| 摘要 | 第1-9页 |
| Abstract | 第9-11页 |
| 1 引言 | 第11-26页 |
| ·哺乳动物卵泡发育的研究进展 | 第11-21页 |
| ·哺乳动物原始卵泡的形成 | 第12-13页 |
| ·原始卵泡的维持及募集的启动 | 第13-15页 |
| ·腔前卵泡的发育 | 第15-17页 |
| ·卵泡膜的形成以及卵泡膜的生理学功能 | 第17-19页 |
| ·有腔卵泡的发育 | 第19-20页 |
| ·排卵及黄体化 | 第20-21页 |
| ·Bmp-6基因的研究进展 | 第21-25页 |
| ·BMPs家族概况 | 第21页 |
| ·Bmp-6基因的发现与结构 | 第21-22页 |
| ·BMP-6的信号调节 | 第22-23页 |
| ·BMP-6的生物学功能 | 第23-25页 |
| ·本研究的目的和意义 | 第25-26页 |
| 2 材料与方法 | 第26-38页 |
| ·免疫荧光 | 第26-27页 |
| ·载玻片的处理 | 第26页 |
| ·冰冻切片方法 | 第26页 |
| ·试剂及溶液 | 第26-27页 |
| ·免疫荧光流程 | 第27页 |
| ·猪卵泡颗粒细胞的体外培养及细胞处理 | 第27-30页 |
| ·猪卵泡颗粒细胞细胞的分离与体外培养 | 第27-29页 |
| ·MTT法检测卵泡颗粒细胞体外增殖 | 第29页 |
| ·细胞总蛋白的提取 | 第29页 |
| ·细胞总RNA的提取 | 第29-30页 |
| ·猪卵母细胞体外成熟培养 | 第30-32页 |
| ·主要仪器 | 第30页 |
| ·主要试剂 | 第30-31页 |
| ·猪卵母细胞的分离及体外成熟培养 | 第31页 |
| ·成熟卵母细胞的挑选 | 第31-32页 |
| ·Real-time RT-PCR | 第32-33页 |
| ·引物序列 | 第32页 |
| ·总RNA的提取、消化与反转录 | 第32-33页 |
| ·Real time PCR反应 | 第33页 |
| ·Westerr blot | 第33-36页 |
| ·相关溶液的制备 | 第33-35页 |
| ·蛋白样品制备 | 第35页 |
| ·SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳 | 第35-36页 |
| ·免疫印记和显影 | 第36页 |
| ·数据统计和分析 | 第36-38页 |
| ·卵母细胞体外成熟率的数据分析 | 第36页 |
| ·MTT法检测颗粒细胞体外增殖的数据分析 | 第36-37页 |
| ·Real-time RT-PCR数据分析 | 第37-38页 |
| 3 结果 | 第38-49页 |
| ·BMP-6蛋白在猪卵泡中的表达 | 第38-39页 |
| ·免疫荧光检测BMP-6在猪卵泡中的表达 | 第38页 |
| ·Western blot检测BMP-6在猪卵泡中的表达 | 第38-39页 |
| ·BMP-6重组蛋白对猪卵母细胞体外成熟的影响 | 第39-40页 |
| ·BMP-6重组蛋白对体外培养的猪卵泡颗粒细胞的影响 | 第40-49页 |
| ·猪卵泡颗粒细胞的培养 | 第40-41页 |
| ·MTT法检测外源的BMP-6对猪卵泡颗粒细胞体外增殖的影响 | 第41-42页 |
| ·Real-Time PCR检测孕酮合成相关基因的mRNA水平变化 | 第42-47页 |
| ·Western Blot检测孕酮合成相关基因的蛋白水平变化 | 第47-49页 |
| 4 讨论 | 第49-53页 |
| ·BMP-6在猪卵泡中的表达 | 第49页 |
| ·BMP-6与猪卵母细胞的成熟 | 第49-50页 |
| ·BMP-6对猪卵泡颗粒细胞增殖的影响 | 第50页 |
| ·BMP-6对孕酮合成中的关键蛋白StAR和3β-HSD表达的影响 | 第50-53页 |
| 5 结论 | 第53-54页 |
| 致谢 | 第54-55页 |
| 参考文献 | 第55-64页 |
| 攻读硕士期间发表的论文 | 第64页 |
