ·小结 | 第75-76页 |
| 4 Fbw7α在PTEN下调AIB1蛋白水平过程中的作用 | 第76-88页 |
| ·引言 | 第76页 |
| ·仪器与试剂 | 第76页 |
| ·仪器 | 第76页 |
| ·试剂 | 第76页 |
| ·菌种、细胞及质粒 | 第76页 |
| ·实验方法 | 第76-78页 |
| ·Gfp-Fbw7α质粒构建 | 第76-77页 |
| ·siFbw7质粒的构建 | 第77-78页 |
| ·质粒提取 | 第78页 |
| ·细胞培养 | 第78页 |
| ·细胞转染 | 第78页 |
| ·免疫沉淀(immunoprecipitation,IP) | 第78页 |
| ·考马斯亮蓝法测蛋白浓度 | 第78页 |
| ·实验结果与分析 | 第78-86页 |
| ·PTEN与Fbw7α之间相互作用的确定 | 第78-80页 |
| ·PTEN-Fbw7α相互作用与PTEN的磷酸酶活性之间的关系 | 第80页 |
| ·PTEN与Fbw7α相互作用结构域的确定 | 第80-81页 |
| ·Fbw7α在PTEN下调AIB1蛋白水平过程中的作用 | 第81-82页 |
| ·PTEN对AIB1-Fbw7α相互作用的影响 | 第82-84页 |
| ·PTEN和Fbw7α对AIB1泛素化水平的影响 | 第84-86页 |
| ·讨论 | 第86-87页 |
| ·小结 | 第87-88页 |
| 5 PTEN对AIB1转录活性的影响 | 第88-100页 |
| ·引言 | 第88页 |
| ·仪器与试剂 | 第88页 |
| ·仪器 | 第88页 |
| ·试剂 | 第88页 |
| ·实验方法 | 第88-89页 |
| ·质粒提取 | 第88页 |
| ·细胞培养 | 第88页 |
| ·细胞转染 | 第88页 |
| ·荧光素酶报告基因实验 | 第88-89页 |
| ·反转录PCR | 第89页 |
| ·Real-time-PCR | 第89页 |
| ·实验结果与分析 | 第89-97页 |
| ·不同剂量PTEN对AIB1转录活性的影响 | 第89-92页 |
| ·PI3K/AKT通路对AIB1转录活性的影响 | 第92页 |
| ·PTEN和Fbw7α对AIB1转录活性的影响 | 第92-94页 |
| ·PTEN对AIB1-ERα转录活性的影响 | 第94-96页 |
| ·PTEN对AIB1-ERα靶基因mRNA水平的影响 | 第96-97页 |
| ·讨论 | 第97-98页 |
| ·小结 | 第98-100页 |
| 6 PTEN对AIB1促乳腺癌细胞增殖功能的影响 | 第100-107页 |
| ·引言 | 第100页 |
| ·仪器与试剂 | 第100页 |
| ·仪器 | 第100页 |
| ·试剂 | 第100页 |
| ·实验方法 | 第100-102页 |
| ·质粒提取 | 第100页 |
| ·细胞培养 | 第100页 |
| ·细胞转染 | 第100-101页 |
| ·免疫印迹(Western Blot) | 第101页 |
| ·细胞克隆形成 | 第101页 |
| ·MTT检测细胞增殖 | 第101页 |
| ·流式细胞术 | 第101-102页 |
| ·实验结果与分析 | 第102-105页 |
| ·不同癌细胞系中PTEN与AIB1蛋白水平的相关性 | 第102-103页 |
| ·PTEN对AIB1促细胞增殖能力的影响 | 第103-105页 |
| ·PTEN和AIB1对细胞周期的影响 | 第105页 |
| ·讨论 | 第105-106页 |
| ·小结 | 第106-107页 |
| 7 结论与展望 | 第107-109页 |
| 结论 | 第107-108页 |
| 展望 | 第108-109页 |
| 创新点摘要 | 第109-110页 |
| 参考文献 | 第110-120页 |
| 作者简介 | 第120页 |
| 攻读博士学位期间科研项目及科研成果 | 第120-122页 |
| 致谢 | 第122-123页 |
