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深海环境中未培养古菌多样性和代谢途径分析的研究

摘要第1-7页
ABSTRACT第7-11页
第一章 前言第11-27页
   ·深海微生物研究进展第11-17页
     ·深部生物圈的发现历程第11-12页
     ·深海微生物的数量分布特征第12-13页
     ·深海微生物的多样性第13-15页
     ·深海微生物的能量来源第15-17页
   ·深海微生物生态第17-22页
     ·冷泉微生物生态第17-21页
     ·深海热液区微生物生态第21-22页
   ·微生物分子生态研究方法第22-25页
     ·环境样品中核酸的直接提取第22-23页
     ·宏基因组学第23页
     ·宏基因组大片段文库的构建第23-24页
     ·基于 PCR 的方法分析微生物群落结构第24页
     ·微生物定量技术第24-25页
   ·本研究的目的、思路和意义第25-27页
第二章 材料与方法第27-37页
   ·样品和实验材料第27-30页
     ·样品采集区概况第27-28页
     ·主要试剂第28页
     ·PCR 引物第28-29页
     ·主要仪器第29-30页
     ·常用溶液的配置第30页
     ·序列分析软件及网站第30页
   ·基本方法第30-37页
     ·环境样品总 DNA 的提取第30-31页
     ·脉冲电泳第31页
     ·低熔点琼脂糖回收 DNA第31-32页
     ·Fosmid 文库构建第32-34页
     ·Fosmid 质粒的提取第34页
     ·PCR 产物的纯化第34-35页
     ·连接反应第35页
     ·菌落 PCR第35-36页
     ·实时荧光定量 PCR(Real Time PCR)第36-37页
第三章 泥火山富集物宏基因组文库构建及微生物的代谢途径分析的研究第37-72页
   ·样品采集与富集第37页
   ·Fosmid 文库构建第37-40页
   ·Fosmid 文库筛选与测序第40-43页
     ·古菌 16S rRNA 基因第40-41页
     ·AOM 途径中的功能基因第41-43页
   ·MBGD 片段 6A10 的分析第43-50页
     ·6A10 插入片段基因组注释第43-47页
     ·6A10 插入片段 DNA 代谢分析第47页
     ·6A10 插入片段异戊烯基化合物代谢分析第47-50页
   ·ANME-2a 类群 fosmid 分析第50-67页
     ·Fosmid 测序结果和基因组注释第50-57页
     ·Fosmid 中甲烷代谢基因的 BlastP 分析第57-58页
     ·ANME-1 和 ANME-2a 中甲烷代谢基因的进化与比较分析第58-67页
   ·讨论第67-72页
     ·Fosmid 文库的构建第67-68页
     ·Fosmid 文库的筛选和测序第68页
     ·MBGD 基因组片段信息第68-70页
     ·ANME-1 和 ANME-2a 中甲烷代谢基因的进化与比较分析第70-72页
第四章 瓜伊马斯深海热液口古菌多样性研究第72-81页
   ·样品采集位点第72页
   ·古菌的定量第72-73页
   ·古菌 16S rRNA 基因文库分析第73页
   ·古菌 16S rRNA 基因多样性第73-79页
     ·泉古菌 16S rRNA 基因多样性第74-75页
     ·MCG 古菌 16S rRNA 基因多样性第75-77页
     ·广古菌 16S rRNA 基因多样性第77-79页
   ·讨论第79-81页
第五章 展望第81-82页
参考文献第82-92页
致谢第92-93页
攻读硕士学位期间已发表或录用的论文第93页

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