| 摘要 | 第1-7页 |
| ABSTRACT | 第7-12页 |
| 第一章 绪论 | 第12-30页 |
| ·RNA结合蛋白(RBPs) | 第12-14页 |
| ·RNA结合蛋白的结合区域与结合功能 | 第12-13页 |
| ·RNA结合蛋白结合RNA的特异性 | 第13页 |
| ·RNA结合蛋白与靶标RNA的相互作用 | 第13-14页 |
| ·生物防治 | 第14-18页 |
| ·植物内生细菌 | 第14-15页 |
| ·生防菌与植物互作 | 第15-17页 |
| ·普城沙雷氏菌Serratia plymuthica | 第17-18页 |
| ·RNA结合蛋白RsmA与Hfq | 第18-22页 |
| ·RNA结合蛋白RsmA | 第18-19页 |
| ·RsmA的生物功能 | 第19-20页 |
| ·RNA结合蛋白Hfq | 第20页 |
| ·Hfq的生物功能 | 第20-22页 |
| ·相关实验技术介绍 | 第22-27页 |
| ·生物膜技术 | 第22-23页 |
| ·自杀质粒与同源重组缺失技术 | 第23-24页 |
| ·接合转导(conjugation) | 第24-25页 |
| ·SDS-PAGE技术 | 第25-26页 |
| ·Western Blot技术 | 第26-27页 |
| ·研究的目的和意义 | 第27页 |
| ·主要研究内容和技术路线 | 第27-30页 |
| ·主要研究内容 | 第27-28页 |
| ·技术路线 | 第28-30页 |
| 第二章 G3菌株hfg与rsmA基因的克隆、过表达 | 第30-48页 |
| ·材料 | 第30-33页 |
| ·主要实验仪器 | 第30页 |
| ·主要试剂 | 第30页 |
| ·自配试剂 | 第30-33页 |
| ·方法 | 第33-37页 |
| ·引物设计及PCR片段扩增 | 第33-34页 |
| ·生物信息学分析 | 第34-35页 |
| ·E.coli中异源表达 | 第35-36页 |
| ·E.coli原核表达产物的SDS-PAGE电泳 | 第36页 |
| ·Western blot分析 | 第36-37页 |
| ·结果与分析 | 第37-46页 |
| ·S.plymuthica G3 hfq与rsmA的克隆 | 第37页 |
| ·S.plymuthica G3 hfq的序列分析 | 第37-38页 |
| ·S.plymuthica G3 rsmA的序列分析 | 第38-39页 |
| ·S.plymuthica G3 RsmA氨基酸序列分析 | 第39-40页 |
| ·S.plymuthica G3 RsmA进化树分析 | 第40页 |
| ·S.plymuthica G3 Hfq进化树分析 | 第40-41页 |
| ·S.plymuthica G3 Hfq进化树分析 | 第41-42页 |
| ·克隆鉴定 | 第42-44页 |
| ·原核表达 | 第44-46页 |
| ·Western Blot检测 | 第46页 |
| ·讨论 | 第46-47页 |
| 本章小结 | 第47-48页 |
| 第三章 G3菌株hfq向基因缺陷菌的构建与互补 | 第48-54页 |
| ·材料和试剂 | 第48页 |
| ·方法 | 第48-50页 |
| ·hfq基因酶切位点的选取与自杀载体pDM4/hfq-Gm的构建 | 第48-49页 |
| ·接合转导(mating) | 第49-50页 |
| ·测序 | 第50页 |
| ·缺陷菌株的的互补 | 第50页 |
| ·结果与分析 | 第50-53页 |
| ·Gm(庆大霉素)基因的插入与酶切鉴定 | 第50-51页 |
| ·hfq-Gm基因与pDM4载体的连接与酶切鉴定 | 第51-52页 |
| ·hfq缺陷菌株的PCR扩增鉴定 | 第52页 |
| ·hfq缺陷菌株的互补PCR鉴定 | 第52-53页 |
| ·讨论 | 第53页 |
| 本章小结 | 第53-54页 |
| 第四章 突变分析鉴定Hfq蛋白的调控功能 | 第54-64页 |
| ·材料 | 第54页 |
| ·主要实验仪器 | 第54页 |
| ·主要实验试剂 | 第54页 |
| ·自配试剂 | 第54页 |
| ·菌株 | 第54页 |
| ·方法 | 第54-56页 |
| ·菌株的蛋白酶活性分析 | 第54-55页 |
| ·菌株的几丁质酶活性分析 | 第55页 |
| ·菌株的运动性分析 | 第55页 |
| ·生物膜(biofilm)的检测 | 第55页 |
| ·抑菌活性的检测 | 第55-56页 |
| ·结果与分析 | 第56-62页 |
| ·蛋白酶活性检测 | 第56页 |
| ·几丁质酶活性检测 | 第56-57页 |
| ·泳动(swimming)检测 | 第57-58页 |
| ·群聚(swarming)检测 | 第58-59页 |
| ·生物膜的测定 | 第59-61页 |
| ·抑菌活性的测定 | 第61-62页 |
| ·讨论 | 第62-63页 |
| 本章小节 | 第63-64页 |
| 第五章 过表达分析鉴定RSMA的功能 | 第64-69页 |
| ·材料 | 第64页 |
| ·主要实验仪器 | 第64页 |
| ·主要实验试剂 | 第64页 |
| ·自配试剂 | 第64页 |
| ·菌株 | 第64页 |
| ·方法 | 第64页 |
| ·结果与分析 | 第64-68页 |
| ·蛋白酶活性检测 | 第64-65页 |
| ·几丁质酶活性检测 | 第65页 |
| ·泳动(swimming)检测 | 第65-66页 |
| ·群聚(swarming)检测 | 第66页 |
| ·生物膜的测定 | 第66-67页 |
| ·抑菌活性的测定 | 第67-68页 |
| ·讨论 | 第68页 |
| 本章小节 | 第68-69页 |
| 第六章 总结与展望 | 第69-70页 |
| ·主要工作总结 | 第69页 |
| ·工作展望 | 第69-70页 |
| 参考文献 | 第70-79页 |
| 致谢 | 第79-80页 |
| 在学期间发表论文 | 第80页 |
