摘要 | 第1-7页 |
Abstract | 第7-10页 |
目录 | 第10-13页 |
英文缩写词 | 第13-15页 |
第1章 绪论 | 第15-31页 |
·植物PP2C磷酸酶的研究 | 第15-18页 |
·蛋白磷酸酶的分类 | 第15页 |
·PP2C磷酸激酶的结构与生化特征 | 第15-18页 |
·植物中PP2C的功能 | 第18-27页 |
·PP2C参与ABA调控的胁迫信号传导 | 第18-20页 |
·PP2C参与ABA调控的种子休眠/萌发信号途径 | 第20-21页 |
·PP2C参与ABA调控的气孔运动 | 第21-22页 |
·PP2C参与ABA调控的抗逆信号途径 | 第22-24页 |
·拟南芥ABA信号途径PP2C负调控因子对逆境胁迫的响应特征 | 第24-25页 |
·PP2C参与植物抗病反应 | 第25页 |
·PP2C在植物体内与转录因子和激酶相互作用 | 第25-26页 |
·干旱胁迫参与PP2C基因的调节 | 第26-27页 |
·ABA胁迫下诱导保卫细胞气孔的关闭 | 第27-29页 |
·植物中ABA调控气孔开放的三种模式 | 第27-28页 |
·植物保卫细胞中ABA信号的传递网络 | 第28-29页 |
·本论文工作设想 | 第29-31页 |
第2章 拟南芥HAI-1基因的生物信息学分析 | 第31-39页 |
·实验材料 | 第31页 |
·试验材料 | 第31页 |
·相关硬件及软件 | 第31页 |
·实验方法 | 第31-32页 |
·转录调控区域元件分析 | 第31-32页 |
·HAI-1蛋白的一级结构分析 | 第32页 |
·HAI-1蛋白的三级结构分析 | 第32页 |
·实验结果 | 第32-38页 |
·启动子顺式作用元件分析结果 | 第32-35页 |
·蛋白的一级结构分析结果 | 第35-37页 |
·蛋白的三级结构分析结果 | 第37-38页 |
·讨论 | 第38-39页 |
第3章 拟南芥HAI-1基因的表达及功能分析 | 第39-78页 |
·材料与方法 | 第39-52页 |
·实验材料 | 第39-40页 |
·实验方法 | 第40-46页 |
·质粒提取 | 第46页 |
·感受态细胞的制备 | 第46-47页 |
·菌液PCR检测 | 第47页 |
·亚细胞定位 | 第47页 |
·农杆菌介导转化拟南芥 | 第47-48页 |
·RNA提取及cDNA链生成 | 第48-49页 |
·获得过表达转基因的纯合植株 | 第49页 |
·构建Promoter::GW-GUS表达载体 | 第49页 |
·强启动子转基因植株的获得及GUS染色分析 | 第49页 |
·胁迫条件下HAI-1基因的表达分析 | 第49-50页 |
·拟南芥59220T-DNA插入突变体纯合子的分子鉴定 | 第50页 |
·气孔观测方法 | 第50-52页 |
·结果与分析 | 第52-76页 |
·HAI-1基因T-DNA插入突变体鉴定结果 | 第52-53页 |
·HAI-1基因T-DNA插入突变体的半定量的鉴定结果 | 第53-54页 |
·HAI-1基因在不同的组织部位的Q-PCR定量的鉴定结果 | 第54-55页 |
·HAI-1基因的表达受ABA等逆境胁迫的诱导 | 第55-56页 |
·ABA相关基因在T-DNA缺失突变体中的表达 | 第56-58页 |
·T-DNA插入突变体的萌发率表型分析 | 第58-59页 |
·HAI-1基因过表达转基因植株株系鉴定 | 第59-60页 |
·HAI-1基因过表达转基因植株与野生型表型分析 | 第60-62页 |
·ABA胁迫诱导相关基因在过表达转基因植株中的表达情况 | 第62-63页 |
·过表达转基因植株叶片下表皮的气孔观测情况 | 第63-65页 |
·HAI-1基因的各突变体根长表型分析 | 第65-67页 |
·不同浓度ABA处理HAI-1基因的各突变体的萌发率比较 | 第67-69页 |
·不同浓度NaCl处理HAI-1基因的各突变体的萌发率比较 | 第69-71页 |
·拟南芥HAI-1基因的组织表达及GUS染色分析 | 第71-74页 |
·拟南芥HAI-1基因各突变体的干旱胁迫与失水实验 | 第74-75页 |
·HAI-1::GFP融合表达载体的构建及瞬时表达分析 | 第75-76页 |
·讨论 | 第76-78页 |
第4章 HAI-1蛋白的原核表达分析 | 第78-87页 |
·材料与方法 | 第78-83页 |
·实验材料 | 第78-80页 |
·实验方法 | 第80-83页 |
·HAI-1基因片段的制备 | 第80页 |
·pEDST17表达载体的制备 | 第80页 |
·大肠杆菌DH5α和BL21 star感受态细胞的制备 | 第80-81页 |
·大肠杆菌的质粒转化 | 第81页 |
·酶切和连接反应 | 第81页 |
·诱导蛋白表达 | 第81-82页 |
·表达产物作可溶性检测 | 第82页 |
·表达产物的SDS-PAGE分析 | 第82-83页 |
·结果与分析 | 第83-86页 |
·HAI-1基因片段的克隆与原核表达载体的构建 | 第83页 |
·HAI-1原核表达产物的SDS-PAGE检测 | 第83-84页 |
·HAI-1表达条件的优化 | 第84-86页 |
·讨论 | 第86-87页 |
第5章 拟南芥T-DNA插入突变体AtCAL1和AtCAL2的晚花表型的遗传与生理分析 | 第87-104页 |
·材料与方法 | 第87-89页 |
·实验材料 | 第87-88页 |
·实验方法 | 第88-89页 |
·结果与分析 | 第89-103页 |
·缺失突变体AtCAL1和AtCAL2植株的表型特征 | 第89-95页 |
·AtCAL1和AtCAL2基因一系列开花相关基因的转录表达 | 第95-96页 |
·突变体植株AtCAL1和AtCAL2胁迫分析 | 第96-97页 |
·突变体AtCAL1和AtCAL2 ABA胁迫下气孔比较 | 第97-99页 |
·转基因GFP荧光蛋白AtCAL1植株的组织表达 | 第99-103页 |
·讨论 | 第103-104页 |
结论 | 第104-107页 |
参考文献 | 第107-121页 |
附录A 攻读学位期间所发表的学术论文目录 | 第121-122页 |
致谢 | 第122页 |