| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-12页 |
| 1 前言 | 第12-25页 |
| ·海洋污染及其现状 | 第12页 |
| ·海洋石油烃的污染 | 第12-15页 |
| ·海洋中石油烃污染的影响和危害 | 第13-14页 |
| ·海洋污染物的迁移和检测 | 第14页 |
| ·海洋石油污染的治理 | 第14-15页 |
| ·石油污染物的微生物降解 | 第15-17页 |
| ·石油污染物降解微生物的类群 | 第15-16页 |
| ·石油污染物微生物降解原理 | 第16-17页 |
| ·加氧酶 | 第17页 |
| ·低温微生物分布与分类 | 第17-20页 |
| ·低温微生物适冷性机理 | 第18-19页 |
| ·低温微生物在生物修复中的应用 | 第19页 |
| ·极端微生物的研究在南极环境保护上的意义 | 第19-20页 |
| ·实验技术 | 第20-23页 |
| ·激光光镊拉曼光谱技术 | 第20-22页 |
| ·酶分离纯化技术 | 第22-23页 |
| ·基因组步移 | 第23页 |
| ·本论文的目的和意义 | 第23-25页 |
| 2 南极海洋石油烃低温降解菌Shewanella sp. NJ49 的低温降解特性及拉曼光谱研究 | 第25-35页 |
| ·材料和方法 | 第26-27页 |
| ·试验菌株 | 第26页 |
| ·试剂与仪器 | 第26页 |
| ·培养基 | 第26-27页 |
| ·实验方法 | 第27-28页 |
| ·菌种的活化培养 | 第27页 |
| ·NJ49 对正十六烷的降解实验 | 第27页 |
| ·正十六烷低温降解GC-MS 测定 | 第27-28页 |
| ·激光光镊拉曼光谱测定与分析 | 第28页 |
| ·结果和讨论 | 第28-34页 |
| ·NJ49 培养结果 | 第28-29页 |
| ·南极石油烃低温降解菌Shewanella sp. NJ49 降解正十六烷GC-MS 分析 | 第29-31页 |
| ·拉曼光谱测定与分析结果 | 第31-34页 |
| ·小结 | 第34-35页 |
| 3 南极海洋石油烃低温降解菌Shewanella sp. NJ49 降解酶的定域 | 第35-41页 |
| ·材料和方法 | 第35-36页 |
| ·试验菌株 | 第35页 |
| ·试剂与仪器 | 第35-36页 |
| ·培养基 | 第36页 |
| ·实验方法 | 第36-37页 |
| ·菌种的培养和降解实验 | 第36页 |
| ·降解酶的定位 | 第36-37页 |
| ·气相色谱分析和气相色谱-质谱分析 | 第37页 |
| ·结果与讨论 | 第37-40页 |
| ·降解酶的定域 | 第37-38页 |
| ·酶降解正十六烷的代谢产物 | 第38-40页 |
| ·小结 | 第40-41页 |
| 4 南极海洋石油烃低温降解菌Shewanella sp. NJ49 单加氧酶分离纯化及性质研究 | 第41-52页 |
| ·材料与方法 | 第41-45页 |
| ·试验菌株 | 第41页 |
| ·试剂与仪器 | 第41-42页 |
| ·试验与方法 | 第42-45页 |
| ·结果与讨论 | 第45-51页 |
| ·气相色谱图 | 第45-46页 |
| ·酶活检测结果 | 第46-47页 |
| ·Sephadex G-75 凝胶过滤 | 第47页 |
| ·聚丙烯酰胺凝胶电泳 | 第47-48页 |
| ·环境因素对酶活的影响 | 第48-51页 |
| ·小结 | 第51-52页 |
| 5 南极海洋石油烃低温降解菌Shewanella sp. NJ49 烷烃单加氧酶基因克隆与表达分析 | 第52-71页 |
| ·试验试剂和材料 | 第52-53页 |
| ·实验方法 | 第53-57页 |
| ·alkB 基因片段的克隆 | 第53页 |
| ·基因组步移法克隆单加氧酶alkB 基因全长序列 | 第53-57页 |
| ·实时荧光定量PCR | 第57-58页 |
| ·结果与讨论 | 第58-70页 |
| ·alkB 片段序列的克隆 | 第58-59页 |
| ·基因组步移第一次PCR 结果 | 第59-61页 |
| ·基因组步移第二次PCR 结果 | 第61-62页 |
| ·第二次PCR 产物纯化结果和全长序列拼接 | 第62-64页 |
| ·alkB 氨基酸序列分析 | 第64-66页 |
| ·实时荧光定量表达分析 | 第66-70页 |
| ·小结 | 第70-71页 |
| 6 南极海洋石油烃低温降解菌Shewanella sp. NJ49 双加氧酶基因克隆与表达分析 | 第71-79页 |
| ·试验试剂和材料 | 第71-72页 |
| ·实验方法 | 第72页 |
| ·实时荧光定量PCR | 第72-73页 |
| ·结果与讨论 | 第73-78页 |
| ·双加氧酶片段序列的克隆 | 第73-74页 |
| ·基因组步移第一次PCR 结果 | 第74页 |
| ·基因组步移第二次PCR 结果 | 第74页 |
| ·第二次PCR 产物纯化结果和全长序列拼接 | 第74-75页 |
| ·实时荧光定量表达分析 | 第75-78页 |
| ·小结 | 第78-79页 |
| 7 结语 | 第79-81页 |
| 参考文献 | 第81-88页 |
| 攻读硕士期间发表文章 | 第88-89页 |
| 致谢 | 第89页 |
